小活络丸中乌头类生物碱成分含量测定方法的建立

目的:建立小活络丸中生物碱成分乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱与苯甲酰新乌头原碱的含量测定方法,以完善其质量标准。方法:采用高效液相色谱法,选择PICKERING C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇、乙腈和0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-)1,柱温25℃,检测波长232 nm,进样量15μL。结果:乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱及苯甲酰新乌头原碱分别在各自范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率分别为99.8%(RSD=0.8%)、99.9%(RSD=1.0%)、100.6%(RSD=1.4%)、100.8%(RSD=1.5%)、100.9%(RSD=1.5%)、100.6%(RSD=0.8%)。5批样品中上述6个成分含量范围分别为0.5~2.9、5.4~27.4、0.5~10.5、18.8~24.6、18.8~30.2及142.4~181.6μg·g^(-1)。结论:所建立的同时测定6个生物碱含量的测定方法可准确测定小活络丸中生物碱成分的含量,有助于提高小活络丸的质量标准。

小活络丸中乌头碱限量检查方法的建立

建立小活络丸(浓缩丸)中乌头碱的高效液相色谱限量检查方法。采用资生堂C18色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),检测波长235 nm,柱温35℃,流速1.0 mL/min,以乙腈-四氢呋喃(25∶15)混合溶剂(A)-0.1 mol/L醋酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱,检测小活络丸中乌头碱的含量。结果显示,在上述条件下,乌头碱在0.09~0.62μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为96.23%,RSD为2.52%(n=6)。本方法准确可靠,专属性强,线性关系及耐用性良好,符合标准制定和复核的相关要求,可以作为小活络丸中乌头碱的限量检查方法。

小活络丸镇痛药效成分的药物动力学研究

以小鼠热板法测定不同剂量、不同时程的痛阈。实验表明：小活络丸用药剂量在２０～１００ｍｇ／ｋｇ之间，具有良好的镇痛作用。借助于药物量─效关系，用时程一痛阈值推算出各时相的体存药量。经药物动力学研究，得到小活络丸镇痛药效成分的吸收、消除半衰期分别为１．２８ｈ、２．１４ｈ和１３．１６ｈ。可使药效得到参数控制，此法适用于成分复杂或成分未明的中成药制剂。

小活络丸药物动力学的研究

运用药物累积法对小活络丸进行了药物动力学研究。结果表明,小活络丸在小鼠体内符合二室开放式模型,测得其t^1/_2α=0.2443h^(-1),t^1/_2β=5.3407h^(-1)等动力学参数。

小活络丸中非法添加松香酸的检查方法研究

目的建立小活络丸中非法添加松香酸的HPLC检查法,并以HPLC/MS法加以验证。方法选用Waters Symmetry C18(5μm,4.6 mm×250 mm);Inertsil ODS-3(5μm,4.6 mm×250 mm);TURNER C18(100A,5μm,4.6mm×250 mm)3三种色谱柱,二极管阵列检测器(PDA),乙腈-0.1%甲酸溶液(75∶25)为流动相等度洗脱,柱温20℃,体积流量1 mL/min,检测波长241 nm(190～300 nm)。通过比对供试品与对照品HPLC色谱及光谱,对小活络丸中是否非法添加松香酸作定性分析。结果小活络丸供试品中均检出松香酸。结论本方法灵敏度高、准确性好,操作简单,可用于小活络丸中非法添加松香酸的定性检查。

小活络丸中乌头碱的溶出度研究

本文探讨了测定小活络丸中乌头碱溶出度的方法。用浆法,以pH3的70％乙醇液为介质,转速为100r.p.m。将乌头碱的相对累积溶出率与用生物法测定小活络丸在小鼠体内的吸收率做相关性分析,结果显示二者间有极显著的线性相关性。说明用本方法测定乌头碱的溶出度参数对评估小活络丸的内在质量有实用价质。

小活络丸联合双氯芬酸钠及功能锻炼治疗肩周炎

目的观察小活络丸联合双氯芬酸钠及功能锻炼治疗肩周炎的临床疗效。方法将99例肩周炎患者依据就诊顺序分为对照组50例和观察组49例,对照组采用双氯芬酸钠缓释胶囊口服,配合双手爬墙、甩手运动和头枕双手运动功能锻炼,观察组在对照组治疗的基础上加用小活络丸口服。治疗前后采用简化McGill疼痛问卷(SF-MPQ)评估患者肩部疼痛情况,采用肩关节功能评价量表评估患者肩关节功能改善情况,并观察患者中医证候积分改善情况。结果观察组治疗总有效率(89.80%,44/49)高于对照组(74.00%,37/50)(P<0.05)。治疗后2组SF-MPQ评分和中医证候积分低于治疗前(P<0.05),观察组SF-MPQ评分和中医证候积分低于对照组(P<0.05);2组肩关节功能评分高于治疗前(P<0.05)。观察组肩关节功能评分高于对照组(P<0.05)。结论小活络丸联合西药及功能锻炼治疗肩周炎,能减轻肩部疼痛,改善肩关节功能。

小活络丸中乳香的定性鉴别方法研究

目的建立小活络丸中乳香的定性鉴别方法。方法采用薄层色谱法和高效液相色谱法鉴别小活络丸中的乳香和乳香主成分11-羰基-β-乙酰乳香酸。结果运用建立的薄层色谱法检测15个厂家66批次的小活络丸,有16批次小活络丸未检出乳香和11-羰基-β-乙酰乳香酸,运用高效液相色谱法进一步检测,最终确定有15批次小活络丸未检出11-羰基-β-乙酰乳香酸,51批次检出乳香和11-羰基-β-乙酰乳香酸。结论建立的薄层色谱鉴别方法可用于小活络丸中乳香的定性鉴别,可作为小活络丸现行法定检验标准中乳香显微鉴别的有益补充。

小活络丸与布洛芬镇痛抗炎药理作用评价

以小鼠热板镇痛和小鼠巴豆油致炎为模型,初步观察了中药小活络丸和布络芬的镇痛抗炎作用。结果显示,以0·6g/kg的小活络丸伍用0·3g或0·15g/kg的布洛芬,不但可以明显增强其镇痛抗炎作用,还可明显减少二药的毒副反应。

小活络丸中小麦粉掺伪实时荧光PCR检测方法的建立

目的:通过实时荧光PCR-高分辨熔解曲线(HRM)联合分析技术,建立小活络丸(大蜜丸)中小麦粉掺伪快速、准确鉴别方法。方法:通过优化前处理方法,提取小活络丸样品的基因组;通过文献检索和生物信息学分析,得到小麦粉特异性引物;使用实时荧光PCR-HRM技术,对10批次小麦(粉)、16种其他禾本科植物及7种常见高淀粉食物样品进行特异性扩增,采用克隆测序对结果进行再确认;考察实时荧光PCR-HRM方法的检出限、精密度和重复性,同时对市售的小活络丸样品进行检测。结果:试验筛选获得了适用于本研究的特异性引物,建立了实时荧光PCR-HRM小活络丸掺伪小麦的检测方法;小活络丸样品掺伪小麦粉的检出限为0.01 g·g^(-1),试验精密度C_(t)值为26.63(RSD=2.15%),T_(m)值为89.53℃(RSD=0.05%);重复性Ct值为26.65(RSD=3.20%),T_(m)值为89.53℃(RSD=0.12%)。试验对市售的4个厂家9批次共计81份样品进行分析,确定了3批次来源于A厂家的小活络丸样品存在小麦粉掺伪的问题,将PCR扩增产物克隆测序,其结果为小麦(Triticum Aestivum L.)。结论:本研究建立了实时荧光PCR-HRM检测方法,可以快速判定小活络丸中小麦粉掺伪样品。

小活络丸的研究进展

小活络丸由胆南星、制川乌、制草乌、地龙、乳香（制）、没药（制）６味中药组成，来源于宋代《太平惠民和剂局方》卷一“活络丹”方，原名活络丹，又称小活络丹。具有祛风除湿、活络通痹的功效，用于风寒湿痹、肢体疼痛、麻木拘挛［１］，是临床常用的祛风除湿中成药之一...

中成药小活络丸中三种微生物对γ射线的敏感性

通过对小活络丸中大肠杆菌、白色念珠菌、短小芽胞杆菌的存活数与辐照剂量关系的研究,建立了在小活络丸中3种微生物的存活数与辐照剂量的数学模型,确定了3种微生物的D10值,并对影响辐照灭菌剂量的因素进行了讨论。结果表明,在小活络丸中,大肠杆菌对γ射线敏感性较高,白色念珠菌对γ射线敏感性次之,短小芽胞杆菌对γ射线敏感性较低。

HPLC法测定小活络丸(大蜜丸)中5-羟甲基糠醛的含量

目的建立高效液相色谱法测定小活络丸(大蜜丸)中糖转化产物5-羟甲基糠醛的含量。方法采用Kromasil C18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm);以甲醇-1mL·L-1冰醋酸(3∶97)为流动相;检测波长为284nm;流速为1mL·min-1,柱温为30℃。结果 5-羟甲基糠醛在2.838～113.52μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 5),最低检出限为0.3ng,平均回收率为95.8%,RSD为0.4%。结论该方法简便,快速,准确,精密度高,重复性好,可用于小活络丸(大蜜丸)中糖转化产物5-羟甲基糠醛的含量测定。

小活络丸中胆南星的薄层色谱鉴别方法

目的:建立小活络丸中胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱鉴别方法,用以帮助提高胆南星的鉴别手段。方法:采用薄层色谱方法,在异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10∶5∶5∶3∶1)上层溶液的展开条件下对所抽取45批样品进行实验。结果:经过对13个被抽样单位共45批样品的薄层色谱结果进行汇总统计分析,有73.33%的样品检出胆酸,86.67%的样品检出猪去氧胆酸,93.33%的样品检出鹅去氧胆酸。结论:建立的胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的薄层色谱鉴别方法,可作为小活络丸中胆南星鉴别的辅助手段。

小活络丸配合得宝松封闭治疗腰臀肌筋膜炎的临床观察

目的:探索治疗和预防腰臀肌筋膜炎的有效方法。方法:118例患者完全随机分为2组,A组39例采用得宝松局部封闭组,B组40例采用小活络丸组;C组39例采用得宝松局部封闭+小活络丸组,观察各组对缓解腰臀肌筋膜炎的临床表现及其对复发率的影响。结果:C组在缓解临床表现、治愈率、有效率和复发率等方面优于A组、B组(P<0.05),而B组和C组比较未见明显差异(P>0.05)。结论:小活络丸配合得宝松局部封闭治疗腰臀肌筋膜炎具有疗效好、方便易行等优点,在缓解临床症状,提高治愈率、有效率,尤其在降低复发率方面具有肯定的临床效果。

小活络丸镇痛作用及急性毒性的时间药理学研究

目的研究小活络丸对小鼠急性毒性及镇痛作用的昼夜节律性变化。方法小鼠在08:00,12:00,16:00,20:00,24:00和04:00经灌胃给予小活络丸后,观察其急性死亡率及对热板刺激反应的变化。结果小活络丸的急性毒性具有明显的昼夜节律,白昼用药毒性大于夜间。同样,药效作用也因用药时间不同而不同,镇痛作用夜间高于白昼。结论小活络丸对小鼠的急性毒性及镇痛作用均存在昼夜节律性。

小活络丸联合双氯芬酸钠治疗腰腿疼的临床研究

目的:观察小活络丸联合双氯芬酸钠治疗椎间盘突出、腰肌劳损或骨质增生引起的腰腿疼的临床疗效。方法:120例腰腿疼患者随机分为小活络丸组、双氯芬酸钠组和小活络丸联合双氯芬酸钠组,每组40例,分别给予小活络丸(一次2丸,一日2次),双氯芬酸钠肠溶缓释胶囊(一次0.1g,一日1次)以及小活络丸(一次2丸,一日2次)联合双氯芬酸钠肠溶缓释胶囊(一次0.1g,一日1次)治疗。3组患者均10日为一个疗程,连续治疗2个疗程。观察各组患者治疗前、后临床疗效和视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)。结果:3组患者治疗后,小活络丸联合双氯芬酸钠组总有效率97.5%,明显高于小活络丸组的82.5%和双氯芬酸钠组的85.0%(P<0.05)。治疗后视觉模拟评分(VAS)小活络丸联合双氯芬酸钠组评分为2.26±0.78分,也明显优于小活络丸组和双氯芬酸钠组(5.23±1.16分、4.82±1.49分,P<0.05)。结论:小活络丸联合双氯芬酸钠治疗椎间盘突出、腰肌劳损或骨质增生引起的腰腿疼疗效显著。

小活络丸抑制佐剂性关节炎大鼠免疫性炎症作用机制

目的:探讨小活络丸抑制佐剂性关节炎(AA)大鼠免疫性炎症作用及机制。方法:72只SD大鼠电子千分卡尺测量各鼠左、右后足跖厚度,并按体重和足肿胀度均衡随机分出:①空白对照组(12只);其余60只大鼠用Freund’s完全佐剂致炎造模,致炎后13d,病鼠出现继发性炎症反应后,用电子千分卡尺测量各鼠左、右后足跖厚度,并按体重和足肿胀度均衡随机均分为:②模型组,③地塞米松组(0.35mg.kg-1.d-1),④小活络丸高剂量组(3.0 g.kg-1.d-1),⑤小活络丸中剂量组(1.5 g.kg-1.d-1),⑥小活络丸低剂量组(0.75g.kg-1.d-1);连续灌胃给药14d,空白对照组和模型组灌胃等量的蒸馏水。分别于给药后第4d,9d和14d测量各组大鼠左、右后足跖厚度;14d禁食16小时后,15d眼眶取血,取血清测定肿瘤坏死因子(TNF)-α,白介素(IL)-1β,IL-6,高敏C反应蛋白(hs-CRP)、循环免疫复合物(CIC)和丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:地塞米松和小活络丸3.0g.kg-1对大鼠AA右后足跖肿胀有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01),但1.5g.kg-1和0.75g.kg-1对大鼠AA右足跖肿胀均未见抑制作用(P>0.05);地塞米松和小活络丸各剂量(3g,1.5g和0.75g.kg-1)均能明显降低大鼠血清中TNF-α,IL-1β,IL-6,hs-CRP,CIC和MDA含量(P<0.05,P<0.01),提高SOD活性(P<0.05,P<0.01)。结论:小活络丸下调AA大鼠炎症细胞因子表达,降低CIC含量并提高抗氧化能力,可能是其抑制免疫性、继发性炎症的作用机制。

本院773张复方小活络丸门诊处方分析

复方小活络丸由川乌（炙）、草乌（炙）、当归、川芎、白芍、地龙、乳香、没药、香附、胆南星组成，是临床治疗痹病的常用药物。方中以乌头属川乌（炙）、草乌（炙）温经活络、祛风除湿、散寒止痛，为君药，但因其所含二萜双酯型生物碱，如乌头碱，中乌头碱、次乌头碱等，故既是生理活性物质，也是引起中毒的主要毒性物质，治疗量与中毒量接近，使用不当会出现中毒及不良反应。笔者现对本院773张复方小活络丸处方作一分析。

小活络丸中痕量毒性成分乌头碱的快速限量检测

目的：建立毛细管电泳场放大富集技术快速检测小活络丸中痕量毒性成分乌头碱的方法。方法：采用非涂渍石英毛细管（50μm i.d.×43 cm,有效长度35 cm）为分离通道,60 mmol/L磷酸二氢钠（pH=6.0）-乙腈（8∶2）为运行缓冲体系;运行电压10 kV;进样电压12 kV,进样时间30 s;在进样之前设定用水冲洗,压力为3.5 kPa,冲洗时间5 s;紫外检测波长235 nm。结果：该法使乌头碱的检测灵敏度提高了400倍。乌头碱在37.5～2.4×103ng/mL范围内线性关系良好（r=0.999 5）,最低检测限为9.4 ng/mL,平均回收率为97.6%,RSD为1.9%。结论：本方法简便、快速、专属性强、选择性好、富集效率高,为小活络丸的生产及质量控制提供了一种新的、可靠的分析手段。