半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、微小RNA-431和可溶性血管细胞黏附分子-1在突发性耳聋患者血清中的水平变化及其与耳蜗功能相关性研究

目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、微小RNA-431(miR-431)、可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)在突发性耳聋患者血清中的水平变化及其与耳蜗功能的相关性。方法:选取收治的突发性耳聋患者100例为疾病组,另选同期体检健康者50例为对照组。根据是否存在耳蜗性听力下降或损失分别判定疾病组患者为耳蜗功能异常(35例)或耳蜗功能正常(65例)。比较两组以及疾病组不同耳蜗功能患者血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平。采用Spearman法分析血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平与患者耳蜗功能的相关性。采用Logistic回归分析突发性耳聋患者耳蜗功能异常的影响因素。结果:疾病组血清Caspase-3、miR-431及sVCAM-1水平高于对照组(均P<0.05)。耳蜗功能异常患者血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平高于耳蜗功能正常患者(均P<0.05)。血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平与患者耳蜗功能呈负相关(均P<0.05)。耳蜗功能异常患者有上呼吸道感染史、有心血管合并症、重度和极重度听力损失的占比高于耳蜗功能正常患者(均P<0.05)。血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1是突发性耳聋患者耳蜗功能异常的独立影响因素(均P<0.05)。结论:突发性耳聋患者血清Caspase-3、miR-431及sVCAM-1水平升高,与耳蜗功能有关,是突发性耳聋患者耳蜗功能异常的影响因素。

宫颈鳞状细胞癌化疗前后小分子RNA-96的表达变化及其与化疗敏感性的关系

目的探讨新辅助化疗对宫颈鳞状细胞癌小分子RNA-96（miR-96）表达的影响及其与化疗疗效、敏感性及临床病理特征之间的关系。方法采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测28例（Ⅰb2期-Ⅱa期）宫颈鳞状细胞癌患者新辅助化疗前、后癌组织中miR-96的表达，分析miR-96表达变化与新辅助化疗的疗效、敏感性及其与临床病理特征的关系。结果RT—PCR检测miR-96表达的敏感性和特异性良好；新辅助化疗前宫颈癌组织中miR-96的相对表达量是化疗后宫颈癌组织中的（5．330±5．069）倍，差异具有统计学有意义（P=0．000）。化疗前后miR-96的表达变化：中、低分化者（2．345±1．153）低于高分化者（9．941±5．359）（P=0．000）；间质浸润深度〈1／2间质者（8．236±5．399）高于≥1／2间质者（1．978±1．030）（P=0．000）；有淋巴结转移者（1．848±0．959）明显低于无淋巴结转移者（7．942±5．348）（P=0．000）；而年龄≤45岁、〉45岁，临床分期为Ⅰb2期、Ⅱa期者化疗前后miR-96的表达变化差异无统计学意义（P〉0．05）。结论新辅助化疗能有效降低宫颈鳞状细胞癌组织中miR-96的表达水平，因此测定化疗前宫颈癌组织中miR-96的表达水平对新辅助化疗疗效及敏感性预测具有一定参考价值。

微小RNA-145表达对胃癌不同分子分型患者的新辅助化疗效果评价及临床意义

目的 分析胃癌新辅助化疗患者组织中微小RNA-145(miR-145)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达情况与其化疗效果的关系,对其评估胃癌新辅助化疗效果的意义进行探讨。方法 选择2019年1月至2020年10月接受新辅助化疗的胃癌患者80例,化疗前取患者肿瘤组织,以荧光实时定量PCR技术(qPCR)检测miR-145的表达水平,免疫组织化学法(IHC)检测E-cadherin在胃癌组织中的表达。评价患者的新辅助化疗效果,记录化疗相关不良反应。结果 80例患者共完成237个化疗周期,治疗有效率86.25%(69/80)。胃癌组织中miR-145、E-cadherin的表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。肿瘤组织miR-145、E-cadherin表达与新辅助治疗效果及不良反应发生有关(P<0.05)。肿瘤组织miR-145、E-cadherin表达呈正相关(r=0.8264,P<0.001)。结论 在新辅助化疗前检测胃癌组织中miR-145及E-cadherin表达对预测新辅助化疗效果有较好的临床意义。

血清长链非编码RNA-尿路上皮癌相关分子1对甲状腺乳头状癌的鉴别诊断价值

目的检测甲状腺良性结节和甲状腺乳头状癌病人血清长链非编码RNA-尿路上皮癌相关分子1(LncRNAUCA1)水平,并探讨其对甲状腺乳头状癌的鉴别诊断价值。方法选取2018年1月至2020年1月河南科技大学第一附属医院住院治疗的甲状腺乳头状癌病人48例(甲状腺乳头状癌组)和甲状腺良性结节病人32例(良性结节组)为研究对象(均为术后病理确诊);同期选取甲状腺功能正常的49例健康体检人群为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中Ln⁃cRNAUCA1水平;分析血清LncRNAUCA1表达水平与甲状腺乳头状癌病人临床病理特征的关系;采用受试者工作特性曲线(ROC曲线)分析血清中LncRNAUCA1水平对甲状腺结节良恶性的鉴别诊断价值。结果甲状腺乳头状癌组LncRNAUCA1水平(2.13±0.49)高于健康对照组(1.00±0.24)和良性结节组(1.48±0.30),良性结节组LncRNAUCA1水平高于健康对照组,均差异有统计学意义(P<0.05);LncRNAUCA1高表达组多发病灶、肿瘤大小>10 mm、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期的病人比例高于LncRNAUCA1低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);血清LncRNAUCA1水平诊断甲状腺良性结节的曲线下面积(AUC)为0.899,截断值为1.194,特异度为81.6%,灵敏度为81.3%;血清LncRNAUCA1水平诊断甲状腺癌的AUC为0.891,截断值为1.837,特异性为96.9%,敏感度为77.1%。结论血清LncRNAUCA1水平可能对甲状腺乳头状癌有一定的鉴别诊断价值,同时能估计甲状腺乳头状癌病情的发展状况,可为甲状腺乳头状癌的早期干预提供一定的参考依据。

微小RNA-125b及其靶基因信号素分子4C在乳腺癌中的表达及意义

目的：探讨微小RNA（microRNA,miR）-125b及其靶基因信号素分子（SEMA）4C在乳腺癌组织（BRCR）及其癌旁正常组织（NCT）中的表达情况,并分析其与临床病理学特征的关联性及意义.方法：采用荧光定量PCR检测24 例BRCR及其NCT中miR-125b的表达,采用免疫组织化学方法检测40例BRCR及其NCT中SEMA4C的表达.统计分析两者表达水平与患者的年龄、组织学分级、临床分期、淋巴结转移,雌、孕激素受体和人表皮生长因子受体-2（cerbB-2）等临床病理学特征间的关联性.结果：SEMA4C表达在BRCR中高于NCT,SEMA4C表达在淋巴结转移和cerbB-2表达间差异均有统计学意义（P〈0.01和P〈0.05）,而在患者年龄,组织学分级,肿瘤临床分期及雌、孕激素受体表达间差异均无统计学意义（P〉0.05）.miR-125b表达在BRCR中低于NCT（P〈0.05）,其表达在SEMA4C、淋巴结转移以及cerbB-2差异均有统计学意义（P=0.034 -P=0.022）.结论：在乳腺浸润性导管癌中SEMA4C表达升高,miR-125b表达降低,两者均与cerbB-2过表达以及淋巴结转移均有一定关系,提示SEMA4C为miR-125b靶基因之一,miR-125b可能是一个新的乳腺癌标志物.

尖锐湿疣患者皮损组织中微小RNA-34a-5p和程序性死亡分子1配体的表达及其临床意义

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者皮损组织中微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)、程序性死亡分子1配体(PD-L1)的表达水平及其临床意义。方法选取2019年4月至2021年7月南通大学附属南京江北医院诊治的81例CA患者作为CA组,另选取同期81例皮肤健康者作为正常组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定两组组织中miR-34a-5p、PD-L1 mRNA表达水平;分析两者表达水平与CA患者临床病理参数的关系;采用Pearson法分析CA患者皮损组织中miR-34a-5p与PD-L1 mRNA表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估皮损组织中miR-34a-5p、PD-L1表达水平诊断CA的价值。结果CA组患者皮损组织中miR-34a-5p表达水平低于正常组(P<0.05),PD-L1 mRNA表达水平高于正常组(P<0.05)。疣体团块直径≥10mm、病程≥3个月、高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染和混合型HPV感染的CA患者皮损组织中miR-34a-5p表达水平低于疣体团块直径<10mm、病程<3个月、低危型HPV感染的CA患者(P<0.05),PD-L1 mRNA表达水平高于疣体团块直径<10mm、病程<3个月、低危型HPV感染的CA患者(P<0.05);混合型HPV感染的CA患者皮损组织中miR-34a-5p表达水平低于高危型HPV感染的CA患者(P<0.05),PD-L1 mRNA表达水平高于高危型HPV感染的CA患者(P<0.05)。CA患者皮损组织中miR-34a-5p与PD-L1 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.591,P<0.05)。皮损组织中miR-34a-5p、PD-L1表达水平诊断CA的曲线下面积(AUC)分别为0.887、0.894,截断值分别为0.81、1.65,灵敏度均为88.9%,特异度分别为72.8%、79.0%;miR-34a-5p、PD-L1表达水平联合诊断CA的AUC为0.954,其灵敏度、特异度分别为86.4%、91.4%。结论CA患者皮损组织中miR-34a-5p表达水平较低,PD-L1表达水平较高,且miR-34a-5p与PD-L1表达水平呈负相关,两者的表达水平均与疣体团块直径、病程、HPV感染类型有关,miR-34a-5p、PD-L1联合可更好地诊断CA。

重症颅脑损伤患者血清微小RNA-126、血管细胞黏附分子-1与迟发性颅内血肿的关系

目的:探讨重症颅脑损伤(CI)患者血清中微小RNA-126(miR-126)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平及与迟发性颅内血肿(DTIH)的关系。方法:以2015-03-2019-02本院诊治的289例CI患者为研究对象,根据入院后是否发生DTIH分为DTIH组(102例)和非DTIH组(187例),选取同期体检健康者135例为对照组。比较分析各组患者临床资料;以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-126、VCAM-1、VEGF、TNF-α的表达水平;分析重症CI并发DTIH患者血清miR-126、VCAM-1与VEGF、TNF-α水平及miR-126与VCAM-1水平的相关性;分析重症CI并发DTIH的影响因素。结果:与对照组比较,DTIH组和非DTIH组血浆凝血酶原时间、血清VCAM-1、VEGF、TNF-α水平升高,miR-126水平降低,且DTIH组较非DTIH组变化更明显(P<0.01);DTIH组GCS评分高于非DTIH组(P<0.01);重症CI并发DTIH患者血清miR-126表达水平与VEGF、TNF-α、VCAM-1均呈负相关(P均<0.01),VCAM-1与VEGF、TNF-α均呈正相关(P<0.01);血浆凝血酶原时间、VCAM-1、VEGF、TNF-α为重症CI并发DTIH的独立危险因素(P<0.01),miR-126为重症CI并发DTIH的独立保护因素(P<0.01)。结论:miR-126、VCAM-1均可能参与并影响重症CI并发DTIH的发病过程。

微小RNA-182-5p和信号转导分子7在翼状胬肉中的表达及临床意义

目的检测微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和信号转导分子7(SMAD7)在翼状胬肉中的表达情况,探讨二者与患者临床病理特征及预后的相关性。方法选择2018年6月—2021年6月在本院眼科进行手术切除的原发性翼状胬肉组织标本150例进行研究,另选择同期因白内障手术获取的正常球结膜标本60例作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测标本miR-182-5p、SMAD7 mRNA表达水平;采用免疫组织化学染色检测SMAD7蛋白表达水平;采用Pearson法分析翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达水平的相关性;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5p和SMAD7的靶向关系。结果翼状胬肉组织中,miR-182-5p表达水平为(2.26±0.45),高于正常结膜组织的(1.05±0.12);SMAD7 mRNA表达水平为(0.67±0.12),低于正常结膜组织的(1.03±0.15);SMAD7蛋白阳性表达率为23.33%,低于正常结膜组织的71.67%;上述组间差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,翼状胬肉组织中miR-182-5p与SMAD7 mRNA表达呈负相关(r=-0.536,P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-182-5p与SMAD7存在靶向关系;miR-182-5p在进展期表达水平高于静止期,SMAD7在进展期阳性表达低于静止期,差异有统计学意义(P<0.05);与治愈组比较,复发组翼状胬肉组织miR-182-5p表达水平较高,SMAD7 mRNA表达水平及SMAD7阳性表达率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论翼状胬肉组织中,miR-182-5p呈高表达,SMAD7呈低表达,且二者均与患者临床病理特征和预后有关,或可成为翼状胬肉的治疗靶点。

重症肺炎64例外周血微RNA-34a、沉默信息调节因子1的表达

目的研究重症肺炎病人外周血微RNA-34a(miR-34a)、沉默信息调节因子1(Sirt1)的表达变化及临床意义。方法选取2017年10月至2020年4月武警重庆总队医院收治的64例重症肺炎病人为重症肺炎组,同期收治的80例普通肺炎病人为普通肺炎组,进行健康体检的70例健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测外周血miR-34a表达水平,采用酶联免疫吸附法检测血清Sirt1、炎症细胞因子表达水平;Kaplan-Meier生存分析研究miR-34a与Sirt1表达水平与重症肺炎组病人预后的关系;Cox回归分析影响重症肺炎病人预后的因素。结果重症肺炎组miR-34a的表达水平高于普通肺炎组和对照组(1.65±0.28比1.32±0.33、1.00±0.25),Sirt1表达水平低于普通肺炎组和对照组[(6.83±1.59)μg/L比(8.94±1.62)μg/L、(12.11±1.77)μg/L](P<0.05);miR-34a表达水平与Sirt1表达水平存在明显负相关(P<0.05)。高危、中危病人miR-34a表达水平高于低危病人,Sirt1表达水平低于低危病人(P<0.05),高危病人miR-34a表达水平高于中危病人,Sirt1表达水平低于中危病人(P<0.05)。miR-34a高表达病人血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素(IL)-6和高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)水平高于miR-34a低表达病人,30 d累积生存率低于miR-34a低表达病人(P<0.05);Sirt1高表达病人血清TNF-α、ICAM-1、IL-6、HMGB1水平低于Sirt1低表达病人,30 d累积生存率高于Sirt1低表达病人(P<0.05)。ICAM-1、miR-34a及Sirt1均是影响重症肺炎病人预后的独立危险因素(P<0.05)。结论重症肺炎病人外周血中miR-34a表达增加与血清Sirt1表达降低具有相关性,且miR-34a、Sirt1的变化与病情加重、炎症反应激活、预后不良有关。

MicroRNA-29与纤维化疾病

小分子RNA(microRNA,miRNA,miR)是一类由21～23个核苷酸构成的功能性非编码小分子RNA。microRNA-29(miR-29)是新近发现的一类与纤维化疾病密切相关的小分子RNA家族,研究发现miR-29可通过直接抑制多种细胞外基质蛋白表达和调控多种与纤维化相关的信号通路参与纤维化过程,并且循环中miR-29的水平还可反映肝病患者肝硬化的严重程度。

纳米壳聚糖递送分子信标成像肺癌细胞的研究

目的采用纳米技术和分子信标(MB)技术,研究纳米壳聚糖(CS)作为miR-155 MB载体用于肺癌细胞成像的效果。方法设计并合成锁核酸修饰的miR-155 MB,采用自组装方法合成纳米壳聚糖分子信标复合物(CS-MB)并对其抗DNaseⅠ特性、粒径大小、zeta电位等理化性质进行检测。以CS作为载体转染miR-155 MB,激光共聚焦检测miR-155 MB对肺癌细胞中的miR-155的识别能力并进行成像,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)进行进一步验证,以随机序列分子信标(RS MB)作为阴性对照。结果按照7:1的质量比合成的CS-MB,其包封率高,能抵抗DNaseⅠ的降解,粒径小,带正电荷,适合基因转染。CS转染miR-155 MB后可在肺癌细胞中看到较强的红色荧光,RS MB组未检测到荧光信号(P<0.05),且荧光信号强弱趋势与实时荧光定量PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论 CS可作为miR-155 MB载体检测肺癌细胞中miR-155的表达并进行肺癌细胞成像,为肺癌的诊断提供了新思路和新技术。

miRNA-126与颈动脉粥样硬化患者斑块稳定性的关系

目的研究颈动脉粥样硬化患者中外周血小分子RNA-126(miR-126)与斑块稳定性之间的关系。方法选择可能存在颈动脉硬化的患者,根据颈动脉超声检测结果分为正常组、稳定斑块组和不稳定斑块组,常规检测血压、体重指数、肝肾功能、血糖、血脂、尿酸、超敏C反应蛋白(hs CRP),real time PCR检测外周血中miRNA-146a的表达水平。对存在颈动脉粥样硬化的患者予瑞舒伐他汀20 mg每晚一次口服治疗,12个月后复查颈动脉超声、hs CRP及miR-126。结果 3组患者的年龄、体重指数、血压、血糖、血脂、尿酸、肝肾功能均无明显差异(P>0.05),不稳定斑块组患者的hs CRP明显升高(P<0.05)。与正常组相比,稳定斑块组患者血浆中的miR-146a水平上升(P<0.05),不稳定斑块组患者的miR-126水平更加显著(P<0.01)。治疗12个月后,16例不稳定型动脉粥样硬化患者的颈动脉斑块稳定性改善,同时外周血hs CRP及miR-126也明显下降(P<0.05)。结论 miR-126可能与颈动脉粥样硬化发展的发生发展相关。

microRNA-31联合CEA对肺癌早期诊断的临床意义

目的探讨microRNA-31联合癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen CEA)检测对肺癌的临床诊断价值,以期寻找到一种更加有效地肺癌诊断方法。方法选取365例于2016年1月至2018年2月我院就诊患者。其中186例确诊为肺癌患者,设为肺癌组;肺良性病变组患者108例,设为肺良性病变组;另有健康体检者71例,设为健康对照组。分别应用实时荧光定量PCR法及Elisa测定血清中microRNA-31及CEA的含量。结果肺癌组血清中microRNA-31水平、CEA的含量均显著高于良性病变组和健康对照组(P<0.05)。相比microRNA-31及CEA单独检测,microRNA-31联合CEA检测显著提高了肺癌诊断的灵敏度、阴性预测率及阳性预测率,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论microRNA-31联合CEA检测能够有效提高肺癌的诊断效能,具有一定的临床应用价值。

甲状腺相关眼病患者血清sICAM-1、sVCAM-1及微小RNA-146a的表达

目的:探讨甲状腺相关眼病(thyroid associated ophthalmopathy,TAO)患者血清可溶性细胞间黏附分子-1(serum soluble intercellular adhesion molecules-1,sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中微小RNA-146a的表达及其意义。方法:选取2014-06/2015-12在我院诊治的TAO患者37例(TAO组)、甲状腺功能亢进不伴有眼病患者40例(非眼病组)、健康人群30例(健康组),检测各组血清sICAM-1、sVCAM-1及PBMC中微小RNA-146a表达。结果:TAO组的血清s ICAM-1(366.14±67.28μg/L)、s VCAM-1(211.07±27.45μg/L)水平显著高于非眼病组(286.62±51.09μg/L、179.83±25.09μg/L)和健康组(234.51±38.969μg/L、164.51±22.57μg/L),差异有统计学意义(P<0.05),TAO组PBMC中微小RNA-146a(0.071±0.016)低于非眼病组(0.381±0.084)和健康组(1.105±0.216),差异有统计学意义(P<0.05);非眼病组的血清sICAM-1、sVCAM-1水平显著高于健康组(P<0.05),非眼病组PBMC中微小RNA-146a表达低于健康组(P<0.05)。轻度组的血清sICAM-1、sVCAM-1水平显著低于中重度组和极重度组(P<0.05),轻度组PBMC中微小RNA-146 a表达高于中重度组和极重度组(P<0.05);中重度组的血清s ICAM-1、s VCAM-1水平显著低于极重度组(P<0.05),中重度组PBMC中微小RNA-146a表达高于极重度组(P<0.05)。结论:血清sICAM-1、sVCAM-1在TAO患者中高表达,PBMC中微小RNA-146a在TAO患者低表达,并且与患者的病情程度有关。

结直肠癌中微小RNA-762表达的临床意义及作用机制

目的检测微小RNA-762(miR-762)在结直肠癌(CRC)组织和细胞株中的表达情况,并探讨miR-762在CRC中的临床意义及作用机制。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测48例CRC新鲜肿瘤组织及配对癌旁正常黏膜中miR-762的表达情况,同时检测上皮间充质转化(EMT)标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达情况,并记录患者的临床病理资料。分析miR-762与患者临床病理特征的关系; Spearman相关分析探讨miR-762与MMP-9、E-cadherin、Vimentin mRNA的关系。应用miR-762抑制物转染结肠癌细胞株SW620中miR-762的表达;噻唑蓝(MTT)实验检测转染对SW620细胞活性的影响; Transwell小室实验检测转染对SW620细胞侵袭能力的影响;检测MMP-9、E-cadherin、Vimentin基因表达的变化。结果 qRTPCR结果显示,miR-762在CRC组织中表达高于癌旁正常黏膜(P <0. 05);在淋巴结转移阳性、TNM分期较晚的患者肿瘤组织中miR-762表达更高(P <0. 05);在CRC组织中miR-762与MMP-9之间存在正相关,miR-762与E-cadherin存在负相关(P <0. 05)。抑制SW620细胞中miR-762表达后细胞活性下降、侵袭能力减弱,同时MMP-9、Vimentin的mRNA和蛋白表达降低,E-cadherin的mRNA和蛋白表达增高(均P <0. 05)。结论 miR-762在CRC组织中表达增高且可预测患者的肿瘤侵袭转移,miR-762可能调节CRC细胞的EMT而促进肿瘤进展。

微小RNA-155与心血管疾病关系的研究进展

MicroRNAs是一类单链、保守的非编码小RNA,其作用是抑制靶信使的转录和翻译,其中微小RNA-155是其家族中的一员,同时亦是一种重要的多功能调节因子,与心血管系统密切相关,可通过调节各种分子和细胞机制进而影响心血管疾病的发生发展。

微RNA-200家族对程序性死亡配体1的调控及其在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)免疫检查点分子程序性死亡配体1(PD-L1)的表达及其与miRNA-200家族之间的调控关系,阐明PD-L1在NSCLC中的临床意义及调控机制。方法选取138例NSCLC患者癌组织及配对的癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色检测PD-L1表达,qRT-PCR检测miRNA-200家族(miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c、miRNA-429、miRNA-141)的表达水平。培养肺癌A549细胞,通过转染miRNA-200家族5个miRNA模拟物使其过表达,采用蛋白质印迹法检测miRNA-200家族过表达对PD-L1表达的影响,CCK-8实验检测miRNA-200家族过表达对A549细胞增殖活性的影响,荧光素酶报告基因实验验证miRNA-200家族对PD-L1的调控作用。结果138例NSCLC患者癌组织PD-L1总阳性率为58.7%(81/138),高于癌旁组织(3.6%,5/138),差异有统计学意义(P<0.05);PD-L1表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型无关,而与淋巴结转移、脉管侵犯、临床TNM分期有关(P均<0.05)。NSCLC癌组织中miRNA-200家族表达水平均低于癌旁组织(P均<0.01),且PD-L1表达阳性的患者具有更低水平的miRNA-200家族表达水平(P均<0.01)。A549细胞过表达miRNA-200家族能下调PD-L1的表达(P均<0.01),且抑制癌细胞增殖活性(P均<0.01)。荧光素酶报告基因实验证实miRNA-200家族直接负调控PD-L1的表达(P均<0.01)。结论PD-L1高表达预示NSCLC患者预后不良。PD-L1是miRNA-200家族的靶基因,miRNA-200家族表达水平低可能是NSCLC患者高表达PD-L1的重要原因。

miRNA-126在颈动脉粥样硬化患者中的表达及意义

目的研究颈动脉粥样硬化患者中血液中小分子RNA-126(miR-126)与斑块稳定性之间的关系。方法选择可能存在颈动脉硬化的患者,根据颈动脉超声检测结果分为正常组、稳定斑块组和不稳定斑块组,常规检测血压、体重指数(BMI)、肝肾功能、血糖、血脂、尿酸、超敏C反应蛋白(hs-CRP),采用real time PCR检测外周血中的miRNA-126的表达水平。结果三组患者的年龄、BMI、血压、血糖、血脂、尿酸、肝肾功能均无明显差异(P>0.05);不稳定斑块组患者的hs-CRP明显升高(P<0.05);与正常组相比,稳定斑块组患者血液中的miR-126水平上升(P<0.05),不稳定斑块组患者的miR-126水平更加显著(P<0.01)。miR-126与hs-CRP具有相关性。结论 miR-126可能参与了颈动脉粥样硬化发展的病理过程,可能是易损斑块的生物学标志之一。

妊娠期糖尿病孕妇血清中血管细胞黏附分子-1 miR-21-3p miR-155-5p及内脏脂肪素水平的变化及其临床意义

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清中血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、微小RNA(miR)-21-3p、miR-155-5p及内脏脂肪素(Visfatin)水平的变化及其临床意义。方法选取沧州市人民医院妇产科2019年1月至2020年1月收治的58例GDM患者(GDM组),另选取60例健康孕妇(对照组),对比两组孕妇一般资料和实验室指标差异,Pearson相关系数分析血清VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p及Visfatin水平与临床指标的相关性,多因素logistics回归分析GDM发病危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p及Visfatin水平均对GDM的诊断价值。结果GDM组空腹血糖(FPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、糖化血红蛋白(HbA1c)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p、Visfatin水平均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组(P<0.05);Pearson相关分析显示,血清VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p及Visfatin水平与BMI、FPG、HOMA-IR、HbA1c、TG、TC、LDL-C呈正相关,与HDL-C呈负相关(P<0.05);多因素logistics回归分析显示,高FPG、HOMA-IR、VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p、Visfatin水平为GDM发病独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p及Visfatin水平诊断GDM的曲线下面积(AUC)为0.877、0.798、0.800、0.842,敏感度为73.33%、73.93%、78.57%、82.57%,特异度为82.81%、66.65%、68.03%、77.12%。结论GDM孕妇血清VCAM-1、miR-21-3p、miR-155-5p及Visfatin水平明显提升,为GDM发生的独立危险因素,可作为GDM诊断的生物学标志物。

miR-21在胃癌发生发展中信号通路及分子靶点的研究进展

胃癌在我国的发病率和死亡率持续升高,使我国胃癌的诊疗面临严峻考验。胃癌具有早期诊断率低、术后易复发、易发生转移等特点。近年发现,微RNA(miRNA/miR)可作为抑癌或促癌因子调控多种癌症的发生发展,但由于miRNA数量繁多、调控方式复杂,其在癌症调控中的具体机制还未完全阐明。现已发现miR-21与胃癌的发生发展有密切联系,因此研究胃癌中miR-21相关信号通路及药物作用靶点的分子机制将为胃癌的诊治提供新思路,且有助于提高胃癌的早期诊断率并改善胃癌患者预后。