小尺寸低聚壳聚糖/丹参酮ⅡA纳米载药体系

纳米载药系统以其独特的化学性质已广泛应用于小分子药物转运,并已有相关的临床实例报道[1~6].壳聚糖（CS）因其所特有的无生物毒性、易生物降解和良好生物相容性等优点而备受关注[7~16].由于传统方法制备的壳聚糖纳米颗粒粒径高达数百纳米,使其生物利用度低,限制了其更广泛应用.我们在前期工作中发现：一种无残留合成方法可以制备粒径在50~80 nm的小尺寸低聚壳聚糖纳米载体，并可携带药物高效穿透细胞膜，显著提高药效．

新型壳聚糖基自组装纳米胶束紫杉醇药物释放载体

以N-胆甾醇琥珀酰基-O-羧甲基壳聚糖(CCMC,胆甾醇基取代度6.9%)为原料,在水溶液中通过探头超声处理制备其自组装凝胶纳米胶束,采用稳态荧光探针法考察临界胶束浓度,并通过透射电镜和动态激光散射仪检测胶束的形态大小.以紫杉醇为模型药物,采用透析法制备载药CCMC纳米胶束,并通过高效液相色谱法(HPLC)考察其在纳米胶束中的包载及释放情况.结果显示,CCMC为两亲性高分子,在水溶液中能形成粒径为198.4 nm的规则球状胶束,临界胶束浓度为0.018 mg/mL.紫杉醇顺利包载于CCMC-纳米胶束内,载药量高达34.9%;随着载药量的增加,胶束粒径呈增大的趋势.体外释放实验结果显示,CCMC纳米胶束能延缓紫杉醇的释放,释药速度和释放介质pH值密切相关.

牛血清蛋白壳聚糖自组装纳米胶束的制备及理化性质研究

目的:研究两亲性壳聚糖衍生物N-辛基-O,N-羟乙基壳聚糖(OGC)对牛血清蛋白(BSA)的负载及其理化性质。方法:制备BSA自组装纳米胶束(BSA-OGC纳米胶束);高速冷冻离心和荧光法测定包封率和载药量,并测定粒径、Zeta电位;透射电镜(TEM)观察其形态;荧光扫描、红外光谱(FT-IR)和差示扫描量热分析(DSC)研究其理化性质。结果:随着OGC浓度升高和BSA浓度降低,BSA-OGC的包封率提高,载药量下降;载药前后,纳米胶束的粒径和电位值均减小;TEM照片显示OGC和BSA-OGC皆为规则球状结构,粒径分布均匀;荧光扫描、FT-IR、DSC结果表明BSA包裹在OGC中,两者是通过电荷和疏水双重作用自组装为纳米胶束。结论:两亲性壳聚糖衍生物OGC作为生物技术药物的传递系统具有潜在应用前景。

量子点标记壳聚糖衍生物自聚集纳米胶束的制备与表征

以EDC为偶联剂,将胆酸接枝到赖氨酸改性的壳聚糖主链的氨基上,得到一系列胆酸取代度相同(4.2%)而赖氨酸取代度不同(2.3%,4.4%,9.6%)的双亲性壳聚糖衍生物(CA-LysCS),利用FT-IR,1H NMR对其结构进行表征。CA-LysCS在水相中自组装形成自聚集体。以芘为荧光探针对其自聚集行为进行了研究,结果显示制得的自聚集体具有较之小分子表面活性剂较低的CAC(1.1×10-2～5.3×10-2mg/mL),表明自聚集体可在水相中形成稳定的胶束。且随着赖氨酸取代度的增加,CAC值随之增大。以激光粒度仪对自聚集体水相中的粒径分布进行了研究,发现其平均粒径随着赖氨酸取代度的增大有所增加(164.6～414.3nm)。以三辛基氧化膦(TOPO)为包裹剂,制备了油溶性硫化镉(CdSe)绿色量子点。用制备的自聚集体对量子点进行了包裹,TEM照片显示量子点位于自聚集体的疏水化核内。以荧光分光光度计对量子点的荧光特性进行了研究,发现包裹后量子点的荧光强度有所减弱。

基于改性壳聚糖纳米胶束的制备和表征及其细胞毒性评价

背景:壳聚糖进行化学改性以制备性能优良且细胞毒性低、生物相容性高、可降解的聚合物纳米胶束,在药物控释、组织工程等领域获得普遍应用。目的:将强疏水链十八烷氧基接枝到N-琥珀酰壳聚糖分子中,制备结构稳定、粒径较小的聚合物胶束,以获得可适用于药物传递载体或医学生物材料领域的聚合物纳米胶束。方法:用N-琥珀酰壳聚糖和十八烷基缩水甘油醚反应,在壳聚糖衍生物中引入长链疏水基。结果与讨论:成功制备出聚合物纳米胶束,通过红外光谱和1H核磁波谱表征,证实壳聚糖分子中成功引入了琥珀酰基和十八烷氧基。通过动态激光散射测量出其粒径在136～166nm,其临界胶束溶度在1.67×10-3～3.35×10-3g/L,反映出胶束具有非常好的稳定性,而且其临界胶束浓度值和粒径随着疏水链接枝率的增加而减少。MTT法检测说明该胶束对细胞毒性极低。

两亲性壳聚糖/槲皮素纳米胶束的制备及其理化性质研究

槲皮素(QCT)是一种类黄酮化合物,具有较强的抗氧化、抗炎等作用,在热带植物界中广泛存在。但由于槲皮素溶解度低、稳定性差,因此限制了其在食品、医药中的应用。本研究以脱氧胆酸(DA)为疏水基团,N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)作为亲水基团合成了一种新型两亲性壳聚糖(ACS),并制备了两亲性壳聚糖槲皮素纳米胶束(ACS-QNMs)。结果表明,傅里叶红外光谱分析证明DA和NAC已成功接枝到壳聚糖上,荧光分光光度计测定空白胶束的临界胶束浓度值(CMC)为26.92μg/mL,扫描电镜观察纳米载药胶束外观呈球形且分布均匀。纳米粒度电位分析仪测定纳米胶束电位为31 mV。研究表明,槲皮素经两性壳聚糖包埋后,能在人体温度37℃下缓慢释放,同时在室温下稳定储存。

羧甲基壳聚糖纳米胶束的制备与光响应性研究

智能响应性聚合物胶束作为药物控释传递系统的载体引起广泛关注,其中光刺激因为可控性高、清洁高效等优点被广泛研究.该文以丁二酸酐为连接臂将1-芘甲醇(PyM)接枝到羧甲基壳聚糖(CMCS)的氨基上制得两亲性大分子(PMS-g-CMCS),然后在水溶液中自组装成光响应纳米胶束.采用动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)表征胶束的大小和形态,并研究光刺激前后胶束的大小变化;通过核磁和荧光研究胶束的光响应机制.结果表明该胶束为类球形核-壳结构,粒径约200nm,且具有较好储存稳定性;在紫外(UV)光照下,能发生结构改变,其光响应机制可归因于连接PyM的酯键断裂.胶束显示出可用作疏水性药物或农药光控释放载体的潜力.

聚乙二醇接枝改性壳聚糖自组装纳米胶束的研究

利用聚乙二醇单甲醚(mPEG)对壳聚糖进行接枝改性,制得具有两亲性的接枝改性壳聚糖(mPEG-g-CS)衍生物,并通过自组装制得mPEG-g-CS纳米胶束。研究结果表明,在甲醛的作用下,mPEG与壳聚糖的-NH2发生了接枝反应获得取代度为27.4%的mPEG-g-CS样品,所得的mPEG-g-CS样品的结晶性与热稳定性均比壳聚糖弱。通过芘荧光探针分析发现,当mPEG-g-CS的浓度达到临界胶束浓度(CMC,0.014mg/mL),mPEG-g-CS分子自聚集成纳米胶束,且随着其浓度的增大,其自组装纳米胶束的粒径及其分布呈指数增加。

聚甲基丙烯酸甲酯纳米发泡材料的制备:胶束尺寸对发泡行为的影响

采用超临界二氧化碳固态发泡法制备聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)纳米发泡材料,通过添加两嵌段共聚物聚苯乙烯-聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA/PS-b-PMMA)来调控共混物的胶束尺寸,系统研究胶束尺寸对发泡行为的影响。首先,根据嵌段"自组装"的特性,通过控制嵌段质量比制备出不同胶束尺寸的原始样品。通过透射电镜(TEM)观察可知,胶束尺寸随嵌段质量比增加而变大。其次,利用扫描电镜(SEM)探索了胶束尺寸对其发泡行为的影响。结果表明,胶束尺寸对泡孔形貌有显著影响,胶束尺寸过小反而会导致大小孔形貌出现,只有当胶束尺寸与泡孔尺寸为一个数量级时,才能得到均匀分布的泡孔;此外,研究还发现增大胶束含量有助于得到倍率高且泡孔均匀的纳米孔径发泡材料。

聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖的接枝率对其纳米胶束自组装特性的影响

目的研究合成产物聚乙二醇单甲醚接枝壳聚糖(m PEG-g-CS)中聚乙二醇接枝率对其纳米胶束自组装特性的影响,为自组装纳米胶束作为药物载体的研究提供理论依据。方法按5种不同的壳聚糖(CS)与聚乙二醇单甲醚(m PEG)的投料质量比(CS/m PEG分别为1∶1、1∶3、1∶6、1∶9、1∶12),通过甲醛连接法合成不同接枝率的m PEG-g-CS。采用稳态荧光探针法荧光分光光度计测定其荧光强度计算m PEG-g-CS临界胶束浓度,并通过粒径分析仪分析自组装纳米胶束粒径分布。比较接枝率不同的聚合物对其临界胶束浓度及粒径大小的影响。结果 CS质量一定的情况下,随着m PEG投料质量比增加(CS/m PEG分别为1∶1、1∶3、1∶6、1∶9),聚合物接枝率和临界胶束浓度均依次增高(P<0.05)。其中投料质量比为1∶1组自组装纳米胶束平均粒径最大,投料比为1∶6组平均粒径最小;除投料比为1∶9组与1∶12组平均粒径比较差异无统计学意义(P>0.05)以外,其余各组平均粒径比较差异均有统计学意义(P<0.05)。CS/m PEG 1∶1组和1∶3组粒径分布出现双峰,1∶6组、1∶9组、1∶12组粒径分布呈现均一单峰分布。结论通过控制m PEG和CS的投料质量比可获得不同接枝率的m PEG-g-CS样品,m PEG-g-CS能自组装成纳米胶束,且接枝率不同的聚合物其纳米胶束自组装特性和粒径分布亦出现差异。根据其胶束的稳定性和粒径分布,投料比为1∶6和1∶9的聚合物有望作为纳米药物载体。

两亲性壳聚糖载药纳米胶束的制备及其对灰葡萄孢菌的抗菌性能研究

丁香精油是一种天然的高效抑菌剂,但是由于其水溶性差,限制了其广泛应用。研究以软脂酸(PA)为疏水基团,以N-乙酰-L半胱氨酸(NAC)为亲水基团,合成了具有两亲性的壳聚糖衍生物(PA-CS-NAC),并进一步制备了丁香精油-两亲性壳聚糖载药纳米胶束(NMs)。傅里叶红外光谱和核磁共振氢谱表明,PA和NAC都成功接枝到壳聚糖上。扫描电镜结果显示,NMs的形貌呈现分散均匀的圆球状。研究结果表明,丁香精油-两亲性壳聚糖载药纳米胶束在室温条件下具有pH响应性能,其对灰葡萄孢菌的抑菌性能较未包埋的丁香精油提高10%以上,抑菌性能显著提高。

壳聚糖接枝聚赖氨酸苄酯负载紫杉醇纳米胶束的制备及性能研究

[目的]:利用自主装法制备载紫杉醇纳米胶束。[方法]:以壳聚糖接枝聚赖氨酸苄酯作为载体负载紫杉醇,通过自主装的方法制备载药胶束,通过体外释放实验考察载药胶束中紫杉醇的释放规律,通过Zeta电位粒径测定仪测定载药胶束的粒径。[结果]:通过自主装的方法能够顺利制备得到紫杉醇载药胶束,体外释放实验表明紫杉醇在纳米胶束中的释放包含了一个快速释放及一个缓慢释放的过程。载药胶束的粒径范围在40-120nm之间。

聚苯乙烯-b-聚丙烯酸/聚苯乙烯在水中的自组装及胶束尺寸的研究

利用动态光散射、透射电镜研究了嵌段共聚物聚苯乙烯 b 聚丙烯酸(PS b PAA)与均聚物聚苯乙烯(PS)在选择性溶剂水中的自组装行为.由于均聚物PS与PS嵌段具有相同的结构单元,均聚物PS参与胶束的形成,和嵌段共聚物的PS链段一同组成胶束的核;在适当的均聚物分子量和含量条件下,PS b PAA PS可以自组装形成单分散的纳米胶束;通过改变体系中均聚物PS的分子量和含量可在较大范围内调变胶束的尺寸.

壳聚糖衍生物胶束的功能化修饰及其在不同给药系统中的应用进展

目的:综述壳聚糖(CS)衍生物胶束功能化修饰及其在不同给药系统中的应用进展,以期为其深入研究和应用提供参考。方法:以"壳聚糖""胶束""给药系统""Chitosan""Micelle""Drug delivery system"等为关键词,组合查询1995年1月-2019年5月在中国知网、万方数据、Web of Science等数据库中发表的相关文献,对其各衍生物胶束的功能化修饰及其在不同给药系统中的应用进行综述。结果与结论:共检索到相关文献478篇,其中有效文献37篇。CS作为一种性能优良、可修饰性强、生物相容性高的天然高分子材料,可通过疏水骨架、长循环、P-糖蛋白抑制、靶向、刺激信号响应等多种功能化修饰装载疏水性药物,制成CS衍生物胶束,在黏膜给药、眼部给药、口服给药等多种给药系统中均展现出巨大的应用潜力。目前,CS衍生物胶束在解决难溶性药物溶解度、促进药物渗透、增强靶向、提高生物利用度等方面已取得长足发展,但多停留在体外研究,且对详细作用机制的研究较少。若要将其成功应用于临床,尚需对CS衍生物胶束的体内稳定性、药物释放度、药物靶向效率等关键问题进行深入考察。

2-甲基-α-卡波林-3-甲酰胺-两亲性壳聚糖胶束的制备及体外心肌保护活性评价

目的:制备负载2-甲基-α-卡波林-3-甲酰胺(2MAC3C)的两亲性壳聚糖纳米胶束,以改善其水溶性,并研究该载药胶束对大鼠心肌细胞(H9c2)缺氧/复氧(H/R)损伤活性的影响。方法:以天然高分子材料壳聚糖为骨架,衍生化为羟乙基壳聚糖-辛酸偶联物(OHC);采用~1H-NMR、红外分光光度法确证OHC的结构;透析法制备2MAC3C-OHC纳米胶束;芘荧光光谱法测定纳米胶束的临界胶束浓度(CMC);透射电镜观察纳米胶束形态;粒度测定仪考察其粒径及电位;离心法考察制剂的包封率及载药量;运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察2MAC3C-OHC对H9c2心肌细胞毒性及H/R损伤活性的影响。结果:2MAC3C-OHC的CMC为0.250 g/L;形态为球形;平均粒径为(227.7±3.0)nm;Zeta电位为(9.84±0.72)mV;包封率为(68.00±3.67)%;载药量为(19.32±0.11)%;与2MAC3C溶液组相比,2MAC3C-OHC对H9c2心肌细胞的毒性减弱;2MAC3C-OHC能显著提高损伤后H9c2心肌细胞存活率(P<0.001)。结论:所制备的2MAC3C-OHC粒径小,载药量高,提高了2MAC3C对H/R损伤后H9c2心肌细胞存活率,同时改善了较高浓度时2MAC3C对H9c2心肌细胞毒性。研究结果对2MAC3C-OHC在缺氧/复氧(H/R)损伤或心肌缺血再灌注损伤(MIRI)治疗中的应用奠定了基础。

基于酪蛋白结构变换的核壳型抑菌纳米粒设计与构建

基于酪蛋白的活性物质递送体具有多种优良性能,为提高酪蛋白(CN)胶束对亲水性物质的负载率,在胶束纳米结构尺度研究了胶束扰动因素对溶菌酶(Ly)负载的影响,制备了具有核壳结构的抑菌纳米粒。粒径分布和Zeta电位表明,低浓度NaCl和乙二胺四乙酸(EDTA)有利于CN胶束的部分解离,使Ly负载率提高了8%;红外分析显示,不同胶束扰动因素下复合纳米粒中蛋白质的二级结构和氢键缔合发生了改变;扫描电镜表明CN-Ly纳米粒具有球形结构。低分子量壳聚糖包覆纳米粒后,对金黄色葡萄球菌(S.aureus)和大肠杆菌(E.coli)均具有较强的抑菌活性,且该复合纳米粒在pH5.4的酸环境中具有缓释性能,24 h释放率达到61.5%,活性保留率达到80%以上。该纳米粒在食品和医药工业有着潜在的应用前景。

大麻二酚-胆甾醇琥珀酸单酯-g-羧甲基壳聚糖纳米胶束体内药动学及体外抗炎作用研究

目的研究大麻二酚(CBD)-胆甾醇琥珀酸单酯-g-羧甲基壳聚糖(CCMC)纳米胶束在大鼠体内的药动学及组织分布特性,并初步评价其体外抗炎作用。方法采用透析法制备CBD-CCMC纳米胶束,并对其性能进行表征。将SD大鼠分为CBD组和CBD-CCMC纳米胶束组,每组6只,分别灌胃100 mg/kg CBD和CBD-CCMC纳米胶束(以负载的CBD计);于给药后0.5、1、1.33、1.5、1.75、2、4、8、24、48 h眼眶采血,计算药动学参数。另取大鼠同法分组、给药,每组24只;分别于给药后0.25、1.5、10、24 h,每组取6只大鼠分离其心、肝、脾、肺、肾、肌肉组织,分析药物的组织分布情况。采用脂多糖诱导来建立Caco-2细胞炎症模型,分别以终质量浓度为5、10、15μg/mL的CBD和CBD-CCMC纳米胶束(以负载的CBD计)作用24 h后,检测细胞活力、跨膜电阻(TEER)和炎症刺激下细胞产生的炎症因子[白细胞介素1β(IL-1β)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平。结果所制CBD-CCMC纳米胶束的平均粒径为(230.6±1.8)nm,多分散性指数为0.170±0.053,Zeta电位为(-13.5±1.2)mV,包封率及载药量分别为(86.35±0.56)%、(9.18±0.32)%;溶解度为68.240μg/mL。药动学结果显示,与CBD组比较,CBD-CCMC纳米胶束组大鼠的药时曲线下面积(AUC)0-48 h、AUC0-∞、半衰期、峰浓度均显著增加/延长(P<0.05或P<0.01)。组织分布研究结果表明,在同一时间点,CBDCCMC纳米胶束组大鼠组织中药物的分布浓度均高于CBD组。抗炎作用研究结果显示,与同质量浓度的CBD相比,CBD-CCMC纳米胶束可显著提高细胞活力(P<0.05或P<0.01),升高TEER,降低细胞中IL-8、IL-1β、TNF-α水平(P<0.01)。结论CBDCCMC纳米胶束能够增加CBD血药浓度和组织分布浓度,提高CBD的抗炎活性。

两亲性壳聚糖衍生物负载及缓释醋酸曲安奈德的性能

背景:醋酸曲安奈德是一种长效肾上腺糖皮质激素,具有较强的抗炎作用。近年来在眼内疾病的治疗中取得了较好的效果,但同时带来一些不良反应,且需多次注射,以防止疾病复发。壳聚糖经接枝改性,生成的共聚物可在水溶液中生成纳米粒,用于药物的缓释载体,延长药物作用时间,降低不良反应,提高生物利用度。目的:合成含脱氧胆酸基团的两亲性壳聚糖衍生物作为醋酸曲安奈德的载体材料,制备具有缓释功能的载药纳米胶束,研究其负载和缓释醋酸曲安奈德的性能。方法:通过酰胺化反应在壳聚糖上偶联脱氧胆酸基团,合成两亲性壳聚糖衍生物。透射电镜观察纳米粒的外观形态和粒径,Zeta电位分析仪测定纳米粒的Zeta电位,体外释放实验检测负载醋酸曲安奈德的壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒的包封率、载药量和体外释药性能。结果与结论:合成出含脱氧胆酸基团的两亲性壳聚糖衍生物,它能与醋酸曲安奈德形成载药纳米胶束,载药量可高达82%。随着载药量的增加,载药纳米胶束的粒径逐渐增大,而Zeta电位则呈下降的趋势。体外释放的结果表明载药纳米胶束能起到72h缓释醋酸曲安奈德的作用。提示以两亲性壳聚糖衍生物为载体的载药纳米胶束显示出较好的缓释醋酸曲安奈德性能,将有希望提高醋酸曲安奈德的治疗效果。

N-软脂酰基壳聚糖的制备及其改善靛玉红水溶性的药动学研究

目的制备N-软脂酰基壳聚糖(PLCS)纳米胶束,改善难溶性药物靛玉红的溶解性与生物利用度。方法首先使用溶胀的壳聚糖与软脂酸酐在二甲基亚砜溶剂中反应合成水溶性的PLCS,通过IR和1H-NMR表征PLCS的结构;然后用其负载靛玉红,以激光散射和透射电镜检测载药纳米胶束的物理特征,用HPLC法测定其包封率。最后进行载药纳米胶束腹腔注射给药后在大鼠体内的药动学实验,与靛玉红混悬剂对照。结果合成得到的PLCS能很好地负载并增溶靛玉红,载药率可达10%左右。药动学研究表明,用PLCS载靛玉红后较靛玉红混悬剂的AUC提高了2.21倍,显著提高了靛玉红在大鼠体内的生物利用度。结论PLCS可作为提高难溶性药物靛玉红生物利用度的有效载体,进而可能改善靛玉红治疗白血病的疗效。

一种新型蛋白缓释载体——两亲性壳聚糖衍生物的研究

目的:研究两亲性壳聚糖衍生物N-辛基-O,N-羟乙基壳聚糖(OGC)分子量和辛基取代度不同对牛血清蛋白(BSA)的负载及其释放行为的影响。方法:制备BSA-OGC纳米胶束;高速冷冻离心和荧光法测定包封率和载药量,并测定粒径、Zeta-电位;在PBS 7.4(37℃)中测定BSA-OGC纳米胶束的体外释放行为;用SDS-PAGE明胶电泳考察BSA在纳米胶束体外释放过程中的稳定性。结果:辛基取代度越高,BSA的包封率和载药量越小,且释放越慢;分子量对BSA的负载影响不大,但BSA的释放会随着分子量的增加而变慢;OGC可保证BSA在释放过程中的稳定性。结论:两亲性壳聚糖衍生物OGC可作为优良的蛋白缓释载体。