微小核糖核酸在针灸干预疾病机制研究中的应用进展

微小核糖核酸(miRNA)通过调控mRNA来调节基因的表达,是多种生理过程不可或缺的参与者。大量研究显示,miRNA对基因的表达与调控在疾病发生发展和治疗中扮演了重要的角色,且若干miRNA被验证与针灸效应机制密切相关。针灸可能通过调控miRNA影响多条传导通路,干预炎性反应、细胞增殖、分化与凋亡以及5-羟色胺系统,从而达到治疗疾病的目的。本研究着重分析了近10年文献,并整理出通过miRNA探究针灸作用机制的研究,整合miRNA在针灸机理探究中的应用策略,为日后相关研究提供思路。

高效液相色谱-电化学检测法测定脱氧核糖核酸分子氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷

采用螯合剂 Fe2 + H2 O2 作为Fenton型反应的氧化源 ,与小牛胸腺脱氧核糖核酸反应生成 8 羟基脱氧鸟苷 ( 8 OhdG) ,建立脱氧核糖核酸 (DNA)分子氧化损伤的体外反应模型 ,用高效液相色谱 电化学检测方法对 8 OhdG进行定量。建立的方法灵敏度高 ,最低检出限 30fmol,线性范围宽 ,从 0 .32pmol到3.2nmol,相关系数达 0 .9996,方法能够适用于生物体与细胞脱氧核糖核酸分子低水平氧化损伤的检测。

脱氧核糖核酸分子在高分子溶液3个不同浓度区间的电泳迁移行为

借鉴高分子亚浓溶液线团收缩理论 ,研究了脱氧核糖核酸 (DNA)片段在高分子溶液全浓度区间的电泳迁移行为。结果表明 ,在高分子稀溶液、亚浓溶液和浓溶液 3个不同浓度区间 ,DNA的电泳迁移行为各不同 ,DNA片段的分离在这 3个浓度区间也存在差异。

测定药物小分子与脱氧核糖核酸相互作用方法的研究进展

目的介绍测定药物小分子与脱氧核糖核酸相互作用方法的近年进展,为抗肿瘤药物的体外筛选以及新药设计提供参考。方法对9种分析技术在研究药物小分子与DNA相互作用机制的方面的基本原理、研究热点及其应用作了评述。结果小分子与DNA相互作用的模式较为复杂,归纳起来大致可分为非共价结合、共价结合和剪切作用3类。其中,非共价作用有3种方式:静电作用、嵌入作用和沟槽作用结论对于DNA靶向分子/DNA复杂体系的研究,必须综合运用各种方法和手段进行全方位的研究才能得到比较可靠的结论。

孔雀石绿在核酸表面分子的长距组装及其共振光散射法测定脱氧核糖核酸

研究了在表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)的存在下孔雀石绿与DNA作用的共振光散射光谱。加入DNA后,在pH9.5～10.0范围内,400nm和482nm处出现增强的共振散射峰。考察了影响因素和最佳反应条件的选择,据此拟定了一种DNA的纳克级测定方法。此方法灵敏度高,干扰小,检测限低,实验结果令人满意。

脱氧核糖核酸分子标记在药材中的应用

目的了解脱氧核糖核酸(DNA)分子标记在中药材中的应用进展,对其在藻类、菌类、种子植物和动物类药材中的鉴定、遗传多样性研究、物种进化和亲缘关系的确定等方面进行综述,为中药材的研究提供新的方法和指导。方法对近几年来国内外该领域相关文献资料检索、分析、整理和总结。结果 DNA分子标记在该领域中有广泛的应用,给中药材的生产开发注入了新的活力,具有广阔的应用前景。结论 DNA分子标记作为中药材研究还有待发展和完善。

小麦及其近缘物种中小分子量核糖核酸酶的初步分析

应用ＲＮａｓｅ功能胶体系，在小麦及其相关物种中发现１组小分子量核糖核酸酶（ＲＮａｓｅ）。ＲＮａｓｅ的分子量变化范围在６５～１４ｋＤａ间，低于已报道的大多数植物ＲＮａｓｅ的分子量。小分子量ＲＮａｓｅ在幼苗中大量表达，并且在降解ＲＮＡ底物时，随着缓冲液ｐＨ值及离子浓度的不同而有所变化。在休眠及发芽小麦种子中发现几种可能不同的小分子量ＲＮａｓｅ。在发芽过程中，其中２种ＲＮａｓｅ的活性变化不明显，而另外２种ＲＮａｓｅ却分别表现出一种逐渐减弱和增强的趋势。

一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶相对分子质量的测定

目的测定从蚯蚓组织中提取纯化的一种新型脱氧核糖核酸酶的相对分子质量。方法采用凝胶过滤层析法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法和基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法三种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD1)的相对分子质量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其相对分子质量分别为126440、136320和157190。结论EWD1由两个亚基组成,其相对分子质量最终确定为157190。

小分子核糖核酸在恶性胸膜间皮瘤的研究进展

恶性胸膜间皮瘤(MPM)是一种来源于浆膜间皮细胞的高度恶性肿瘤,具有早期不易诊断、病死率极高、生存预后极差等特点。近年随着现代医学生物技术的发展,一些生物标记物被发现对MPM高危人群的筛查、早期诊断、疗效评价、预后评估均有不同的价值,其中小分子核糖核酸(MiRNAs)是目前研究最为热门的标记物之一。因此本文就MiRNAs在MPM的应用进行综述。

小分子核糖核酸与肿瘤转移

小分子核糖核酸(miRNA)是一类新发现的非编码小RNA分子,通过碱基配对与靶基因mRNA的3'非翻译区(3'UTR)结合从而在转录后水平引起靶基因mRNA的剪切或翻译的抑制。miRNA与个体发育、干细胞分化和疾病密切相关,尤其是在肿瘤的发生和发展过程中,miRNA扮演着不可替代的角色。最近的研究显示一些特异的miR-NA会影响肿瘤细胞的浸润和转移,这就为肿瘤的治疗提供了一种可能的新方法。在本综述中,作者总结了与肿瘤转移相关的miRNA及其可能的调节机制。

蚯蚓新型脱氧核糖核酸酶的相对分子质量测定

目的测定蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶(EWD3)的相对分子质量。方法采用凝胶过滤层析法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳法(SDS-PAGE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)3种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD3)的相对分子质量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其相对分子质量分别为55080、58270和63460。结论凝胶过滤层析法和SDS-PAGE法可以常规粗略测定蛋白的相对分子质量,质谱法可以比较准确测定蛋白的相对分子质量,EWD3为单亚基蛋白,其相对分子质量约在55000￣65000之间。

核糖核酸酶A超家族:不仅仅是一组降解RNA的酶

核糖核酸酶A超家族(ribonuclease A superfamily;RNase A superfamily),也称脊椎动物分泌型核糖核酸酶超家族(vertebrate secreted ribonucleases superfamily),是二十世纪蛋白质结构、酶学和分子进化领域研究最多最广泛的核糖核酸酶家族。自上世纪初期从牛胰腺中分离鉴定第一个成员以来,已从哺乳动物、两栖动物、爬行动物、鸟和鱼等几百种动物中鉴定了几千个成员。早期对该家族成员的研究不仅促进了蛋白质化学技术的发展,而且为现代生物学研究奠定了基础。目前已知人的核糖核酸酶A超家族成员包括8个典型成员(RNase 1~RNase 8)和5个非典型成员(RNase 9~RNase 13)。功能方面,曾一度以为该家族成员只具有降解核糖核酸的能力。随着血管生成素(angiogenin;RNase 5)、嗜酸性粒细胞衍生神经毒素(eosinophils-derived neurotoxin, EDN;RNase 2)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophils cationic protein, ECP;RNase 3)的发现,人们意识到该家族成员除了消化核糖核酸外,还有依赖酶活性和不依赖酶活性的其他功能,包括宿主防御、免疫调节、血管生成和肿瘤抑制等,但仍了解不够全面。本文回顾了核糖核酸酶A超家族的研究历程,探讨了未来研究方向,特别呼吁要系统研究其除降解核糖核酸外的其他生理病理功能,希望能为该领域的研究提供思路。

从沃森-克里克发现DNA双螺旋分子结构说起——纪念《核酸的分子结构—脱氧核糖核酸的结构》发表60周年

60周年前的1953年，美国生物学家沃森（JD．W8tSOn．1928-）和英国物理学家克里克（FCrick，1916-）共同提出DNA双螺旋分子结构模型．并从分子层面阐明了DNA如何携带遗传信息及复制的机制，由此揭示了生命遗传的奥秘，奠定了分子生物学的基础。

微小分子核糖核酸与心脏重塑

微小分子核糖核酸是近年来发现的一类内源性非编码小核糖核酸,依据碱基互补配对的原则与目的基因3’-端的非编码区特异结合,于转录后调节靶基因表达,参与细胞增殖、凋亡、分化等一系列生物学过程。现有研究表明微小分子核糖核酸可通过介导心肌细胞肥大、细胞凋亡、细胞外基质合成等环节调控心脏结构重构,通过影响离子通道基因表达参与心脏的电生理重构。拟微小分子核糖核酸和抗微小分子核糖核酸等技术的应用为心血管系统疾病的治疗提供了新的潜在手段。

抗CⅡTA的核糖核酸酶P对Jurkat细胞MHCⅡ类分子表达的抑制作用

本研究旨在探讨抗MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制细胞表面MHCⅡ类分子的表达。M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位,设计并克隆针对CⅡTA第3408位点的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相应的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分别插入pUC19、pGEM-7zf(+)载体,进行细胞外切割活性筛选。将细胞外切割作用明显的M1-3408-GS亚克隆入psNAV载体并稳定转染Jurkat细胞株,采用流式细胞术检测该细胞表面经典的MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR检测其CⅡTA的mRNA水平。结果表明:在重组人干扰素(IFN)-γ诱导下,M1-3408-GS阳性Jurkat细胞株与对照组比较,其表面HLA-DR、HLA-DP、HLA-DQ抗原诱导型表达分别降低了83.17%、94.12%及84.31%;同时CⅡTA的mRNA含量明显降低(P<0.05,t=4.89)。结论:抗CⅡTA的M1-RNA(M1-3408-GS)降低了自身mRNA含量,从而阻止其调控的MHCⅡ类分子的表达。

小分子核糖核酸在前列腺癌中的表达及作为诊疗和预后标志物的研究

目前,前列腺癌(PCa)的诊断都是把血清前列腺特异性抗原(PSA)和数字直肠检查(DRE)两项指标做为诊断依据。然而这种方法存在较低的阳性率和较高的误诊率等缺陷,近年来,新的诊断标志物已经应用于临床诊断中,如前列腺癌抗原3(PCa-3)和融合基因TMPRSS2-ETS等还处在试验阶段,所以发现可用于诊断和预后新的标志物仍然是必要的。最近的研究表明,小分子核糖核酸(miRNA)的表达有反向调控基因表达的作用,与PCa在内的多个肿瘤的生物学行为相关联,而且miRNA在不同肿瘤中表达存在差异,因而miRNA可以作为肿瘤潜在的诊断、预后及治疗的工具。该文通过回顾各种与PCa相关的miRNA的表达和研究进展,以阐明其在PCa诊断及治疗中的作用。

三种方法测定蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD_2)的分子量

目的用不同方法测定蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶分子量。方法采用凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF)三种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD2)的分子量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其分子量分别为62.16kD、62.08kD和69.075kD。结论EWD2为单亚基脱氧核糖核酸酶,其分子量在60-70kD。

小分子核糖核酸及相关技术在听觉疾病研究中的应用

小分子核糖核酸(ribonucleic acids,RNAs),长度约19～28个核苷酸,功能非常广泛。核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术在耳部疾病的基础研究和遗传性耳病的治疗中显示出良好的应用前景。本文总结了小分子RNAs的分类、作用机制及RNAi技术在听觉疾病中的应用进展。

慢病毒载体介导survivin小分子干扰核糖核酸对裸鼠肺癌移植瘤的影响

目的观察慢病毒载体介导的survivin小分子干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)能否在裸鼠体内抑制肺癌移植瘤的生长。方法裸鼠随机分为3组,分别将A549细胞、无关序列及survivin siRNA慢病毒载体感染A549细胞接种于裸鼠右侧背部近腋窝皮下,观察survivin siRNA对移植瘤生长的影响。采用逆转录酶聚合酶链反应和Western blotting测定移植瘤组织survivin基因及其蛋白表达。结果成功建立人肺癌裸鼠皮下移植瘤模型。survivin siRNA组移植瘤体积及质量明显低于其他2组(P<0.01),抑瘤率为63.6%(基于体积)或58.8%(基于质量),survivin mRNA和蛋白表达分别减少53.7%、57.6%。结论慢病毒载体介导survivin siRNA可明显下调裸鼠体内survivin基因表达,抑制肺癌移植瘤的生长。

天然脱氧核糖核酸分子中碱基价键的振动变化

天然脱氧核糖核酸分子中碱基价键的振动变化余多慰，柯惟中（南京师范大学南京２１００９７）ＲａｍａｎＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＡｎａｌｙｓｅｓｏｆＴｈｅＴｗｏＣｏｖａｌｎｅｃｅＢｏｎｄｓｂｙＴｈｅＢａｓｅＳｌｄｅｏｆＧｌｙｃｏｓｉｄｌｃＢｏｎｄｉｎＤＮ...