神经干细胞移植对老年痴呆模型鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元和学习记忆能力的影响

目的:基底前脑是老年性痴呆患者脑皮质下神经元丢失最严重的区域,实验拟验证经神经干细胞移植治疗后老年痴呆鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元的变化以及对其空间学习记忆能力方面的影响。方法:实验于2005-12/2006-07在广州医学院解剖学教研室完成。①动物:清洁级SD雄性大鼠28只,随机数字表法分为3组:正常对照组8只、模型对照组8只、细胞移植组12只。另取10只新生SD鼠用于神经干细胞的分离培养。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:模型对照组、细胞移植组大鼠切断左侧穹隆海马伞,建立老年性痴呆动物模型。利用无血清培养技术获得鼠基底前脑神经干细胞,吸取2.5×1010L-1细胞悬液4μL,术后即刻细胞移植组损伤侧行细胞移植,坐标为前囟+0.6mm,外侧+0.6mm插入,腹侧-5.5mm。③实验评估:移植后4周,采用Y型迷宫对各组动物进行学习记忆能力检测。麻醉后取脑制备组织切片,ABC法免疫组化染色结合图像分析观察各组大鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元的变化。结果:①对空间学习记忆能力的影响:细胞移植组空间学习能力、记忆能力均显著高于模型对照组(P<0.05或P<0.01),基本达到正常水平(P>0.05)。②对小白蛋白阳性神经元的影响:与正常对照组比较,模型对照组损伤侧内侧隔核和斜角带核的小白蛋白阳性神经元数目分别减少62.5%和30.4%;细胞移植组降低幅度明显小于模型对照组(P<0.01)。与正常对照组比较,模型对照组损伤侧内侧隔核、斜角带核小白蛋白阳性神经元的面积、周长、灰度均显著降低(P<0.05或0.01);细胞移植组上述指标较模型对照组均显著增加(P<0.05或0.01)。③相关性分析:小白蛋白阳性神经元数目与大鼠在Y型迷宫中的学习次数呈显著负相关(r=-0.76^-0.79,P<0.01),与记忆能力呈显著正相关(r=0.78~0.84,P<0.01)。结论:神经干细胞移植对老年性痴呆模型鼠基底前脑退变的小白蛋白阳性神经元具有补充和保护作用,并能够明显改善其学习记忆能力,二者呈正性相关。

大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中小白蛋白样阳性神经元的分布与发育(英文)

应用免疫组织化学技术对脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PV样阳性神经元的分布与发育进行了观察。结果发现 :①早在胚胎 13d时 ,首先在三叉神经中脑核 (Vme)内观察到许多含小白蛋白 (Parvalbumin ,PV)样阳性神经元 ,主要为大的假单极神经元 ,呈中等阳性反应。②生后 3d时 ,Vme内PV样阳性神经元的数量明显增多 ,免疫反应呈强阳性 ,并可观察到Probst束呈强阳性反应。③生后 10d时 ,在三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部 (Vodm)及三叉神经感觉主核背内侧部 (Vpdm)均出现少量中等强度的PV样阳性神经元。④生后 14d时 ,三叉神经脊束核吻侧亚核邻接的外侧网状结构 (LRF) ,三叉上核尾外侧部 (Vsup CL) ,三叉神经运动核腹侧区 (AVM )及上橄榄核背侧区 (ADO)均出现PV样阳性神经元。⑤生后 2 1d时 ,Vodm和LRF(Vodm -LRF)区、“带状区”包括Vpdm ,Vsup CL ,ADO ,AVM及Probst束内的PV样阳性神经元及纤维的分布均达成年大鼠水平。上述结果表明 ,大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PV样阳性神经元的分布。