一条新的可诱导PC12细胞转化为交感神经原表型的小分子肽链

目的根据神经生长因子 (NGF)的氨基酸序列及其晶体构象资料 ,对 β NGF进行限制性酶解 ,从而获得关键的功能区域片段。方法选择溴化氰在 9位Met处 ,Trypsin在Arg或Lys处裂解 β NGF ,用SephadexG 5 0色谱、DE5 2离子交换色谱和反相高效液相色谱进行分离纯化。所得片段用PC12细胞测定活性 ,对活性片段进行氨基酸组成及序列分析。结果从 β NGF裂解片段中获得一可诱导PC12细胞分化的活性片段 ,氨基酸组成及序列分析表明 ,此片段由 16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与 14肽HWNSYCTTTHTFVK通过一对二硫键连接而成 ,与 β NGF肽链的10～ 2 5和 75～ 88氨基酸残基序列相对应。生物活性分析表明其最佳作用浓度为 0 .0 0 1～ 0 .1ng/ml。结论此实验获得了 β NGF关键的功能区域片段 ,虽然其空间结构和功能的关系尚需研究探讨 。