小白菊内酯通过LINC00299/miR-590-3p对阿尔茨海默病模型细胞损伤的影响

目的探讨小白菊内酯调控LINC00299/微小RNA(miR)-590-3p途径对阿尔茨海默病(AD)模型细胞损伤的影响。方法用Aβ_(1~42)处理SK-N-SH细胞复制AD细胞模型。CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量。实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LINC00299和miR-590-3p表达。采用上述方法观察抑制LINC00299对AD模型细胞损伤的影响。双荧光素酶报告实验验证LINC00299和miR-590-3p靶向关系。结果Aβ_(1~42)处理后,SK-N-SH细胞活力、miR-590-3p表达量、SOD活性明显降低,凋亡率、LINC00299表达量、MDA含量、LDH释放量明显升高(P<0.05)。小白菊内酯处理后,Aβ_(1~42)诱导的SK-N-SH细胞活力、miR-590-3p表达量、SOD活性明显升高,凋亡率、LINC00299表达量、MDA含量、LDH释放量明显降低(P<0.05)。LINC00299过表达逆转了小白菊内酯对Aβ_(1~42)诱导的SK-N-SH细胞凋亡和氧化损伤的影响。miR-590-3p与LINC00299序列直接结合。结论小白菊内酯可能通过调控LINC00299/miR-590-3p通路进而保护AD模型细胞损伤。

小白菊内酯对杏仁核电点燃大鼠的神经保护作用及机制

目的探讨小白菊内酯对杏仁核电点燃癫痫大鼠行为学影响及其机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只。对照组不进行电刺激,每天给予Tween80腹腔注射;模型组、小白菊内酯低剂量组、小白菊内酯高剂量组每天给予1次电刺激制备杏仁核电点燃癫痫模型,其中小白菊内酯低、高剂量组于电刺激1 h前分别给予小白菊内酯250μg/kg、500μg/kg腹腔注射,模型组给予Tween80腹腔注射,共干预15 d。观察各组大鼠癫痫发作情况;电刺激结束后24 h行Morris水迷宫实验,记录大鼠逃避潜伏期及穿越平台象限百分比;然后检测脑组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果随着造模时间的延长,癫痫造模各组大鼠癫痫发作等级逐渐升高,但小白菊内酯低、高剂量组大鼠癫痫发作级别均明显低于模型组(P均<0.05),且小白菊内酯高剂量组明显低于同期小白菊内酯低剂量组(P均<0.05)。水迷宫实验中,模型组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显长于对照组(P均<0.05),穿越平台象限百分比明显低于对照组(P<0.05);小白菊内酯低、高剂量组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显短于模型组(P均<0.05),穿越平台象限百分比均明显高于模型组(P均<0.05);可视平台实验中,各组大鼠逃避潜伏期、游泳速度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脑组织中MDA含量明显升高(P<0.05),GSH含量明显降低(P<0.05);海马突触间隙明显增宽(P<0.05),活性带长度明显缩短(P<0.05),突触后致密物厚度明显降低(P<0.05)。与模型组比较,小白菊内酯低、高剂量组大鼠MDA含量均明显降低(P均<0.05),GSH含量均明显升高(P均<0.05);海马突触间隙均明显缩短(P均<0.05),活性带长度均明显变长(P均<0.05),突触后致密物厚度均明显增加(P均<0.05)。与小白菊内酯低剂量组比较,小白菊内酯高剂量组大鼠脑组织中MDA、GSH含量变化更明显(P均<0.05)。结论小白菊内酯对杏仁核癫痫大鼠有很好的神经保护作用,机制可能与其抗氧化和保护海马超微结构有关。

Siglec-E影响小白菊内酯靶向MAPK/NF-κB通路抑制小胶质细胞M1极化

目的探讨唾液酸结合样凝集素E(sialic acid binding lectin E,Siglec-E)对小白菊内酯(parthenolide,PTL)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(BV2)M1极化作用的影响。方法①从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取Siglece相关小鼠脑组织单细胞测序数据,分为野生型组(WT,n=3)和敲除型组(Siglece^(-/-),n=4)。从中筛选出小胶质细胞并分析相关差异基因及通路富集。通过shRNA干扰技术构建BV2细胞株模型,得到NC-shRNA BV2和Siglece-shRNA BV2细胞并检测Siglec-E(Siglece)表达水平。②将NC-shRNA和Siglece-shRNA细胞分别分为Control组、LPS组、PTL组和PTL+LPS组(n=3),采用RT-qPCR检测小胶质细胞M1极化标志物iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平。将Siglece^(fl/fl)和Cx3cr1^(cre)小鼠交配,获得小胶质细胞特异性Siglec-E缺失(Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre))小鼠,并建立LPS诱导的神经炎症模型。③将出生4 d的各9只WT和Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)雄鼠分成Control组、LPS组和PTL+LPS组(n=3)。采用RT-qPCR、免疫荧光技术和Western blot验证敲除效果以及极化相关通路,研究Siglec-E影响PTL抑制小胶质细胞M1极化的机制。结果与NC-shRNA组比较,Siglece-shRNA组中Siglec-E表达显著降低(P<0.01),说明SiglecE敲除细胞模型建立成功。在LPS刺激的条件下,与Control组比较,NC-shRNA细胞和Siglece-shRNA细胞的iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平均显著上调(P<0.01)。PTL与LPS共同作用下,NC-shRNA细胞中上述M1极化的标志物均明显下降(P<0.05)。而对于Siglece-shRNA细胞,上述M1极化的标志物无显著下调。PTL对BV2细胞JNK、IκB蛋白的磷酸化具有抑制作用(P<0.01),也可抑制NF-κB核转位,而下调Siglec-E则会减弱该作用。与WT组小鼠比较,Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞Siglec-E表达显著降低(P<0.01),PTL对Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞NF-κB磷酸化水平的抑制作用也降低。结论小胶质细胞Siglec-E缺失会减弱PTL靶向MAPK/NF-κB通路对其M1极化的抑制作用。

生物提取物小白菊内酯抗肿瘤作用及机制的研究进展

小白菊内酯(parthenolide, PTL)是一种从小白菊中提取的倍半萜内酯,因其独特的化学性质和对多种肿瘤细胞的复合分子作用,被认为是一种极具潜力的抗癌候选药物。研究显示,PTL不仅能有效抑制核因子κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells, NF-κB)和STAT-3等关键转录因子,还可以触发特定的细胞死亡路径,促使细胞内活性氧增加和Bcl-2家族蛋白改变。此外,PTL对癌症干细胞也显示出了特异性的靶向能力。鉴于PTL的显著功效,该化合物有希望成为一种新的靶向癌症治疗的药物。本篇综述聚焦于探讨PTL在肿瘤模型中的作用机制,特别是其对肿瘤细胞基因表达、信号转导以及不同细胞死亡类型的影响。

小白菊内酯对食管癌细胞增殖 凋亡和能量代谢的影响

目的 探讨小白菊内酯对食管癌细胞增殖、凋亡和能量代谢的影响。方法 对人食管癌细胞Eca109转染肝激酶B1(LKB1)的短发夹RNA(shRNA)重组pLK0.1质粒(LKB1-shRNA)及阴性对照质粒(NC-shRNA),然后应用不同浓度的小白菊内酯处理Eca109细胞。使用细胞计数试剂(CCK-8)检测试剂盒测量细胞活力。使用Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双重染色分析细胞凋亡。使用定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法检测LKB1、cleaved PARP、磷酸化腺苷酸(AMP)激活蛋白激酶-α(p-AMPK-α)和AMPK-α的蛋白表达。使用Screen Quest荧光法葡萄糖摄取检测试剂盒检测葡萄糖摄取。使用三磷酸腺苷(ATP)分析试剂盒测量细胞ATP水平。结果 与未处理的Eca109细胞相比,10μmol/L小白菊内酯孵育24 h后细胞中LKB1的表达水平升高(P<0.05)。小白菊内酯处理抑制了Eca109细胞的增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导了细胞凋亡(P<0.05)。小白菊内酯处理升高了LKB1、p-AMPK-α和cleaved PARP的蛋白相对表达量(P<0.05)。然而,沉默LKB1则逆转了小白菊内酯对细胞增殖、凋亡、葡萄糖摄取和ATP合成的影响(P<0.05)。结论 小白菊内酯通过激活LKB1-AMPK轴来抑制食管癌细胞增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导细胞凋亡。

小白菊内酯对地塞米松诱导的成骨细胞增殖和分化的影响

目的探讨小白菊内酯(parthenolide,PTL)对地塞米松(dexamethasone,Dex)诱导的成骨细胞(MC3T3-E1)成骨分化及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法用浓度为2.5~80μmol/L的小白菊内酯与地塞米松共同处理MC3T3-E1细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性;将MC3T3-E1细胞分为对照组(Control组)、地塞米松组(Dex组)、小白菊内酯低、中、高浓度组(PTL-L组、PTL-M组、PTL-H组)、小白菊内酯高浓度+Wnt抑制剂组(PTL-H+DKK1组),碱性磷酸酶(ALP)染色检测细胞ALP活性,茜素红S染色观察细胞矿化结节形成;Western blot检测细胞Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、骨形成蛋白2(BMP2)、细胞周期蛋白Cyclin D1及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平。结果浓度为2.5~80μmol/L的小白菊内酯可促进地塞米松诱导的MC3T3-E1细胞增殖,选择小白菊内酯浓度为5.0、10.0、20.0μmol/L进行后续实验;与Control组相比,Dex组ALP活性显著降低,矿化结节减少,RUNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与Dex组比较,PTL-L组、PTL-M组、PTL-H组ALP活性、矿化结节数依次升高,RUNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平依次升高(P<0.05);与PTL-H组比较,PTL-H+DKK1组ALP活性与矿化结节显著降低,UNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论小白菊内酯通过激活Wnt/β-catenin信号通路,减轻地塞米松对成骨细胞增殖与分化的抑制作用。

靶向结直肠癌的小白菊内酯脂质体纳米颗粒诱导程序性坏死并改善T细胞耗竭

目的研究小白菊内酯(PTL)诱导结直肠癌细胞程序性坏死,并通过调节T细胞耗竭抑制结直肠癌的发展的机制,并通过构建其靶向脂质体改进其临床应用。方法通过CCK8实验检测不同结直肠肿瘤细胞经PTL处理后的增殖能力。利用ROS与LDH检测分析PTL诱导MC38细胞死亡的方式并进行蛋白免疫印迹分析。将24只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、低剂量PTL组(5 mg/kg)与高剂量PTL组(15 mg/kg),通过在小鼠腹股沟皮下注射MC38细胞构建皮下瘤模型,给药后检测各组小鼠皮下瘤的重量与CD8^(+)T细胞的浸润情况,分析CD8^(+)T细胞耗竭表型的变化。构建PTL脂质体并对其进行表征。通过在小鼠回盲部移植肿瘤构建结直肠癌原位移植瘤模型,将32只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、PTL处理组(100μg/mL)、低剂量靶向脂质体TCP-1-PTL-LNPs组(100μg/mL)和高剂量TCP-1-PTL-LNPs组(200μg/mL),尾静脉注射给药,通过免疫组化分析CD8在肿瘤中的表达情况。结果多种结直肠癌细胞(SW480、DLD1、HCT116和MC38)在PTL作用下随着药物浓度梯度增加细胞活力逐渐下降。在MC38细胞中,这一效应可被抑制剂Nec-1拮抗,同时免疫蛋白印迹分析显示经PTL处理细胞出现RIP3和MLKL的磷酸化。在小鼠皮下瘤模型中,经流式细胞术分析,与对照组或低剂量组相比,高剂量PTL组出现了肿瘤CD3^(+)CD8^(+)T细胞的浸润增加(P<0.01),同时PD1hiTIM3^(+)T细胞比例显著增加(P<0.01),而PD1loTIM3-T细胞比例显著降低(P<0.01)。在小鼠结直肠癌原位移植瘤模型中,经过PTL治疗,免疫组化结果显示CD8表达较对照组明显增加,而使用了高浓度靶向脂质体治疗的肿瘤中CD8表达更进一步增加(P<0.01)。结论小白菊内酯通过诱导细胞程序性坏死、增加肿瘤CD8^(+)T细胞浸润,改善CD8^(+)T细胞耗竭,其靶向脂质体能提高其抗肿瘤效应。

小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素对活化后肝星状细胞增殖能力的影响

目的探讨小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素对活化后肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖能力的影响。方法将大鼠HSC-T6细胞用含酒精的培养基诱导48 h使其活化;然后配置小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素不同浓度梯度含10%血清的DMEM培养基,分别培养活化后的HSC-T6,观察HSC-T6细胞的形态,以MTT法观察细胞增殖能力的变化。结果MTT结果显示,与对照组相比,小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素均可抑制活化后HSC的增殖(P<0.05),且抑制率呈浓度依赖关系。其中,(+)-Ainsliadimer A抑制细胞增殖的能力最强。结论小白菊内酯、含笑内酯、(+)-Ainsliadimer A和大黄素可能通过抑制活化的HSC增殖有效逆转酒精诱导的肝纤维化。

小白菊内酯抗肿瘤的作用机制研究

目的:研究小白菊内酯抗肿瘤的作用机制。方法:运用MTT比色法对细胞增殖抑制率进行测定,倒置显微镜下对EBL-7402细胞形态受到小白菊内酯的影响进行观察,Giemsa染色,运用DNA琼脂糖凝胶电泳方法对细胞凋亡进行检测,运用免疫组织化学方法对P53蛋白表达进行检测,并检测增殖细胞核抗原(PCNA),运用免疫细胞化学法对NF-kB活性进行检测。统计分析小白菊内酯对细胞生长的影响、P53蛋白表达结果、增殖细胞核蛋白PCNA表达结果、核因子-kB表达结果。结果:5.0μg/mL、7.5μg/mL、10.0μg/mL、15.0μg/mL、20.0μg/mL、30.0μg/mL、40.0μg/mL、80.0μg/mL、100.0μg/mL小白菊内酯对BEL-7402细胞的OD值均低于0.0μg/mL(P<0.05),5.0μg/mL、7.5μg/mL、10.0μg/mL、15.0μg/mL小白菊内酯对BEL-7402细胞的OD值逐渐降低(P<0.05),生长抑制率逐渐升高(P<0.05),20.0μg/mL、30.0μg/mL、40.0μg/mL小白菊内酯对BEL-7402细胞的OD值均高于15.0μg/mL、80.0μg/mL、100.0μg/mL(P<0.05),生长抑制率均低于15.0μg/mL、80.0μg/mL、100.0μg/mL(P<0.05)。空白对照、阳性对照、7.5μg/mL、15.0μg/mL小白菊内酯对BEL-7402细胞P53阳性表达逐渐增强(P<0.05)。空白对照、阳性对照、7.5μg/mL、15.0μg/mL小白菊内酯对BEL-7402细胞PCNA阳性表达逐渐减弱(P<0.05)。空白对照、阳性对照、7.5μg/mL、15.0μg/mL小白菊内酯对BEL-7402细胞BF-kB阳性表达逐渐减弱(P<0.05)。结论:小白菊内酯抗肿瘤的作用机制可能为对人肝癌BEL-7402细胞增殖进行抑制,并通过增强P53蛋白表达并抑制PCNA蛋白表达,诱导其凋亡,NF-kB参与其信号转导,从而对人肝癌细胞生长进行抑制。

小白菊内酯抑制胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及信号转导机理

目的 探讨小白菊内酯的抗动脉粥样硬化机理与IκBα ,环氧合酶 2 (COX 2 ) ,p2 1,p2 7蛋白表达的关系。方法 培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC) ,Western印迹杂交法检测IκBα ,COX 2 ,p2 1,p2 7蛋白表达 ,流式细胞仪检测VSMC周期情况 ,[3H ]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果小白菊内酯 (30 μmol·L- 1)以时间依赖关系上调IκBα ,p2 1,p2 7蛋白表达和以时间依赖关系抑制COX 2蛋白表达 ,10～ 30 μmol·L- 1以剂量依赖关系使VSMC周期中的G0 /G1期细胞比例明显增多 ,S期细胞比例显著减少 ,同时抑制VSMC的 [3H]TdR参入。结论 ①小白菊内酯可能通过上调IκBα蛋白表达抑制核因子 κB活性 ,从而抑制COX 2蛋白表达 ,通过抑制COX 2蛋白表达来抑制VSMC增殖 ;②小白菊内酯可能通过上调调控G1 S周期转换的p2 1,p2 7蛋白来抑制VSMC增殖。

小白菊内酯对兔膝骨关节炎血清IL-1β及TNF-α的影响

目的观察小白菊内酯(parthenolide,PTL)对兔膝骨关节炎的治疗作用及其对兔膝骨关节炎血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响。方法健康纯种新西兰兔40只,随机选择8只作为正常对照组(简称正常组),其余32只采用右后肢伸直位管型石膏固定法,建立膝骨关节炎模型。造模后随机分为4组:模型对照组(简称模型组)、PTL高剂量组(简称PTL高组)、PTL中剂量组(PTL中组)、PTL低剂量组(PTL低组),每组8只。应用酶联免疫吸附法检测观察各组动物灌服不同剂量的PTL时血清IL-1β和TNF-α的浓度。结果与模型组比较,PTL高、中、低组IL-1β及TNF-α的浓度均下降(P<0.01),且下降的幅度与PTL的浓度呈正相关(IL-1β:r=0.55,P<0.01;TNF-α:r=0.56,P<0.01)。而组间比较,在PTL浓度达到20μmol/L治疗组时抑制达到高峰。结论 PTL能下调兔膝骨关节炎血IL-1β及TNF-α的浓度,且下降的幅度与PTL的浓度呈正相关。

小白菊内酯及其衍生物药理作用研究进展

小白菊内酯(parthenolide)具有多方面的药理作用,并具有多重的抗炎和抗肿瘤的药理活性,小白菊内酯及其衍生物可被用作抗肿瘤药物。综述小白菊内酯及其衍生物的药理作用研究进展,为进一步研究提供参考。

小白菊内酯抗肿瘤作用机制研究进展

小白菊内酯是中药野生甘菊的主要提取成分,它是倍半萜烯内酯的主要成分,过去主要用来治疗偏头痛,发热和类风湿性关节炎等。近年来研究发现,小白菊内酯在多种肿瘤中通过不同机制发挥抗癌作用,并且研究发现小白菊内酯可以增强化疗药物和放疗对肿瘤细胞的杀伤性。因此小白菊内酯成为抗肿瘤药物的研究热点。本文主要从小白菊内酯的药理研究进展进行综述,以期进一步推动小白菊内酯在抗肿瘤作用中的研究和应用。

小白菊内酯对膝骨性关节炎兔模型血清及关节液肿瘤坏死因子-α和白介素-1β水平的影响

目的通过观察小白菊内酯对兔膝骨性关节炎(OA)模型血清及关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β水平的影响,探讨其治疗OA的作用机制。方法健康纯种新西兰兔32只,随机8只为正常组,其余的24只采用右后肢伸直位管型石膏固定法,建立OA模型。造模后随机分为3组:模型组、小白菊内酯组、盐酸氨基葡萄糖组,每组8只。小白菊内酯组兔予小白菊内酯灌胃,盐酸氨基葡萄糖组予盐酸氨基葡萄糖灌胃,其余两组予生理盐水灌胃,连续治疗6 w后,测定各组兔治疗前后血清、膝关节液TNF-α、IL-1β表达水平。结果小白菊内酯组、盐酸氨基葡萄糖组关节液及血清中的TNF-α、IL-1β浓度均明显降低(P<0.05或P<0.01),且小白菊内酯组降低幅度明显大于盐酸氨基葡萄糖组(P<0.05)。结论小白菊内酯可能通过抑制TNF-α、IL-1β的分泌而产生免疫调节作用,其抗炎疗效优于盐酸氨基葡萄糖。

小白菊内酯对帕金森病MPTP模型小鼠抗炎作用的研究

目的研究艾菊有效成分小白菊内酯在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对炎症因子环氧合酶-2(COX-2)及其产物前列腺素E2(PGE2)以及一氧化氮合酶(iNOS)表达调控的影响以及对多巴胺能神经元的保护作用。方法应用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,观察小鼠行为学变化,采用免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH),COX-2、PGE2以及iNOS的表达变化过程;并观察给予小白菊内酯后对上述变化的影响。结果与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,COX-2、PGE2、i NOS阳性细胞显著增加(P<0.01),同时伴有TH阳性神经元显著丢失58%(P<0.01);给予小白菊内酯处理后,模型小鼠PD症状减轻,黑质区COX-2、PGE2、iNOS阳性细胞明显减少(P<0.01),TH阳性细胞数较对照组仅下降27%。结论小白菊内酯可影响MPTP模型小鼠黑质COX-2、PGE2、iNOS的表达,起到抗炎作用进而对小鼠多巴胺能神经元起到一定保护作用。

小白菊内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的探讨小白菊内酯(PTL)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖、核因子-κB(NF-κB)活性和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法采用正常葡萄糖组(糖浓度为5.6 mmol/L)和高糖组(糖浓度为30 mmol/L)、高糖+PTL组,分别体外培养大鼠肾小球MC,MTT法检测MC的增殖,ELISA法检测培养液上清中MCP-1的浓度,Western Blot法检测IκBα反映NF-κB的活性,EMSA法检测NF-κB的活性。结果高糖诱导后MC增殖、MCP-1表达和NF-κB活性明显增强,NF-κB结合蛋白IκBα明显降解;应用PTL干预后,MC增殖、MCP-1表达和NF-κB活性均明显降低,IκBα降解被抑制。结论 PTL能抑制高糖诱导的肾小球MC NF-κB活化及MCP-1的表达,从而为PTL用于临床防治糖尿病肾病提供了一定的理论依据。

ROS在小白菊内酯诱导MM细胞凋亡中的作用

目的研究倍半萜内酯小白菊内酯(parthenolide,PL)对多发性骨髓瘤原代细胞和细胞株诱导的凋亡作用及其机制。方法以多发性骨髓瘤原代细胞及细胞株为研究对象,利用台盼蓝染色检测细胞存活率,用DAPI染色法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测反应氧(ROS)和线粒体膜电位水平变化。结果2.5μmol.L-1PL引起多发性骨髓瘤(multi-ple myeloma,MM)细胞明显凋亡及线粒体膜电位下降,而正常淋巴细胞在同等条件下不受影响。用2.5μmol.L-1PL作用10 h后,KMM-1和MM1S细胞ROS水平明显增加。用自由基清除剂L-N-乙酰半胱氨酸(L-NAC)预处理可抑制ROS的产生,对两种细胞存活率、凋亡率无影响。用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂二亚苯基烟碱氯化物(diphenylene iodonium chloride,DPI)预处理KMM-1和MM1S,可明显抑制PL介导的ROS的产生,并对两种细胞凋亡率无影响。结论PL诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡,而正常淋巴细胞在同等条件下不受影响。PL的凋亡活性是通过引起MM细胞氧化应激而介导的,并进一步推测NADPH氧化活性与PL介导的MM细胞ROS的产生相关。

小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2增殖、凋亡、迁移的影响及机制探讨

目的观察小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2细胞增殖、凋亡、迁移的影响。方法实验组将2.5、5、10、20、40μg/mL的小白菊内酯分别作用于HepG-2细胞,对照组不加小白菊内酯干预。测算HepG-2细胞生长抑制率,荧光显微镜下观察细胞形态学改变;用流式细胞仪技术检测小白菊内酯作用前后细胞周期的改变和细胞凋亡情况;用细胞划痕实验的方法检测小白菊内酯对细胞迁移的影响。结果小白菊内酯作用HepG-2后细胞增殖被抑制,随着小白菊内酯浓度逐渐增加和作用时间的延长,HepG-2细胞生长抑制率上升(P均<0.05);5μg/L的小白菊内酯作用48 h后可见细胞呈明显的细胞形态学改变,胞质减少、细胞核染色质固缩,出现凋亡小体;实验组与对照组G0/G1期细胞所占比例分别为73.36%±9.13%、59.28%±8.37%,S期所占比例分别为18.34%±6.09%、27.36%±4.26%,G2/M期所占比例分别为9.36%±2.98%、14.30%±3.07%,凋亡率分别为27.45%±4.15%、0.56%±0.72%,两组比较,P<0.05。实验组细胞迁移能力明显弱于对照组(P<0.05)。结论小白菊内酯通过将细胞阻滞在G0/G1期而抑制HepG-2细胞增殖并诱导其凋亡;小白菊内酯对HepG-2细胞有明显的抗迁移作用。

小白菊内酯增强4-HPR诱导肿瘤细胞凋亡

目的:探讨NF-κB在4-HPR诱导人肝癌细胞凋亡中的作用及小白菊内酯对4-HPR诱导凋亡的影响。方法:采用TUNEL染色、流式细胞仪、电泳迁移率变动分析(EMSA)技术,在肝癌细胞Hep-3B和SK-Hep-1中,观察4-HPR引起细胞凋亡过程中NF-κB活性的变化,小白菊内酯对4-HPR诱导细胞凋亡的影响及作用靶点。结果:通过TUNEL染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,小白菊内酯明显增强4-HPR诱导肝癌细胞Hep-3B和SK-Hep-1凋亡。EMSA实验表明小白菊内酯能抑制NF-κB的活性。结论:小白菊内酯抑制NF-κB活性,增强4-HPR诱导的肿瘤细胞凋亡。

小白菊内酯对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用

目的:探讨小白菊内酯在帕金森病小鼠模型中抑制核因子NF-κB(nuclear factor kappa B)信号通路对多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法:将C57BL/6N小鼠随机分为模型组、干预组和对照组。通过行为学、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、核因子NF-κB、环氧合酶-2(COX-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达变化情况。结果:与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,TH阳性神经元明显丢失、蛋白水平下降,NF-κB、COX-2和caspase-3阳性细胞大量表达,蛋白水平显著升高(P<0.01)。抑制剂组小鼠上述变化明显减轻(P<0.01)。结论:在MPTP所致PD模型小鼠中,小白菊内酯通过抑制核因子NF-κB信号通路减少凋亡蛋白caspase-3表达,从而发挥神经保护作用。