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重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株的构建及意义 被引量:2
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作者 王刚 姜博文 +5 位作者 杨林花 聂欣 贾辰亮 刘静 申泉 柴宝峰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期422-425,共4页
本研究构建重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株并探讨其意义。将人凝血因子Ⅸ(F9)小基因克隆到哺乳动物表达载体pCMV-Tag3B上;利用PCR定点突变技术得到在小基因121位氨基酸位置含有一个提前终止密码子(premature terminati... 本研究构建重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株并探讨其意义。将人凝血因子Ⅸ(F9)小基因克隆到哺乳动物表达载体pCMV-Tag3B上;利用PCR定点突变技术得到在小基因121位氨基酸位置含有一个提前终止密码子(premature termination codon,PTC)的无义突变体;将构建的F9小基因及其无义突变体分别转染人肝癌细胞HepG2,经G418抗性筛选,单克隆化扩大培养,得到稳定细胞株,分别命名为HepG2-WT和HepG2-N。结果显示:通过酶切鉴定、PCR鉴定及DNA测序分析证明,小基因及其无义突变体表达载体构建成功;通过RT-PCR及基因组PCR均扩增到了大小正确的目的基因片段,证明了含有重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体的稳定细胞株构建成功。结论:本研究成功构建了重组人凝血因子Ⅸ小基因及其无义突变体稳定细胞株,该细胞株可用于无义突变导致血友病的治疗药物的筛选和PTC通读药物的筛选等。 展开更多
关键词 血友病B 凝血因子Ⅸ小基因 无义突变 稳定细胞株
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乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗的构建与鉴定 被引量:1
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作者 张建军 史小玲 +1 位作者 阳艾玲 袁志平 《四川医学》 CAS 2007年第1期4-5,共2页
目的采用基因重组技术,将乙肝病毒4段小基因与协同刺激分子CD80基因嵌合,构建成嵌合乙肝小基因DNA疫苗。方法①根据文献选择和设计FIBV的一段pres2、三段core表位编码小基因,以人工合成DNA片段P1-P10,通过退火、连接成为含绚170bp... 目的采用基因重组技术,将乙肝病毒4段小基因与协同刺激分子CD80基因嵌合,构建成嵌合乙肝小基因DNA疫苗。方法①根据文献选择和设计FIBV的一段pres2、三段core表位编码小基因,以人工合成DNA片段P1-P10,通过退火、连接成为含绚170bp的嵌合基因,用HindⅢ酶切;②提取和纯化pcDNA3.CDS0,用HindⅢ酶切和击磷酸化;③将酶切小基因定向插入pcDNA3-CD80载体的HindⅢ位点之间,构建成pcHBV-CD80小基因质粒;④pcHBV-CD80转入E.coli JM109扩增、提取质粒,测序鉴定。结果①各DNA小片段经退火、连接。成功嵌合为一大小约170bp之目的基因;②pcDNA3-CD80提取、酶切均成功;③170bp之目的基因定向克隆到载体上,构建了重组质粒pcHBV-CD80,经测序鉴定均构建正确。结论乙肝病毒小基因与协同刺激分子CDS0嵌合DNA疫苗构建成功。 展开更多
关键词 乙肝 小基因 CD80 DNA疫苗
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逆转录病毒介导的人抗肌萎缩蛋白小基因在mdx鼠骨髓间充质干细胞的表达 被引量:5
3
作者 于美娟 张成 +3 位作者 王淑辉 张雅妮 姚晓黎 卢锡林 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期558-561,i0002,共5页
目的构建含有人抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转移的假肥大型肌营养不良模型小鼠(mdx)骨髓间充质干细胞(MSCs)中目的基因的表达。方法构建含有抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体,利用脂质体介导的基... 目的构建含有人抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转移的假肥大型肌营养不良模型小鼠(mdx)骨髓间充质干细胞(MSCs)中目的基因的表达。方法构建含有抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体,利用脂质体介导的基因转移技术转染包装细胞PA317,制备含有目的基因的重组逆转录病毒并感染mdx鼠的MSCs,利用免疫荧光、RT-PCR法检测目的基因的表达。结果成功构建了抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体。含抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒感染mdx鼠MSCs后48h,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳出现319bp DNA片断;免疫荧光检测显示感染组mdx鼠MSCs中可见红色颗粒,深浅不一。结论采用逆转录病毒介导的方法可以将抗肌萎缩蛋白小基因转移至mdx鼠MSCs并表达。 展开更多
关键词 抗肌萎缩蛋白小基因 骨髓间充质干细胞 基因转染
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SRp38基因在小鼠视网膜细胞中的表达以及对GluR-B小基因可变剪接的调控
4
作者 彭正羽 李淑贞 +1 位作者 张薇 陈献华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期772-777,共6页
SR蛋白在前体mRNA可变剪接调控中发挥重要作用.SRp38作为一种新近发现的具有神经及生殖组织特异性的SR蛋白,能够调控一些在神经组织中起重要作用的基因(如GluR-B,Trk-C,NCAML1等)的前体mRNA可变剪接,同时还可以在有丝分裂M期及热休克时... SR蛋白在前体mRNA可变剪接调控中发挥重要作用.SRp38作为一种新近发现的具有神经及生殖组织特异性的SR蛋白,能够调控一些在神经组织中起重要作用的基因(如GluR-B,Trk-C,NCAML1等)的前体mRNA可变剪接,同时还可以在有丝分裂M期及热休克时抑制前体mRNA剪接的发生.利用Western blot以及免疫组织化学方法研究了SRp38蛋白在小鼠视网膜中的表达以及分布情况,结果显示,SRp38蛋白在视网膜中的表达具有区域特异性,在外网层、内核层、内网层以及节细胞层中均有表达,而在外核层无表达.对分离培养的小鼠视网膜细胞进行免疫双标记分析的结果表明,SRp38蛋白在视杆-双极细胞的胞体、轴突、树突中表达.通过瞬时共转染以及RT-PCR分析,发现在R28细胞中,SRp38过表达可以促进GluR-B小基因Flip亚型的剪接.结果提示SRp38蛋白可能通过调控小鼠视网膜内前体mRNA可变剪接、进而在小鼠视网膜功能中发挥重要作用. 展开更多
关键词 SRp38 前体mRNA可变剪接 视网膜 双极细胞 GluR-B小基因
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小鼠对乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗免疫应答
5
作者 张建军 杨向东 +2 位作者 史小玲 袁志平 王超 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第1期61-63,共3页
目的:探讨含CD80的乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗的免疫应答.方法:以乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗pcHBV-CD80(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段和CD80)、pcHBV(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段),以及质粒pcDNA-CD80、pcDNA3.... 目的:探讨含CD80的乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗的免疫应答.方法:以乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗pcHBV-CD80(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段和CD80)、pcHBV(含CMV启动子、HBV-preS_2片段、HBV-C片段),以及质粒pcDNA-CD80、pcDNA3.1和生理盐水,im免疫小鼠2次(间隔2wk),末次接种后2wk时检测特异性抗体、γ-IFN水平和淋巴细胞转化率.结果:质粒pcHBV-CD80和pcHBV免疫后均可检测到特异性的抗体,抗-preS2在pcHBV-CD80组和pcHBV组分别为15125.52nkat/L和14463.56nkat/L;抗-HBc在pcHBV-CD80组和pcHBV组分别为7607.35nkat/L和7711.21nkat/L,两组间无明显差异;但pcHBV-CD80更能增加γ-IFN的产生(1266.7ng/Lvs986.3ng/L,P<0.01),并增强免疫小鼠的激淋巴细胞转化.结论:含CD80的乙肝病毒小基因嵌合DNA疫苗可诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答. 展开更多
关键词 嵌合DNA疫苗 小基因 CD80分子 乙型肝炎病毒
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NCAM L1小基因模型的建立及其剪接模式研究
6
作者 张薇 沈权 彭正羽 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期427-431,共5页
目的:建立可用于前体mRNA可变剪接分析的NCAM L1小基因模型。方法:以人基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得NCAM L1小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建小基因的质粒。在此基础上,用NCAM L1小基因模型转染HeLa、COS-1、PFSK及R28细... 目的:建立可用于前体mRNA可变剪接分析的NCAM L1小基因模型。方法:以人基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得NCAM L1小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建小基因的质粒。在此基础上,用NCAM L1小基因模型转染HeLa、COS-1、PFSK及R28细胞,并用RT-PCR进行被剪接的小基因产物的半定量检测。结果:NCAM L1小基因在4种细胞中的剪接模式不同,在PFSK以及Hela细胞中,存在2种剪接亚型,而在COS-1以及R28细胞中只有一种剪接亚型存在。结论:所构建的NCAM L1小基因可用于细胞水平的基因剪接分析。 展开更多
关键词 Hela细胞 质粒 遗传载体 剪接体 NCAML1 小基因 前体MRNA 可变剪接
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无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株选择性剪接的研究
7
作者 王刚 孙雯雯 +7 位作者 朱履锴 马艳春 张夏林 张建华 任娟 秦秀玉 杨林花 柴宝峰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期228-232,共5页
目的:探讨无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株发生选择性剪接的分子机制。方法:将人凝血因子IX小基因(Mini-hF9)及其无义突变体分别转染哺乳动物细胞HeLa,经G418抗性筛选、单克隆化得到稳定细胞株;通过RT-PCR及Western blot分别检... 目的:探讨无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株发生选择性剪接的分子机制。方法:将人凝血因子IX小基因(Mini-hF9)及其无义突变体分别转染哺乳动物细胞HeLa,经G418抗性筛选、单克隆化得到稳定细胞株;通过RT-PCR及Western blot分别检测稳定细胞株中Mini-hF9基因mRNA的选择性剪接及蛋白表达情况。结果:成功构建了野生型和无义突变的人凝血因子IX小基因稳定细胞株HeLa-F9-WT、HeLa-F9-M1和HeLa-F9-M2。野生型稳定细胞株HeLa-F9-WT中扩增到正常剪接产物Norm;无义突变稳定细胞株HeLa-F9-M1中扩增到Norm和Alt-S1这两种剪接产物,HeLa-F9-M2中扩增到Norm、Alt-S1和Alt-S2这三种剪接产物。结论:无义突变的凝血因子IX基因可能触发无义相关的选择性剪接(NAS)途径,导致选择性剪接的产生。 展开更多
关键词 血友病 凝血因子Ⅸ小基因 无义突变 稳定细胞株 无义相关的选择性剪接
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小基因的组合装配
8
作者 李思经 《生物技术通报》 CAS CSCD 1997年第2期51-52,共2页
据最新报道,英国近期成立了一个新的委员会,一家高等院校的法学家将负责这一委员会的工作。委员会的目的是就人类遗传学研究出现的社会,经济及伦理学方面的问题为英国政府提出咨询报告。经英国科技部长Ian Taylor提名,英国诺丁汉大学副... 据最新报道,英国近期成立了一个新的委员会,一家高等院校的法学家将负责这一委员会的工作。委员会的目的是就人类遗传学研究出现的社会,经济及伦理学方面的问题为英国政府提出咨询报告。经英国科技部长Ian Taylor提名,英国诺丁汉大学副校长Colin 展开更多
关键词 短肽 连接酶 小基因 组合装配
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小基因,大作用
9
作者 小米 苏薰 吴琼 《小学时代》 2008年第6期12-13,共2页
人类完全掌握了物种的基因会怎么样?可以建造一个生产动物的工厂。这听起来好像应该是上帝干的活。如果有了基因,复活恐龙也不是不可能!
关键词 码象 基因基础 科学家 克隆技术 俄罗斯 遗传密码 复活 西伯利亚 提取 小基因
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抗肌萎缩蛋白小基因对Duchenne肌营养不良病理改变的治疗作用 被引量:3
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作者 黎红华 张苏明 +5 位作者 方思羽 陈春莲 罗运达 官阳 汪道文 Xiao Xiao 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第17期1513-1516,共4页
目的 探讨Duchenne肌营养不良 (DMD)的病理变化和治疗方法。方法 采用重组腺相关病毒载体 (rAAV)介导的人抗肌萎缩蛋白小基因 (SMCKA3999)观察DMD的病理改变和治疗作用。将抗肌萎缩蛋白小基因SMCKA3999克隆至rAAV并包装成rAAVSMCKA399... 目的 探讨Duchenne肌营养不良 (DMD)的病理变化和治疗方法。方法 采用重组腺相关病毒载体 (rAAV)介导的人抗肌萎缩蛋白小基因 (SMCKA3999)观察DMD的病理改变和治疗作用。将抗肌萎缩蛋白小基因SMCKA3999克隆至rAAV并包装成rAAVSMCKA3999病毒 ,将 5× 10 9病毒颗粒分多点注射于DMD模型鼠mdx腓肠肌 ,4个月后取局部肌组织 ,分别采用免疫荧光、埃文斯氏蓝染料、电镜等方法 ,观察rAAVSMCKA3999对DMD病理改变的治疗作用。结果 rAAVSMCKA3999有效稳定表达并使肌膜缺失的抗肌萎缩蛋白恢复 ,明显改善DMD肌肉病理改变。结论 rAAVSMCKA3999能显著改善mdx小鼠骨骼肌病理变化 。 展开更多
关键词 抗肌萎缩蛋白小基因 DUCHENNE肌营养不良 病理 治疗
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急性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链及T细胞受体γ基因重排的临床观察 被引量:1
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作者 宁自觉 赖永榕 +1 位作者 罗军 马劼 《临床内科杂志》 CAS 北大核心 2001年第3期224-225,共2页
关键词 急性淋巴细胞白血病 多聚酶链反应 基因重排 免疫球蛋白重链 T细胞受体小基因
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脆性X综合征致病基因FMR1一个新型隐匿外显子发现及其鉴定
12
作者 郭小艳 富显果 +4 位作者 严爱贞 廖娟 张朵 柯龙凤 兰风华 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第1期6-8,共3页
目的分析脆性X智力障碍1基因(FMR1基因)可变剪接表达类型。方法采用克隆-测序技术,从RNA途径分析人FMR1基因的可变剪接表达。结果构建健康人外周血cDNA53个T克隆,测序结果显示4个T克隆均有140bp大小的插入片段(NG_007529:21452-21591),... 目的分析脆性X智力障碍1基因(FMR1基因)可变剪接表达类型。方法采用克隆-测序技术,从RNA途径分析人FMR1基因的可变剪接表达。结果构建健康人外周血cDNA53个T克隆,测序结果显示4个T克隆均有140bp大小的插入片段(NG_007529:21452-21591),为FMR1内含子9的一部分,生物信息学比对显示该片段上下游具有4个经典的剪接信号,可能为新的隐匿外显子。巢式PCR显示健康人多种组织cDNA中普遍存在该片段。杂种小基因剪接试验显示该片段可通过可变剪接,与上游的外显子9和下游的外显子10同时出现在体外培养真核细胞的成熟mRNA中。结论该研究发现人FMR1基因的新型隐匿外显子,丰富了人FMR1基因可变剪接的内容,也为进一步研究可变剪接与脆性X综合征发病机制之间的关系和脆性X智力障碍1蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 FMR1基因 可变剪接 脆性X综合征 生物信息学 杂种小基因接剪实验
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SbGA20ox1·SbGA20ox3和SbGA2ox3基因对高粱品种赤霉素表达水平的影响 被引量:2
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作者 商靖 陆劲羽 +3 位作者 逄洪波 李雪梅 王艳秋 李玥莹 《安徽农业科学》 CAS 2022年第2期105-108,共4页
[目的]研究SbGA20ox1、SbGA20ox3和SbGA2ox3基因对高粱品种赤霉素表达水平的影响。[方法]以不同高粱品种为试材(9544.7057为父本与不同母本进行杂交得到子代:辽夏梁1号、辽2297、辽2697、辽5397、01-26B;以及01-26A为母本与不同父本进... [目的]研究SbGA20ox1、SbGA20ox3和SbGA2ox3基因对高粱品种赤霉素表达水平的影响。[方法]以不同高粱品种为试材(9544.7057为父本与不同母本进行杂交得到子代:辽夏梁1号、辽2297、辽2697、辽5397、01-26B;以及01-26A为母本与不同父本进行杂交得到子代:辽杂35、0-01、9544.7057、3550、辽2697),利用实时荧光定量PCR技术比较不同时期(拔节期、抽穗期、成熟期),不同品种的高粱之间SbGA20ox1基因、SbGA20ox3基因、SbGA2ox3基因表达含量规律。[结果]SbGA20ox1基因在同一父本不同母本高粱组的基因表达规律基本符合抽穗期>成熟期>拔节期;SbGA2ox3基因在同一父本不同母本高粱组的基因表达规律基本符合抽穗期>成熟期>拔节期,SbGA2ox3基因在同一母本不同父本高粱组的基因表达规律基本符合拔节期>成熟期>抽穗期。而SbGA20ox1基因在同一母本不同父本高粱组的基因表达以及SbGA20ox3基因在各品种高粱的基因表达并未发现明显规律,各时期基因的相对表达量大部分品种间无明显差异。[结论]该研究一定程度上揭示了SbGA20ox1、SbGA20ox3和SbGA2ox3基因在多个高粱品种各时期的基因表达规律,为进一步研究调控赤霉素水平的小基因家族的作用机制提供启示。 展开更多
关键词 高粱 相对表达量 实时荧光定量 赤霉素 小基因家族
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用于前体mRNA剪接机制研究的小基因模型的建立和研究应用
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作者 李静 陈献华 +3 位作者 林万敏 李丽书 韩彧 徐平 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2003年第5期405-413,共9页
建立可用于选择性前体mRNA剪接分析的小基因模型。以人或小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得GluR-B,FGF-2R和ZiS小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建了小基因的质粒。在此基础上,将上述3个小基因模型和剪接因子Tra2β_1或Zis... 建立可用于选择性前体mRNA剪接分析的小基因模型。以人或小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得GluR-B,FGF-2R和ZiS小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建了小基因的质粒。在此基础上,将上述3个小基因模型和剪接因子Tra2β_1或Zis2表达质粒共转染HeLa细胞,并用RT-PCR进行了被剪接的小基因产物的半定量检测。结果表明,这些小基因可用于细胞水平的基因剪接分析,利用该技术平台,发现了Zis2亚型可以促进Zis小基因选择性剪接。 展开更多
关键词 前体mRNA剪接 小基因模型 剪接机制 基因表达调控 选择性剪接 GluR-B FGF-2R ZIS
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小小基因诊断各式疾病
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作者 张荔子 《瞭望》 北大核心 1999年第32期49-50,共2页
关键词 PCR技术 小基因 基因诊断 假阳性 荧光探针技术 定量PCR 生命科学 PCR诊断 疾病诊断 临床检验
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Alectinib treatment for 2 non-small cell lung carcinoma patients carrying different novel ALK fusions
16
作者 LIANG Qingchun LI Namei LI Xiaohong 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1164-1172,共9页
The genomic fusions of the anaplastic lymphoma kinase(ALK)gene have been widely recognized as effective therapeutic targets for non-small cell lung carcinoma(NSCLC).The Second Xiangya Hospital of Central South Univers... The genomic fusions of the anaplastic lymphoma kinase(ALK)gene have been widely recognized as effective therapeutic targets for non-small cell lung carcinoma(NSCLC).The Second Xiangya Hospital of Central South University has treated 2 NSCLC patients with 2 distinct novel ALK gene fusions.Case 1 was a 55-year-old male with a solid nodule located in the right hilar lobe on enhanced CT scan.Case 2 was a 47-year-old female with enhanced CT showing involvement of the left upper lobe of lung.Histopathological examination of tumor tissues confirmed lung adenocarcinoma in both cases.Immunohistochemical(IHC)staining demonstrated positivity for thyroid transcription factor 1(TTF-1)and ALK-D5F3 in tumor cells,while negativity for P40.The next-generation sequencing(NGS)tests identified a PNPT1-ALK(Exon22:Exon20)fusion variant in case 1 and a TCEAL2-ALK(Exon3:Exon19)fusion variant in case 2.The TCEAL2-ALK fusion was further confirmed by amplification refractory mutation system(ARMS)-PCR at the mRNA level.Both patients were treated with oral alectinib at a dosage of 600 mg twice daily.The tumors in both patients were significantly decreased after alectinib treatment,achieving partial response.At the time of submission,there was an absence of disease progression and the progression-free survival(PFS)had surpassed 1 year.It offered compelling evidences that the individuals with NSCLC and harboring either a PNPT1-ALK(Exon22:Exon20)fusion or a TCEAL2-ALK(Exon3:Exon19)fusion,experience favorable therapeutic outcomes through the administration of alectinib.This study expands the known ALK fusion variants database and supports the precision treatment of NSCLC using ALK tyrosine kinase inhibitors(TKIs). 展开更多
关键词 non-small cell lung carcinoma alectinib ALK gene fusion next-generation sequencing
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多发性硬化诊疗的进步 被引量:1
17
作者 胡学强 《中国处方药》 2010年第11期32-,5+72,共1页
多发性硬化是一种常见的免疫相关性中枢神经系统脱髓鞘疾病,其发病机制尚未完全清楚,临床仍无法治愈。由中山大学附属第三医院神经病学科胡学强教授主持的多发性硬化专题,从病因、诊断和治疗等方面详细介绍了多发性硬化的进展,并对轴索... 多发性硬化是一种常见的免疫相关性中枢神经系统脱髓鞘疾病,其发病机制尚未完全清楚,临床仍无法治愈。由中山大学附属第三医院神经病学科胡学强教授主持的多发性硬化专题,从病因、诊断和治疗等方面详细介绍了多发性硬化的进展,并对轴索损伤这一多发性硬化的"长期误区"进行了探讨。 展开更多
关键词 多发性硬化 诊疗 multiple sclerosis hla基因 神经系统脱髓鞘疾病 尚未完全清楚 基因组扫描 免疫相关性 基因易感性 基因疾病 易感基因 亚洲国家 西方国家 环境因素 共同作用 发病机制 小基因 青壮年 加拿大 患病率
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Changes in Levels of Endogenous Plant Hormones During Floret Development in Wheat Genotypes of Different Spike Sizes 被引量:11
18
作者 曹卫星 王兆龙 戴廷波 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第10期1026-1032,共7页
The levels of endogenous plant hormones regulate floret development and degeneration, and thus grain set in flower crops. This study was undertaken to characterize the changes of endogenous hormone levels during flor... The levels of endogenous plant hormones regulate floret development and degeneration, and thus grain set in flower crops. This study was undertaken to characterize the changes of endogenous hormone levels during floret development in three wheat ( Triticum aestivum L.) genotypes: “97J1' with the highest grain set and fertile florets per spike, “H8679' with the lowest grain set and fertile florets per spike, and a medium, “YM158'. The results showed that the peak level of ABA appeared between stamen and pistil differentiation and antherlobe formation of floret development, and the timing delayed with the size of spike (earliest in “H8679” and latest in “97J1”). From antherlobe formation to meiosis, the levels of ABA and GA 1+3 decreased sharply in the ears of “97J1”, while in the ears of “H8679” there was only a slight decrease in ABA, and even an increase in GA 1+3 . The ratio of isopentenyladenosine (iPA)/ABA and IAA/ABA in the ears of “97J1” increased sharply from antherlobe formation to meiosis, but changed only slightly in the ears of “H8679”. At antherlobe formation, IAA and GA 1+3 levels were higher in the ears of “97J1”, but lower in the ears of “H8679” than in the leaves. At meiosis, ABA, GA 1+3 and IAA levels in the “97J1” ears were much lower than in the leaves, but similar in “H8679”. These results indicated that the sharp decreases of ABA and GA 1+3 in ears from antherlobe formation to meiosis and the lowest maintenance at meiosis may be favorable for development of fertile florets and enhancement of grain set in wheat. 展开更多
关键词 WHEAT endogenous hormones floret development genotypic difference large ear
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Isolation and Characterization of Mlo and NBS-LRR-like Gene Sequences in Wheat 被引量:5
19
作者 李爱丽 孔秀英 +2 位作者 周荣华 马峙英 贾继增 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第4期472-478,共7页
Based on both cDNA sequence of barley powdery mildew resistance control element Mlo and DNA sequence of the known putative disease resistance gene from Triticum monococcum L., we designed some primers to amplify resis... Based on both cDNA sequence of barley powdery mildew resistance control element Mlo and DNA sequence of the known putative disease resistance gene from Triticum monococcum L., we designed some primers to amplify resistant homologous sequences in the near isogenic lines (NILs) of powdery mildew resistance using RT-PCR method. Two expressed cDNA fragments were isolated from wheat genome. One showed 83% homology to the Mlo gene of barley. The other contained two possible open reading frames (ORFs). NBS conservative domains 2, 3 of disease resistance gene and 13 LRR structures similar to rice Pib protein terminal were found respectively in the two ORFs. It indicated that the latter fragment belongs to NBS-LRR-like genes. The obvious difference of RT-PCR products was observed between the before challenged and the challenged for 72 h by Blumeria graminis f. sp. tritici, which, implied that this sequence could be associated with disease resistance of wheat. Using nulli-tetrasomic lines of 'Chinese Spring', the NBS-LRR-like gene had been located on chromosome 1D. 展开更多
关键词 MLO NBS-LRR cDNA cloning NIL RGA
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Construction and Characterization of a Bacterial Artificial Chromosome Library for Triticum boeoticum 被引量:5
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作者 陈凡国 张学勇 +1 位作者 夏光敏 贾继增 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第4期451-456,共6页
A bacterial artificial chromosome library has been constructed for Triticum boeoticum Boiss (A bA b) using the bacterial artificial chromosome (BAC) vector pECBAC1. The library consists of about 170 000 clones. A ... A bacterial artificial chromosome library has been constructed for Triticum boeoticum Boiss (A bA b) using the bacterial artificial chromosome (BAC) vector pECBAC1. The library consists of about 170 000 clones. A random sampling analysis of 200 BAC clones indicates that the average insert size is 104 kb. Based on the genome size of T. boeoticum, the library is about three times as large as T. boeoticum haploid genome (5 600 Mb). Screening the BAC library with cpDNA sequence psbA gene and mtDNA sequence atp6 gene as probe shows that contamination of the library with chloroplast and mitochondrial clones is less than 1%. The library will be a useful platform in gene clone and genomic research of wheat. 展开更多
关键词 Triticum boeoticum BAC library GENOME
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