经典名方小承气汤颗粒干法制备工艺及其质量标准研究

目的:优选小承气汤颗粒的干法制粒工艺,并制定其质量控制方法。方法:以颗粒一次性成型率、休止角、吸湿率及溶化性为考察指标,在单因素考察干法制粒机压片压力、辅料(糊精∶可溶性淀粉)比例和二氧化硅用量的基础上,结合正交实验,优选小承气汤颗粒的干法制粒最佳工艺。采用薄层色谱法(TLC)鉴别方法和高效液相色谱法(HPLC)测定小承气汤颗粒中游离蒽醌、总蒽醌(以大黄酸、大黄素、大黄酚)含量,建立其质控标准。结果:优化后的小承气汤颗粒干法制备工艺为:干膏粉∶辅料=7∶3,辅料(糊精∶可溶性淀粉=1∶1),二氧化硅用量5%,压片压力22 MPa。颗粒中大黄、厚朴和枳实饮片的TLC鉴别斑点清晰,阴性无干扰。大黄酸在36.22~362.20 ng、大黄素在36.80~368.00 ng、大黄酚在38.44~384.40 ng范围内线性关系良好(R^(2)=0.9999)。游离大黄酸、大黄素、大黄酚的平均回收率分别为98.46%,102.25%,99.02%;总大黄酸、大黄素、大黄酚的平均回收率分别为95.18%,93.84%,97.94%。结论:优选的干法制粒工艺条件稳定可行,适合规模化生产;质量控制方法简单准确,可用于小承气汤颗粒的质量控制。

小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的UPLC指纹图谱相关性研究

目的研究小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱相关性。方法采用UPLC法建立15批小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的指纹图谱,结合相似度评价、皮尔逊相关性分析、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对三者UPLC指纹图谱的相关性进行评价。结果15批小承气汤饮片(水煎液、颗粒)UPLC指纹图谱均确定了16个共有峰,并指认了14个峰;15批小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均大于0.90,三者对照指纹图谱的相似度均大于0.88。皮尔逊相关性分析结果显示,有8个共有峰在小承气汤饮片(水煎液、颗粒)之间具有极显著正相关关系。CA表明小承气汤水煎液和颗粒性质更接近,PCA发现4个特征值均大于1的主成分,包含了原始数据88%的信息,OPLS-DA筛选出7个变量投影重要性值大于1的差异性标志物。结论小承气汤饮片(水煎液、颗粒)的主要化学成分组成具有一致性,可为小承气汤复方制剂的质量控制和临床使用提供数据支持。

一测多评法同时测定小承气汤颗粒中9种成分的含量

目的建立一测多评(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)法同时测定小承气汤颗粒中柚皮苷、新橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚的含量。方法采用HPLC,Waters Xbridge C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,检测波长为280 nm(柚皮苷、新橙皮苷)、254 nm(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、和厚朴酚、厚朴酚、大黄酚、大黄素甲醚);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;进样量为10μL。以新橙皮苷为内参物,计算该成分与其他8种成分的相对校正因子,并计算各成分含量。将QAMS计算结果与外标法实测结果进行对比,验证所建立方法的可行性。结果9种成分在各自规定的浓度范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为87.06%~98.08%,RSD为1.21%~2.83%,QAMS法与外标法测定结果无显著差异。结论建立的方法准确可靠,QAMS法可用于小承气汤颗粒中9种成分含量的同时测定及质量控制。