小扁豆凝集素的制备与质量鉴定

作者采用甘肃产小扁豆,提取纯化出LCA,经鉴定达到了电泳纯度,其分子量为45000,血凝滴度,紫外、红外光谱特性和氨基酸组成等均与标准品基本一致,在LCA亲和交叉免疫电泳分离甲胎蛋白异质体中效果良好。有推广应用价值。

甲胎蛋白分子变异体交叉亲和酶联免疫电泳分析法

本研究创立一种快速、直接的甲胎蛋白小扁豆凝集素(LCA)亲和分子变异体分析法,这种新方法交叉亲和酶联免疫电泳法是由小扁豆凝集素亲和电泳和酶联火箭电泳结合构成的,能直接将甲胎蛋白分为 LCA 反应性和非反应性两个部分。分析了15例原发性肝癌,其血清甲胎蛋白 LCA 结合型占总量的21～90%,15例中有14例 LCA 亲和谱呈双峰型,而6例良性肝病患者均呈单峰型,属LCA 非结合型。显然,本法可以有效的鉴别这两种疾患。

甲胎蛋白异质体在鉴别肝细胞癌中的应用

20世纪70年代以来,甲胎蛋白（AFP）开始在我国作为肝癌高发区普查和肝癌早期诊断指标之一,在临床上已被广泛认可。AFP是目前最常用的肝癌标记物,但其阳性率不高,30%-40%为假阴性或低浓度。肝癌患者中AFP升高,慢性肝病、肝硬化等良性肝病患者中一部分AFP也有不同程度的升高，因此寻找肝癌早期诊断特异性指标具有重要的临床意义。近来研究发现，AFP在不同病理情况下产生的分子糖链结构不同，在肝癌病理情况下主要产生与小扁豆凝集素（LCA）具有强结合力的甲胎蛋白异质体（AFP—L3）。

凝集素微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体用于肝癌的诊断及分析

目的应用凝集素微量离心柱法（ACSC）检测甲胎蛋白异质体（AFP-L3），分析AFP-13在鉴别肝细胞癌（HCC）与良性肝脏病变中的价值。方法选择132例临床检测AFP为阳性的肝病患者血清。应用装有耦联了小扁豆凝集素（LCA）的微量离心柱分离、洗脱获得AFP-L3，采用配套试剂在美国雅培AXSYM酶免疫分析仪检测AFP以及AFP-L3含量，计算AFP-L3在AFP中的比例即AFP-L3％。结果以ACSC法分离AFP—13操作简便；HCC患者血清AFP-L3％异常升高，其均值明显高于良性肝病患者（P〈0．01）；根据AFP-L3％计算受试者工作曲线（ROC）曲线下面积为0．807。以AFP-L3％≥10％为临界值，分析79例HCC患者与53例良陛肝脏疾病患者，AFP-L3％异常的灵敏度为84、8％（67／79）；特异性为92．5％（49／53），与临床总体符合率为87．9％。结论应用ACSC辅助检测的AFP-L3在HCC与良性肝脏病变鉴别诊断中有一定临床价值。

AFP-L3阳性肝细胞癌患者肿瘤分期和外周血淋巴细胞亚群的研究

目的:分析小扁豆凝素结合型甲胎蛋白(AFP-L3)阳性的肝细胞癌患者肿瘤分期及外周血淋巴细胞的改变,探讨AFP-L3水平与肿瘤分期及免疫状态的关系。方法:采集60例肝细胞癌患者外周血,检测AFP及AFP-L3含量。根据外周血AFP-L3比例将60例原发性肝细胞癌患者分为2组:AFP-L3(+)组和AFP-L3(-)组。流式细胞术检测外周血中各淋巴细胞亚群(NK、CD4+、CD8+、CD4/CD8、Treg)的比例。结果:AFP-L3(+)组患者UICC分期Ⅲ+Ⅳ期为29例,AFP-L3(-)组为7例;AFP-L3(+)组患者BCLC分期C+D期为20例,AFP-L3(-)组为3例。AFP-L3(+)组患者发生血管侵犯为17例,远高于AFP-L3(-)组(1例)。AFP-L3(+)组患者外周血中NK细胞比例及CD4/CD8比值下降,CD8+T和Treg细胞显著比例上升。结论:外周血AFP-L3阳性的肝癌患者容易发生血管侵犯,且分期较差,可能与淋巴细胞亚群发生变化、免疫系统受到抑制有关。

亲和吸附纯化甲胎蛋白异质体方法的建立

目的利用小扁豆凝集素（LCA）建立基于微量离心柱的甲胎蛋白异质体L3（AFP—L3）的纯化方法。方法采用硫酸铵分级沉淀的方法由小扁豆中提取凝集素，偶联到活化的琼脂糖凝胶4B（sephrose4B）上，灌注离心柱，制备AFP—L3亲和吸附离心管。血清加入离心管后经吸附和洗脱，便可获得纯化的AFP—L3。随机选取10例AFP阳性患者血清，应用亲和吸附纯化法纯化AFP．L3后应用电化学发光法检测，并与传统的亲和免疫电泳方法相比较。结果10例患者血清经纯化后，AFP-L3检测结果有8例〉5ng／ml，亲和免疫电泳有6例呈现阳性反应。结论成功建立基于微量离心柱的亲和吸附纯化AFP—L3的方法，该方法具有较高的灵敏度，重复性好并且操作简便更利于临床实验室应用。

探讨AFP异质体在良恶性肝病中的鉴别诊断价值

目的探讨甲胎蛋白异质体(AFP-L3)检测在良恶性肝病鉴别诊断中的价值。方法对91例各类慢性肝病(良性肝病组)及16例肝癌患者,应用微量离心柱法分离小扁豆凝集素结合型AFP-L3,应用化学发光法同时检测血清中AFP总含量及AFP-L3含量,并计算AFP-L3百分含量(AFP-L3%)。结果以AFP-L3%>10%作为阳性判断标准,16例肝癌患者血清AFP-L3%阳性率为75%,良性肝病患者AFP-L3%阳性率为2.20%,肝癌AFP-L3%阳性率明显高于良性肝病(χ2=63.42,P<0.01);以AFP>400 ng/ml作为阳性判断标准,肝癌、良性肝病组血清中AFP阳性率分别为68.75%、25.27%,两者存在统计学差异(χ2=23.29,P<0.01),良性肝病组AFP、AFP-L3%阳性率分别为25.27%、2.20%,两种方法存在统计学差异(χ2=20.45,P<0.01),肝癌组AFP、AFP%阳性率分别为68.75%、75%,两种方法诊断阳性率的差异无统计学意义(χ2=0.15,P>0.05)。结论 AFP-L3%能有效区分肝癌和良性肝病,弥补AFP诊断肝癌的不足,具有一定的临床实用价值。

AFP异质体检测对原发性肝癌诊断价值

小扁豆凝集素(LCA)可将甲胎球蛋白(AFP)分为结合型和非结合型。我们采用亲和交叉电冰技术对临床246例肝癌患者检测AFP异质体,结果显示AFP异质体≥25%作为原发性肝癌(PHC)诊断标准,其敏感性为97.3%,与慢性肝病的鉴别诊断的特异性为97.55。

Siglecs及其配体参与母胎界面免疫耐受的建立

携带父方遗传物质的胚胎作为一种半同种异体移植物,能免于母体免疫系统的攻击,在母体子宫内成功植入,主要依赖于母胎界面免疫耐受机制的建立。母胎界面是母体与胎儿建立联系和物质交换的基础,此界面的免疫应答机制是妊娠得以正常维持的关键。母胎界面表达的免疫调节分子在此免疫耐受机制中发挥重要作用。研究表明,唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding Ig-like lectins,Siglecs)在母胎界面表达丰富,并在免疫调节中扮演重要角色。Siglecs是Ⅰ型免疫球蛋白样超家族的重要成员,通过与细胞表面糖蛋白或糖脂侧链上的唾液酸残基结合,参与免疫调节,在免疫细胞活化、增殖及其介导的生理病理过程中发挥重要作用。目前关于母胎界面Siglecs的表达研究主要集中于Siglec-6与Siglec-10,而其他Siglecs研究较少。Siglec-6与Siglec-10等Siglecs可能与不同配体结合,参与母胎界面免疫耐受的调控过程。因此,本文将对Siglecs及其配体在母胎界面的表达及其在免疫耐受中的作用进行综述。