微小核糖核酸-155对肝癌细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的影响

目的探究微小核糖核酸(miR)-155靶向蛋白酪氨酸磷酸酶非受体21型(PTPN21)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法体外培养Huh7人肝癌细胞并通过miR-155沉默慢病毒(sh-miR-155)转染下调miR-155。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Huh7细胞miR-155沉默效果,获得稳转细胞株后将细胞株随机分为:Blank组(正常Huh7细胞)、shNC组(Huh7细胞+miR-155空载体)、sh-miR-155组(Huh7细胞+miR-155沉默)、sh-miR-155+Recilisib组(Huh7细胞+miR-155沉默+PI3K-AKT激动剂)、shNC+Recilisib组(Huh7细胞+miR-155空载体+PI3K-AKT激动剂)。双荧光素酶实验检测PTPN21是否为miR-155的下游;溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术测定各组细胞凋亡水平;Transwell实验分析各组细胞侵袭与迁移能力;蛋白质印迹检测各组PTPN21、通路相关蛋白PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase-3表达变化差异。结果sh-miR-155组中miR-155的表达水平低于Blank组及shNC组(P<0.0001),miR-155在Blank组及shNC组表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。MTT结果显示,sh-miR-155组中Huh7细胞在2、3、4、5 d时A值均低于Blank组及shNC组(P<0.0001),而Blank组与shNC组差异无统计学意义(P>0.05);sh-miR-155组在2、3、4、5 d时A值低于sh-miR-155+Recilisib组及shNC+Recilisib组(P=0.0052,P<0.0001),而sh-miR-155+Recilisib组在2、3、4、5 d时A值低于shNC+Recilisib组(P<0.0001)。Blank组与shNC组迁移及侵袭细胞数差异无统计学意义(P>0.05),激活PI3K-AKT信号通路后,与Blank组相比,shNC+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力显著增加(P<0.0001)。相反,沉默miR-155后Huh7细胞的迁移及侵袭细胞数明显低于Blank组及shNC组(P<0.0001),而PI3K激动剂逆转了这一现象,与sh-miR-155组相比,sh-miR-155+Recilisib组肝癌细胞的迁移、侵袭能力增强(P=0.0002)。慢病毒转染Huh7人肝癌细胞以沉默miR-155,下调miR-155抑制PTPN21调控PI3K-AKT信号通路从而抑制肝癌细胞的侵袭、迁移、增殖能力,促进肝癌细胞凋亡。结论miR-155通过靶向PTPN21调控PI3K-AKT信号通路抑制肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖。miR-155可能是未来肝癌治疗潜在靶点。

观察化疗联合吉非替尼小分子靶向治疗晚期肺癌患者的疗效及对其血清CYFRA21-1的影响

目的探究对晚期肺癌患者采取化疗联合吉非替尼小分子靶向治疗的疗效及对其血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)的影响。方法106例晚期肺癌患者,根据治疗方案差异将其分成对照组(53例)和观察组(53例)。对照组采取化疗治疗,观察组采取化疗联合吉非替尼小分子靶向治疗。比较两组临床疗效及治疗前后血清炎性因子(白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-1β)、血清肿瘤标志物[CYFRA21-1、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)]、肺功能(第1秒用力呼气容积占用力肺活量的比值、最大通气量、最大呼气中段流量)、生存质量。结果观察组临床缓解率显著高于对照组(86.79%VS 66.04%,P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-1β水平均降低,且观察组治疗后白细胞介素-6(60.78±5.30)pg/ml、白细胞介素-8(73.86±10.02)pg/ml、白细胞介素-1β(58.57±20.51)pg/ml均低于对照组的(67.82±4.03)、(86.78±9.34)、(71.96±25.11)pg/ml(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后CYFRA21-1、CA125、CA199水平均降低,且观察组治疗后CYFRA21-1(8.47±1.09)μg/L、CA125(38.43±5.12)kU/L、CA199(40.23±6.16)kU/L均低于对照组的(12.58±1.33)μg/L、(50.67±3.49)kU/L、(58.40±7.75)kU/L(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后第1秒用力呼气容积占用力肺活量的比值、最大通气量、最大呼气中段流量均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后食欲下降、气促、咳嗽、疲倦、疼痛、痰中带血评分均降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。结论化疗联合吉非替尼小分子靶向治疗晚期肺癌能够提高患者的临床疗效,降低血清血清炎性因子、相关肿瘤标志物水平,进一步改善肺功能。

微小核糖核酸-21对人舌鳞状细胞癌细胞系生物学特性的影响

目的研究微小核糖核酸-21(miR-21)对人舌鳞状细胞癌细胞系生物学特性的影响。方法将2’O-Me修饰的正义和反义miR-21寡核苷酸序列通过脂质体转染技术转染到舌鳞状细胞癌细胞Tca8113及其高转移株内,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测转染后miR-21在细胞中的表达变化,通过甲基噻唑基四唑(MTT)法、流式细胞术、AnnexinⅤ细胞早期凋亡检测、划痕实验及Transwell实验分别检测细胞增殖能力、细胞周期、细胞早期凋亡情况、细胞迁移及侵袭能力的变化。结果靶向miR-21的反义寡核苷酸可以有效地抑制Tca8113及其高转移株细胞的增殖,促进细胞凋亡,并抑制细胞的迁移和侵袭能力。结论细胞内转染反义miR-21寡核苷酸序列后,可以降低舌鳞状细胞癌细胞中miR-21的表达,并对舌鳞状细胞癌细胞的生物学行为产生影响。

强化阿托伐他汀对不稳定性心绞痛患者冠状动脉介入治疗术后CD4+T淋巴细胞微小核糖核酸-21表达的影响

目的：探讨强化阿托伐他汀对不稳定性心绞痛患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后CD4＋T淋巴细胞微小核糖核酸-21（microRNA-21，miRNA-21）表达的影响。方法：入选2011—11至2012-05在我院住院行择期PCI术的不稳定性心绞痛患者68例，随机分为强化他汀组（阿托伐他汀术前80mg／d，术后40mg/d，n=34）和常规他汀组（阿托伐他汀术前术后均20mg／d，n=34）：分别于PCI术前、术后16-24h抽血检查肌酸激酶同工酶（CK—MB）、肌钙蛋白I、超敏C反应蛋白及新鲜外周血。实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应法（qRT—PCR）检测CD4＋T淋巴细胞miRNA-21、程序性细胞死亡因子4（PDCD4）mRNA表达，蛋白免疫印迹法检测CD4＋T淋巴细胞PDCD4蛋白表达，酶联免疫法检测血清白细胞介素-10、肿瘤坏死因子-a的浓度。结果：强化他汀组肌钙蛋白I高于正常高值1—5倍及高于5倍以上的发生率低于常规他汀组；强化他汀组CK—MB高于正常高值的发生率也低于常规他汀组，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。常规他汀组术后超敏C反应蛋白、PDCD4mRNA、PDCD4蛋白、肿瘤坏死因子-a较术前明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。强化他汀组术后miRNA-21、白细胞介素-10表达量较术前明显升高，PDCD4mRNA、PDCD4蛋白较术前明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：强化阿托伐他汀减轻PCI术后心肌损伤可能与上调PCI术后CD4＋T淋巴细胞miRNA-21表达，导致其靶蛋白PDCD4表达减少有关。

微小核糖核酸-21反义寡核苷酸对人舌鳞癌细胞生长抑制的体内研究

目的研究微小核糖核酸-21(miR-21)反义寡核苷酸(AS-miR-21)对人舌鳞癌生长的抑制作用。方法采用稳定转染pGL6荧光素酶报告基因质粒的舌鳞癌细胞Tca8113-luc接种裸鼠,建立移植瘤动物模型,瘤体内注射AS-miR-21,应用活体成像和TUNEL等实验技术进行AS-miR-21对人舌鳞癌细胞系生长抑制的体内研究。结果通过转染pGL6荧光素酶报告基因质粒构建了稳定表达荧光素酶活性的Tca8113-luc细胞株。裸鼠皮下荷瘤模型成瘤率高,肿瘤生长稳定。在瘤体内注射AS-miR-21后肿瘤生长减慢,活体成像中光子数偏低,肿瘤标本中坏死灶少见,细胞核变小,染色变浅,异型性减低,新生血管数减少。肿瘤组织中miR-21表达明显下降,凋亡指数升高。结论肿瘤内注射AS-miR-21可以降低舌鳞癌细胞中miR-21的表达,促进舌鳞癌肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤的生长。

高效液相色谱-电化学检测法测定脱氧核糖核酸分子氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷

采用螯合剂 Fe2 + H2 O2 作为Fenton型反应的氧化源 ,与小牛胸腺脱氧核糖核酸反应生成 8 羟基脱氧鸟苷 ( 8 OhdG) ,建立脱氧核糖核酸 (DNA)分子氧化损伤的体外反应模型 ,用高效液相色谱 电化学检测方法对 8 OhdG进行定量。建立的方法灵敏度高 ,最低检出限 30fmol,线性范围宽 ,从 0 .32pmol到3.2nmol,相关系数达 0 .9996,方法能够适用于生物体与细胞脱氧核糖核酸分子低水平氧化损伤的检测。

微小核糖核酸-21调控spry2影响Jurkat细胞炎症反应的研究

目的:探讨微小核糖核酸(miRNA)-21通过调控spry2进而对Jurkat细胞炎症反应的影响。方法:将人T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞分为miRNA-21模拟物组、miRNA-21模拟物阴性对照组、miRNA-21抑制物组和miRNA-21抑制物组阴性对照组,每组例数为8,进行细胞转染,使用荧光定量PCR检测各组细胞的miRNA-21和spry2 mRNA的表达水平,采用蛋白免疫印迹技术检测各组spry2蛋白表达情况,同时用酶联免疫法检测细胞上清液IL-10、IL-2和TNF-α的分泌水平。结果:与其阴性对照组比较,模拟物组miRNA-21的相对表达量和IL-10的分泌水平明显增加(P<0.05),spry2 mRNA的相对表达量和spry2的相对蛋白含量显著减少(P<0.05);抑制物组miRNA-21的相对表达量和细胞上清液IL-10的分泌水平明显减少(P<0.05),spry2 mRNA相对表达量和spry2的相对蛋白含量显著增加(P<0.05);两组细胞上清液TNF-α和IL-2的分泌水平均无明显变化(P>0.05)。结论:在Jurkat细胞中,miRNA-21可能通过抑制其靶基因spry2的表达而促进抗炎细胞因子IL-10的分泌,表明miRNA-21可能通过影响IL-10的分泌而作为血管的一种保护因子。

微小核糖核酸-21、金属基质蛋白酶-9、骨桥蛋白水平变化在PCI患者术后再狭窄中的预测价值

目的探讨微小核糖核酸-21(mi RNA-21)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、骨桥蛋白(OPN)水平变化在PCI患者术后支架内再狭窄中的预测价值。方法选择2014年1月~2016年1月于郑州市中心医院心内科收治的PCI支架置入术后复查冠状动脉造影患者110例作为研究对象,按照冠状动脉造影结果分为再狭窄组(n=17)和未再狭窄组(n=93),两组患者均于复查时检测血清mi RNA-21表达水平及MMP-9、OPN、血脂等生化指标,对比两组患者的临床资料及血清mi RNA-21、MMP-9、OPN、血脂等表达水平。结果再狭窄组患者的支架置入数量较未再狭窄组少,支架直径较未再狭窄组小,累及前降支、三支病变例数明显多于未再狭窄组,再狭窄组患者的mi RNA-21、CRP、MMP-9及OPN表达水平均显著升高,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,mi RNA-21、OPN及MMP-9表达水平升高均是发生术后支架内再狭窄的独立危险因素(P均<0.05),较大的支架直径是支架置入术后再狭窄的保护因素(P<0.05)。血清mi RNA-21、OPN、MMP-9单项及联合检测的ROC曲线下ACU面积分别为0.898、0.782、0.739及0.977,联合检测可增加预测的特异性(94.62%)、准确性(90.91%)及阳性预测值(94.62%)。结论 Mi RNA-21、OPN及MMP-9表达水平升高与PCI患者术后支架内再狭窄关系密切,联合检测对PCI患者术后支架内再狭窄具有较高的预测价值。

微小核糖核酸-21对乳腺癌MCF-7细胞反转录富含半胱氨酸蛋白表达的调节研究

目的探讨乳腺癌MCF-7细胞中微小核糖核酸-21(microRNA-21,miR-21)对反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)表达的调控作用。方法将miR-21模拟物、miR-21抑制物及模拟物阴性对照、抑制物阴性对照各组瞬时转染到MCF-7细胞中,48 h后通过荧光定量聚合酶链反应检测miR-21在细胞的表达情况,蛋白质印迹法检测转染后RECK表达水平变化。结果细胞转染48 h后,miR-21抑制物组和miR-21模拟物组miR-21的表达分别与转染空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.001),转染miR-21抑制物组miR-21的表达明显下降,转染miR-21模拟物组miR-21的表达明显上调;细胞转染miR-21各组后RECK表达差异有统计学意义(P<0.01),miR-21抑制物组相对其阴性对照组,RECK表达明显上升(P<0.001);miR-21模拟物组相对其阴性对照组,RECK表达明显下降(P<0.001)。结论miR-21可以抑制乳腺癌MCF-7细胞RECK表达,可能成为判断乳腺癌患者预后的评价指标及肿瘤治疗的新靶点。

芒柄花素通过miR-1229/ZDHHC9分子轴对胶质瘤细胞增殖、活力及凋亡的影响

目的:探讨芒柄花素对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其分子作用机制。方法:构建皮下移植瘤小鼠模型,灌胃给予5.72、14.31、22.9、31.49 mg/kg剂量的芒柄花素,观察肿瘤重量、体积变化;免疫组织化学法检测肿瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达。用不同浓度(20、50、80、110μmol/L)的芒柄花素处理TJ905细胞,并将TJ905细胞分为空白对照组、110μmol/L芒柄花素组、110μmol/L芒柄花素+miR-1229组、110μmol/L芒柄花素+miR-1229+ZDHHC9组、miR-NC组、miR-1229 mimic组。用Edu实验、CCK-8实验检测细胞增殖能力,TUNEL实验检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验检测miR-1229、ZDHHC9 mRNA表达水平,在线网站及双荧光素酶报告基因法验证miR-1229与ZDHHC9靶向结合。结果:与空白对照组比较,不同剂量的芒柄花素处理组肿瘤体积、重量及PCNA蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。与对照组比较,不同浓度(20、50、80、110μmol/L)的芒柄花素处理后,细胞增殖率显著降低,凋亡率显著升高(均P<0.05);与110μmol/L芒柄花素组比较,110μmol/L芒柄花素+miR-1229组细胞增殖率、细胞活力均显著降低,凋亡率显著增加(均P<0.05);与110μmol/L芒柄花素+miR-1229组比较,110μmol/L芒柄花素+miR-1229+ZDHHC9组细胞增殖率、细胞活力均显著增加,凋亡率显著下降(均P<0.05);双荧光素酶报告基因实验验证miR-1229与ZDHHC9靶向结合。结论:芒柄花素可能通过miR-1229/ZDHHC9分子轴抑制胶质瘤细胞增殖,并诱导其凋亡。

血浆微小核糖核酸-21对急性心肌梗死患者心肌缺血程度及预后的评估价值分析

目的探讨血浆微小核糖核酸-21(miRNA-21)水平评估急性心肌梗死(AMI)患者心肌缺血严重程度及预后的临床价值。方法选取150例急性ST段抬高型心肌梗死患者作为研究对象,根据心肌缺血严重程度将患者分为轻度组(SYNTAX评分<23分)58例、中度组(SYNTAX评分23~32分)48例和重度组(SYNTAX评分>32分)44例。比较3组治疗前后血浆miRNA-21、生化指标水平以及Gensini评分。采用Pearson直线相关分析评估血浆miRNA-21与Gensini评分、SYNTAX评分的相关性。随访1年,依据主要不良心血管事件(MACE)随访结果将患者分为非MACE组108例和MACE组42例,比较上述临床指标的差异。采用多元Logistic回归分析评估上述指标与预后的相关性。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆miRNA-21水平对AMI患者预后的诊断性能。结果中度组的血浆miRNA-21、Gensini评分及SYNTAX评分均低于重度组但高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。3组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、餐后2 h血糖(2 hPBG)、空腹血糖(FBG)、同型半胱氨酸(Hcy)水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);3组间凝血酶原时间(PT)、国际标准化比率(INR)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血浆miRNA-21水平与Gensini评分、SYNTAX评分呈正相关(r=0.823、0.784,P=0.029、0.033)。随访1年,MACE组的血浆miRNA-21水平高于非MACE组,差异有统计学意义(P<0.001)。血浆miRNA-21水平、Gensini评分与SYNTAX评分是AMI患者随访1年预后的影响因素(OR=3.656、2.887、2.913,P=0.013、0.036、0.029)。血浆miRNA-21截断值3.25预测AMI患者随访1年MACE发生的曲线下面积为0.824,灵敏度为83.9%,特异度为87.6%(P=0.023)。结论血浆miRNA-21能有效评估AMI患者心肌缺血严重程度,对近期预后有较好的预测价值。

血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370在急性髓系白血病患者中的水平及意义

目的分析微小核糖核酸-21(miR-21)、微小核糖核酸-148b(miR-148b)、微小核糖核酸-203(miR-203)、微小核糖核酸-370(miR-370)在急性髓系白血病患者中的水平及意义。方法选择2020年5月至2022年11月该院收治的急性髓系白血病患者202例作为急性髓系白血病组,选择同期体检健康者242例作为健康对照组。检测并比较两组血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370水平,比较治疗后不同疗效(完全缓解和非完全缓解)及不同临床特征急性髓系白血病患者血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370单独及联合检测对急性髓系白血病的诊断价值。结果急性髓系白血病组血清miR-21水平高于健康对照组(P<0.05),血清miR-148b、miR-203、miR-370水平低于健康对照组(P<0.05)。治疗后,202例急性髓系白血病患者非完全缓解117例,完全缓解85例;非完全缓解急性髓系白血病患者血清miR-21水平高于完全缓解患者(P<0.05),血清miR-148b、miR-203、miR-370水平低于完全缓解患者(P<0.05)。不同性别、年龄、骨髓原始细胞比例的急性髓系白血病患者血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);白细胞计数>10×10^(9)/L的急性髓系白血病患者血清miR-21水平高于白细胞计数≤10×10^(9)/L的患者(P<0.05),血清miR-148b、miR-203、miR-370水平低于白细胞计数≤10×10^(9)/L的患者(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370联合检测诊断急性髓系白血病的曲线下面积(AUC)为0.810(95%CI:0.770~0.845),高于miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370单项检测诊断的AUC[0.797(95%CI:0.757~0.834)、0.803(95%CI:0.763~0.839)、0.775(95%CI:0.733~0.813)、0.735(95%CI:0.691~0.775)],差异均有统计学意义(Z=2.426,P=0.015;Z=2.152,P=0.033;Z=2.780,P=0.010;Z=3.423,P=0.001)。结论急性髓系白血病患者血清miR-21水平升高,miR-148b、miR-203、miR-370水平降低,且不同白细胞计数及治疗后不同疗效患者血清miR-21、miR-148b、miR-203、miR-370水平也有差异,该4项指标联合检测对急性髓系白血病的诊断准确性更高,也许可作为急性髓系白血病患者诊治的新靶点。

miR-21对人口腔癌细胞株HSQ-89增殖、侵袭与迁移的影响实验研究

目的:探讨微小核糖核酸-21(miR-21)介导Smad7调节转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路对人口腔癌细胞株HSQ-89增殖、侵袭与迁移的作用。方法:取人口腔癌细胞株HSQ-89培养传代,分为阴性对照组、下调组、上调组和正常组,前三者分别采用脂质体转染法将携带阴性对照(NC inhibitor)、miR-21抑制剂(miR-21 inhibitor)、miR-21模拟物(miR-21 mimics)载体进行转染,正常组仅添加等量无菌蒸馏水。观察各组细胞增殖、侵袭、迁移能力;实时-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-21、TGF-β_(1)、Smad3、Smad7、细胞周期蛋白D1(CCND1)、MYC、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测各组细胞TGF-β_(1)、Smad3、Smad7、CCND1、MYC、E-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达及p-Smad3水平;双荧光素酶报告基因检测验证miR-21是否靶向Smad7。结果:与正常组和阴性对照组比较,上调组细胞增殖、侵袭、迁移能力上升,下调组细胞增殖活性下降、侵袭细胞数减少、划痕愈合率下降(均P<0.05);与正常组和阴性对照组比较,上调组细胞miR-21表达、TGF-β_(1)、Smad3、CCND1、MYC、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达上升、Smad7和E-cadherin mRNA和表达下降,差异有统计学意义(均P<0.05),下调组细胞miR-21表达、TGF-β_(1)、Smad3、CCND1、MYC、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达下降、Smad7和E-cadherin mRNA和蛋白表达上升(均P<0.05);经双荧光素酶报告基因实验验证miR-21靶向Smad7。结论:miR-21促进口腔癌细胞增殖、侵袭和迁移,可能与调节Smad7、TGF-β/Smad信号通路相关。

LEASO患者血清miR-21、miR-126水平与HMGB1/TLR4信号通路活性和术后复发的关系

目的 探讨股腘型下肢动脉硬化闭塞症(LEASO)患者血清微小核糖核酸(miR)-21、miR-126水平与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路活性和术后复发的关系。方法 选取行介入手术的股腘型LEASO患者120例,根据术后是否复发将股腘型LEASO患者分为复发组和未复发组。RF-qPCR剂检测血清miR-21、miR-126表达和外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达。采用Pearson相关性分析法分析股腘型LEASO患者血清miR-21、miR-126与外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达的相关性。多因素Logistic回归分析股腘型LEASO患者介入术后复发的影响因素。结果 120例股腘型LEASO患者随访2年,术后复发率为34.17%。与未复发组比较,复发组血清miR-21和外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达升高,血清miR-126表达降低(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,股腘型LEASO患者血清miR-21与外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达呈正相关(r分别为0.660、0.649,P均<0.05),miR-126与外周血单个核细胞HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达呈负相关(r分别为-0.632、-0.641,P均<0.05),外周血单个核细胞HMGB1mRNA与TLR4 mRNA表达呈正相关(r=0.742,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,高血压、糖尿病和miR-21、HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA升高为股腘型LEASO患者介入术后复发的独立危险因素,miR-126升高为独立保护因素(P均<0.05)。结论 股腘型LEASO患者血清miR-21高表达和miR-126低表达与HMGB1/TLR4信号通路激活有关,是股腘型LEASO患者术后复发的独立影响因素。

光谱法研究氧氟沙星-铽络合物与脱氧核糖核酸的相互作用

以氧氟沙星 铽 (Tb3+ )作为荧光探针 ,利用荧光光谱、吸收光谱研究了氧氟沙星 铽 (Tb3+ )络合物与脱氧核糖核酸 (DNA)的相互作用。研究表明 :在实验条件下 ,脱氧核糖核酸能显著增强氧氟沙星 Tb3+ 体系的荧光 ,据此建立了脱氧核糖核酸的测定方法 ,线性范围为 5 .0× 1 0 - 6 ～ 1 .0× 1 0 - 4mol L ;检出限为 1 .7× 1 0 - 6mol L,通过人血清中DNA测定的回收率实验 ,结果令人满意。实验还表明 :氧氟沙星 Tb3+ 探针与DNA分子之间主要是沟槽式结合。

外周血微小核糖核酸-21、同型半胱氨酸水平变化与急性心肌梗死患者Gensini积分的关联性及临床意义

目的:探讨外周血微小核糖核酸-21(miR-21)、同型半胱氨酸(Hcy)水平变化与急性心肌梗死(AMI)患者Gensini积分的关联性及临床意义。方法:选取2019年6月—2020年6月我院AMI患者136例,均检测其外周血miR-21、Hcy水平,并评估Gensini积分。比较两组一般资料[年龄、性别、合并症、体质量指数(BMI)、Killip分级、心率(HR)、收缩压(SBP)、病变支数、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)],术前与术后3d外周血miR-21、Hcy水平及Gensini积分,分析术前外周血miR-21、Hcy水平与Gensini积分的关联性及预后不良的影响因素。结果:两组年龄、性别、合并症、BMI、HR、SBP比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同预后AMI患者Killip分级、病变支数、cTnI、CK-MB、miR-21相对表达量、Hcy、Gensini积分比较,差异有统计学意义(P<0.05);术前外周血miR-21、Hcy水平与Gensini积分呈正相关(P<0.05);Killip分级、病变支数、cTnI、CK-MB、miR-21相对表达量、Hcy均为AMI患者预后不良的重要影响因素(P<0.05)。结论:AMI患者外周血miR-21、Hcy水平异常升高,且与Gensini积分、预后效果密切相关,具有较高临床指导价值。

BNP联合miRNA-21对冠心病心肌缺血的诊断价值

目的:脑钠肽(BNP)联合血浆微小核糖核酸-21(miRNA-21)对冠心病(CHD)心肌缺血的诊断价值。方法:纳入2020年4月至2022年3月于我院进行诊治的141例疑似CHD心肌缺血患者,根据检查结果分为冠状动脉造影(CAG)阳性组(69例)和CAG阴性组(72例)。分析血清BNP、血浆miRNA-21联合对CHD心肌缺血的诊断价值。结果:与CAG阴性组比较,CAG阳性组患者血清BNP、血浆miRNA-21显著升高,P均=0.001。经ROC曲线结果显示,BNP、miRNA-21及三项联合检测诊断CHD心肌缺血的曲线下面积(AUC)分别为0.692、0.726、0.731、0.874。三项联合检测的AUC显著高于各项单独检测(P均=0.001)。结论:BNP、miRNA-21联合能够显著提高对冠心病心肌缺血的诊断价值。

核糖核酸酶Sa表面水和尿素分子的分布和动力学行为的分子动力学模拟

利用分子动力学模拟研究了在不同尿素浓度下,核糖核酸酶Sa(RNase Sa)表面水和尿素分子的分布和动力学行为。结果表明,尿素分子可与RNase Sa酶形成较强的相互作用,并取代其表面的水分子而富集在蛋白质表面。尿素分子更倾向与RNase Sa酶的疏水残基作用,与RNase Sa酶主链形成氢键的能力更强。尿素分子的平动和转动远远慢于水分子的平动和转动。RNase Sa酶表面水分子的平动和转动随着尿素浓度增加而逐渐变慢,但RNase Sa酶表面尿素分子的动力学并不依赖于尿素浓度变化。本研究中明晰的RNase Sa酶表面水和尿素分子分布和动力学有助于理解水和尿素分子对蛋白质稳定性的影响。

腔隙性脑梗死患者血清PECAM-1、GDF11、FGF21与脑动脉血流动力学和颈动脉粥样硬化的关系

目的 分析腔隙性脑梗死患者血清血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)、生长分化因子11(GDF11)、成纤维细胞生长因子21(FGF21)与脑动脉血流动力学和颈动脉粥样硬化的关系。方法 选取2020年1月—2022年1月陕西省人民医院神经内科收治腔隙性脑梗死患者160例为脑梗死组,并根据颈动脉内膜中层厚度(IMT)分为颈动脉粥样硬化亚组、颈动脉正常亚组,另选取同期健康体检者100例为健康对照组,比较2组血清PECAM-1、GDF11、FGF21水平和脑动脉血流动力学参数,采用Pearson线性相关性分析腔隙性脑梗死患者血清PECAM-1、GDF11、FGF21与脑动脉血流动力学参数的相关性。采用Logistic多因素回归分析腔隙性脑梗死患者发生颈动脉粥样硬化的影响因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清PECAM-1、GDF11、FGF21水平对颈动脉粥样硬化的诊断价值。结果 脑梗死组血清PECAM-1、FGF21高于健康对照组,血清GDF11低于健康对照组(t=8.386、17.511、6.795,P<0.001)。脑梗死组大脑中动脉、基底动脉搏动指数均高于健康对照组(t=16.928、7.686,P<0.001)。腔隙性脑梗死患者血清PECAM-1、FGF21水平与大脑中动脉、基底动脉搏动指数呈正相关(PECAM-1:r=0.537、0.462,P<0.001;FGF21:r=0.569、0.503,P<0.001),血清GDF11与大脑中动脉、基底动脉搏动指数呈负相关(r=-0.512、-0.498,P<0.001)。Logistic多因素回归分析结果显示,高血压史、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高、PECAM-1高、FGF21高是腔隙性脑梗死患者颈动脉粥样硬化发生的危险因素[OR(95%CI)=3.654(1.601~8.343)、2.481(1.508~4.085)、1.073(1.032~1.114)、1.024(1.011~1.038),P<0.01],血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)高、GDF11高是其保护因素[OR(95%CI)=0.781(0.613~0.995)、0.992(0.987~0.997),P<0.05];ROC曲线显示,血清PECAM-1、GDF11、FGF21及三者联合评估颈动脉粥样硬化发生风险的曲线下面积(AUC)分别为0.798、0.716、0.813、0.909,三者联合评估效能高于单项指标预测(Z/P=2.097/0.036,2.290/0.022,2.005/0.045)。结论 腔隙性脑梗死患者血清PECAM-1、GDF11、FGF21水平与脑动脉血流动力学参数有关,对颈动脉粥样硬化的评估具有重要意义。

微小核糖核酸-21和微小核糖核酸-431对肺结核病情发展及预后评估价值研究

目的分析支气管镜检标本微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-21、miRNA-431对肺结核病情发展及预后评估价值。方法纳入陕西省结核病防治院2022年5月—2023年7月临床收治43例确诊肺结核患者为研究组,纳入同期43例肺炎患者为对照组,研究组中根据肺部病灶肺野数量分级轻度14例、中度19例、重度10例,根据预后情况分为预后不良和预后良好,比较研究组与对照组、研究组内不同病情严重程度以及研究组内不同预后患者miRNA-21、miRNA-431水平,采用logistic多因素分析影响肺结核疾病发展及预后的因素,建立影响肺结核病情发展及预后的预测模型,通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析模型预测价值。结果研究组miRNA-21、miRNA-431水平均显著高于对照组,组间差异统计学意义成立(P<0.05);研究组内,病情严重程度与患者miRNA-21、miRNA-431水平成正比,且重度肺结核患者miRNA-21、miRNA-431水平显著高于轻度、中度肺结核患者,组间差异有统计学意义(P<0.05);研究组内,预后不良肺结核患者miRNA-21、miRNA-431水平均显著高于预后良好肺结核患者,组间差异有统计学意义(P<0.05);以miRNA-21、miRNA-431表达为自变量,连续变量;将肺结核病情发展及预后作为因变量进行logistic回归分析。结果显示,miRNA-21、miRNA-431高表达均为肺结核病情发展及预后的影响因素(P<0.05);绘制ROC曲线结果显示,预测模型最佳临界值为0.0895,miRNA-21、miRNA-431和两项联合的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.614(0.651~0.732)、0.671(0.686~0.811)、0.891(0.787~0.993)。结论肺结核患者miRNA-21、miRNA-431水平高表达,与病情发展密切相关,在一定程度上可预测肺结核患者预后,联合诊断综合应用价值高,建议临床推广使用。