肾移植术后肺部小孢根霉感染1例

报道1例肾移植术后肺部小孢根霉感染。患者,男,45岁,2021年9月20日因“肾移植术后5个月余,发热5 d”为主诉入院。通过微生物(肺泡灌洗液)二代基因测序检查提示小孢根霉,临床诊断为肺部真菌(小孢根霉)感染,使用两性霉素B脂质体+泊沙康唑治疗,肺部感染症状逐渐好转,8周后病情稳定后出院,移植肾功能较前明显下降,截止到随访终点移植肾功能尚未恢复。

嗜热小孢根霉GH134家族甘露聚糖酶基因的克隆表达及在果汁加工中的应用

本研究从浓香大曲中筛选出1株嗜热真菌HBFH10,经鉴定为小孢根霉(Rhizopus microsporus)。利用兼并引物,从菌株HBFH10中获得1个新型甘露聚糖酶基因(RmMan134),该基因全长552 bp,无内含子,编码183个氨基酸和1个终止密码子。Rm Man134酶蛋白分子由1个信号肽序列(1~19 aa)和GH134家族的催化区组成。经异源表达后,重组Rm Man134的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为6.0,具有较强的热稳定性和pH值稳定性。Rm Man134成熟蛋白分子质量约为18.5 kDa,存在糖基化修饰。经动力学性质测定,以魔芋胶为底物时,该酶的V_(max)为57.1μmol/(min·mg),K_(m)为0.66 mg/mL。重组酶Rm Man134对橙汁的澄清效果最为明显,澄清度提高了23.8%,其次苹果汁提高了11%,桃汁提高了7%左右。除此之外,添加重组酶使得葡萄汁的出汁率提高了7%左右。综上所述,甘露聚糖酶Rm Man134在果汁加工中具有较好的应用前景。

水稻根系细菌挥发性有机物对小孢根霉的非接触性抑制作用

[目的]通过分析水稻根系细菌挥发性有机物(volatile organic compounds,VOCs)组成和对小孢根霉(Rhizopus microsporus)的抑制作用,寻找新的具有潜在抑菌功能的挥发性物质.[方法]通过对扣熏蒸法测定不同细菌对小孢根霉的抑菌率;采用顶空固相微萃取法收集细菌挥发性有机物,对其进行气相色谱-质谱(GC-MS)检测,测得细菌挥发性有机物质谱,并在NIST/EPA/NIH数据库中进行比对鉴定,根据抑菌效果及各物质在质谱中的峰面积,进行相关性分析,购买与抑菌率具有显著相关性的物质,体外检测这些纯物质对小孢根霉的抑制作用.[结果]所有菌株均能释放挥发性有机物,并且通过挥发性有机物的非接触性产生不同的抑菌效果,这些菌株共产生14类90种挥发性有机物,分别为酯、烯烃、烷、酮、酸、噻吩、醛、萘、硫化物、酚、醇、吡嗪、吡咯和苯类物质,其中所有菌株都能够释放醇类物质.通过相关性分析,发现有6种物质具有潜在的抑菌活性,分别为2-庚酮、5-甲基-2-己酮、2-壬酮、5-甲基-3-己酮、3-甲基丁酸和甲基异丁基酮,其释放量与抑菌率呈显著正相关,其中3种(2-庚酮、2-壬酮和甲基异丁基酮)是前期研究已经报道过具有抑菌活性的物质,其余3种物质(5-甲基-2-己酮、5-甲基-3-己酮和3-甲基丁酸)暂未被报道具有抑菌活性,通过购买其中2种物质3-甲基丁酸和5-甲基-2-己酮进行体外熏蒸试验验证,发现3-甲基丁酸严重抑制小孢根霉生长,5-甲基-2-己酮对小孢根霉具有致死作用.5-甲基-2-己酮主要由菌株麦克默多生孢八叠球菌、短短芽孢杆菌和阿氏芽孢杆菌释放,5-甲基-3-己酮主要由菌株假单胞菌、阿氏芽孢杆菌和麦克默多生孢八叠球菌释放,3-甲基丁酸主要由菌株神户肠杆菌、假单胞菌和阿氏芽孢杆菌释放.[结论]水稻根系细菌能释放种类丰富的挥发性有机物,部分挥发性有机物对水稻病原菌小孢根霉具有显著抑制作用.经过相关性分析及体外验证确定了2种新型的具有抑菌活性的物质(5-甲基-2-己酮和3-甲基丁酸)以及1种可能具有抑菌活性的物质(5-甲基-3-己酮),这些菌株和挥发性有机物均具有作为新型药物和抗真菌代谢物生物资源的潜力.

菊芋小孢根霉固态发酵纤溶酶的工艺优化

从酒曲中分离得到一株纤溶酶产生菌,经鉴定为菊芋小孢根霉.现对其固态发酵工艺的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、含水量、无机盐、接种量、发酵时间、发酵温度和培养基厚度进行研究.结果表明,该菌株固态发酵工艺为:麸皮与豆粕比例2﹕1,初始pH,5.0,含水量(干基)1,mL/g,MgSO4,10,mmol/kg,(NH4)2,SO4200,mmol/kg,FeSO4,3,mmol/kg,接种量为6×106,g-1,培养基厚度为2,cm,29,℃恒温发酵72,h.最佳发酵条件下酶活力为684.39,U/g,是未优化时产酶量的8.2倍.通过对培养基的优化研究,使产酶量大幅提高,说明菊芋小孢根霉固态发酵纤溶酶具有工业潜力,也为工业化提供数据基础.

年轻Ⅱ型糖尿病患者鼻窦小孢根霉感染

病历摘要 患者男，27岁，1周前无明显诱因出现上腹部持续性钝痛，伴有恶心呕吐，就诊于当地诊所。检测血糖30 mmol／L，尿酮体（＋＋＋），血气分析pH 6.8，考虑糖尿病酮症酸中毒，给予降糖补液治疗，具体不详，腹痛有所好转。5d前患者出现发热，最高达38.4℃，伴鼻塞、头痛。2 d前因胸闷，鼻面部肿胀，左眼视物不见，且再次腹痛加剧伴呼吸急促，于2013年6月6日来河北医科大学第二医院就诊，收入急诊科。

耐酸性α-淀粉酶产生菌筛选及培养基优化

从酒曲中筛选得到1株产耐酸性α-淀粉酶的菌株,经26S rDNA鉴定为小孢根霉(Rhizopus microsporus var)。通过单因素试验和响应面分析法对该菌株的培养基组分进行优化,得到最佳的培养基组成为加水量11.156mL,麸皮与豆饼比4.145∶1,MgCl20.0772%。在此条件下培养,酶活达到259.902 U/g干物质。

一株来源于酒曲的纤溶酶产生菌的鉴定及其酶学性质

从酒曲中分离到一株纤溶酶产生菌,经形态及ITS序列分析鉴定为菊芋小孢根霉(Rhizopus microsporus var.tuberosus).酶学性质研究表明,该纤溶酶的最适作用温度为37,℃,最适作用pH为7.0.在37,℃保温4,h酶活力仍保存95%,57,℃下保温4,h后仍有一定酶活.该酶具有广泛的酸碱适应性,在pH<3.4时仍残留部分活性;最稳定的pH范围是6～8.Zn2+、Cu2+对酶活有抑制作用,Na+、Ca2+、Mn2+对酶活具有明显的促进作用.该酶在人工肠液中具有较好的稳定性,37℃保温4 h后残余酶活仍然保持在80%以上,有望制成注射剂应用于临床.

杜仲EuAFP1.2基因遗传转化烟草提高真菌病害抗性

本研究克隆了杜仲(Eucommia ulmoides)抗真菌蛋白EuAFP1.2基因,其CDS序列长为924 bp,编码307个氨基酸。构建植物过表达载体pCAMBIA1301-35S-EuAFP1.2,并遗传转化烟草(Nicotiana tabacum),筛选获得30株转EuAFP1.2基因植株,对转基因烟草植株与野生型及空载体转化烟草植株抗真菌病害能力进行比较。结果表明,在接种小孢根霉菌(Rhizopus microsporus)6 d后转EuAFP1.2烟草植株的相对病斑面积显著小于野生型与空载体转化植株的。接种前后转基因烟草的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性均先升高后降低,在接种后24 h酶活性显著高于野生型和转化空载体植株的;而丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量先下降后上升,接种后24 h迅速降低至14.89 nmol/g,显著低于野生型和转化空载体植株的;转基因烟草的脯氨酸含量在接种前后均显著高于野生型和空载体转化植株的。接菌前,转EuAFP1.2烟草中PR1a和PR2的表达量高于野生型和空载体转化植株的,分别为野生型的2.43倍和1.2倍,空载体的2.63倍和1.27倍,PR5表达量无显著差异。接菌24 h后,转EuAFP1.2烟草中的PR1a和PR2基因表达上调,且显著高于野生型和空载体转化植株的;PR5基因被诱导表达。说明EuAFP1.2基因的过表达可减小烟草植株病斑面积,提高烟草清除活性氧的能力及植株中病程相关蛋白基因的表达,从而增强植株对小孢根霉的抑制作用,提高植株的抗真菌病害能力。