水环境小平台建立脾虚证大鼠模型及其评价

目的:通过水环境小平台建立脾虚证大鼠模型,在多组横向及纵向比较基础上,依据大鼠的症状表现、理化指标评价水环境小平台建立大鼠脾虚证模型的可行性,探讨水环境小平台最佳造模时间及造模强度。方法:将180只大鼠随机分为空白对照组(7 d、14 d及21 d组)、水环境小平台组(7 d 4 h、12 h、20 h组;14 d 4 h、12 h、20 h组;21 d 4 h、12 h、20 h组)以及力竭游泳组(7 d、14 d及21 d组),共分为15组,每组12只。记录各组大鼠摄食量、体质量变化以及一般状况(毛发、活动度、精神),检测大鼠血清D-木糖吸收率、乳酸含量水平。结果:与空白对照组比较,力竭游泳组与水环境小平台组(除7 d、14 d、21 d 4 h组外)摄食量及体质量明显降低(P<0.01,P<0.05);力竭游泳组及水环境小平台组之间存在一定差异,但不具有统计学意义(P>0.05)。此外,力竭游泳组及水环境小平台组(除7 d 4 h组外)D-木糖吸收率均低于空白对照组(P=0.05);血清乳酸水平检测显示水环境小平台组(除7 d 4 h组外)及力竭游泳组显著高于空白对照组(P<0.05),水环境小平台组(21 d 12 h组)与力竭游泳组乳酸水平相当(P>0.05)。水环境小平台组内比较:21 d 20 h组D-木糖吸收率明显低于其他组(P<0.01),血清乳酸含量高于其他组(P<0.05),症状积分高于其他组,但没有统计学差异(P>0.05)。结论 :利用水环境小平台建立脾虚证模型具有可行性,其中21 d 12 h组为最佳造模搭配。

深慢波睡眠剥夺对大鼠睾丸组织氧化应激反应的影响

目的:研究深慢波睡眠剥夺对大鼠睾丸组织氧化应激反应的影响。方法:36只5周龄健康雄性Wistar大鼠,随机分为深慢波睡眠时相剥夺组(SD1组)、深慢波睡眠时相及时长剥夺组(SD2组)和空白对照组(CC组),每组12只,利用小平台水环境建立深慢波睡眠剥夺模型。SD1组每间隔24 min干扰1次,SD2组每间隔24min剥夺睡眠8 min;夜间都进行12 h的完全睡眠剥夺。CC组模拟正常的12 h光照、12 h黑暗时间。28 d后,大鼠股动脉放血,留取睾丸组织进行称重,测定睾丸组织中蛋白含量、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物岐化酶(SOD)水平,显微镜下观察睾丸病理结构的改变。结果:SD1、SD2组大鼠的终末体质量[(248.1±25.1)g、(232.9±10.1)g]均下降,与CC组[(268.5±1.6)g]相比差异有统计学意义(P均<0.05);与CC组相比,SD2组睾丸相对质量明显升高[(54.9±3.5)×10^(-2)vs(50.0±1.3)×10^(-2),P<0.05]。与CC组相比,SD2组睾丸组织蛋白含量、MDA含量、SOD活性和GSH-Px均有显著差异[蛋白含量:(4.5±0.9)g pro/L vs 6.3±1.4)g pro/L;MDA含量:(1.3±0.3)nmol/mg pro vs(1.1±0.1)nmol/mg pro;SOD活性:(135.2±26.9)U/mg pro vs(104.3±33.1)U/mg pro;GSH-Px活性:(21.7±4.3)U/mg pro vs(15.6±4.0)U/mg pro,P均<0.05],而与SD1组比较差异无统计学意义。SD1组睾丸病理学改变不明显,但SD2组睾丸生精小管管腔变小,周围间质部分增加,间质充血水肿明显。结论:长期深慢波睡眠剥夺对大鼠睾丸组织结构产生损伤并引起氧化应激反应。

基于饮食劳倦伤脾理论的五种脾气虚证造模方法的比较

目的比较五种常见的脾气虚证造模方法,以建立符合中医临床的脾气虚证动物模型。方法60只雄性昆明小鼠随机分为正常组、饮食失节组、跑步组、站立组、跑步+饮食失节组、站立+饮食失节组,每组10只。饮食失节组单日禁食不禁水,双日自由饮食饮水;跑步组以16 m/min的速度每天跑步20 min;站立组在自制水环境小平台箱内站立每天4 h;跑步+饮食失节组以16 m/min的速度每天跑步20 min,同时单日禁食不禁水,双日自由饮食饮水;站立+饮食失节组在自制水环境小平台箱内站立每天4 h,联合单日禁食不禁水,双日自由饮食饮水。各组持续造模14天。观察各组小鼠一般情况,隔日记录小鼠的摄食量、饮水量,计算粪便含水率;旷场实验观察小鼠5 min运动距离、平均速度;计算胃残留率、小肠推进率,测定肠道消化酶活性、血清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,评价脾气虚模型。测定血清中sigA含量、血常规、脏器指数,评价免疫功能。结果与正常组相比,饮食失节组、跑步+饮食失节组小鼠暴躁易怒,被毛无光泽,粪便颗粒较小、无光泽、硬而干,粪便含水率呈下降趋势,每日摄食量、饮水量呈增长趋势;跑步组小鼠反应灵敏,被毛无光泽,粪便软硬适中,粪便含水率、饮水量呈增长趋势,每日摄食量呈下降趋势;站立组小鼠反应迟钝、眯眼、弓背,被毛蓬枯槁无光泽,粪便呈条形软便,粪便含水率呈增长趋势,每日摄食量、饮水量呈下降趋势;站立+饮食失节组小鼠暴躁易怒,被毛无光泽,粪便软硬适中,粪便含水率、每日摄食量、饮水量整体表现出增长趋势。与正常组比较,饮食失节组、跑步组小鼠5 min运动距离、平均速度,跑步组脾脏指数显著升高(P<0.05)。站立组小鼠5 min运动距离、平均速度显著低于其他造模组,胃残留率显著低于饮食失节组,小肠推进率显著高于正常组、饮食失节组、跑步组、跑步+饮食失节组,小肠黏膜蛋白酶及蔗糖酶活性显著低于正常组、站立+饮食失节组,肝脏指数显著高于跑步组(P<0.05)。站立组、站立+饮食失节组小鼠血清中LDH含量显著低于饮食失节组(P<0.05)。站立+饮食失节组肝脏指数显著高于其余各组,血小板数显著低于正常组(P<0.05)。饮食失节组肝脏指数显著高于正常组、跑步组、跑步+饮食失节组,血红蛋白数显著低于站立组(P<0.05)。跑步+饮食失节组红细胞数显著低于站立组、站立+饮食失节组,血红蛋白数显著低于正常组、站立组、站立+饮食失节组(P<0.05)。结论利用水环境小平台建立的小鼠模型更符合脾气虚证诊断标准。

脾虚1号方对功能性消化不良大鼠CGRP、CCK和VIP的影响

目的观察低、中、高三种剂量脾虚1号方对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的影响。方法碘乙酰胺灌胃复合水环境小平台站立法复制大鼠FD模型。将大鼠随机分成5组:对照组、模型组、西药组、脾虚1号方低剂量组(以下简称低剂量组)、脾虚1号方中剂量组(以下简称中剂量组)和脾虚1号方高剂量组(以下简称高剂量组)。使用Elisa检测血清中CGRP、CCK和VIP的含量;使用rt-PCR检测下丘脑和胃窦中CGRP mRNA、CCK mRNA和VIP mRNA的表达情况。结果与对照组相比,模型组大鼠血清中CGRP、CCK和VIP的含量均上升;与模型组相比,低剂量组大鼠血清中VIP含量下降,中剂量组大鼠血清中CGRP、CCK和VIP的含量下降,高剂量组大鼠血清中CGRP的含量降低。与对照组相比,模型组大鼠下丘脑中CGRP mRNA、CCK mRNA和VIP mRNA的含量均上升;与模型组相比,低剂量组大鼠下丘脑中VIP mRNA的含量下降,中、高剂量组大鼠下丘脑中CGRP mRNA、CCK mRNA和VIP mRNA的含量下降。与对照组相比,模型组大鼠胃窦中CGRP mRNA、CCK mRNA和VIP mRNA的含量均上升;与模型组相比,低剂量组大鼠胃窦中VIP mRNA的含量下降,中剂量组大鼠胃窦中CGRP mRNA、CCK mRNA和VIP mRNA的含量下降,高剂量组大鼠胃窦中CGRP mRNA和VIP mRNA的含量下降。结论脾虚1号方治疗FD的生物学基础与调节CGRP、CCK和VIP的表达有关。