小眼畸形相关转录因子转录调控与白癜风临床类型的相关性研究

目的研究小眼畸形相关转录因子(MITF)及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白(TRPs)与白癜风临床类型的相关性。方法选择非节段型白癜风(NSV)17例和节段型白癜风(SV)13例,对所有病例均取白斑区、远离白斑正常肤色区的表皮片,首先应用免疫组织化学方法原位检测黑素细胞的MITF及其主要转录调控分子酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TYRP2)的表达情况,并对所有30例远离白斑正常肤色区的表皮黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测培养的黑素细胞MITF及TYR、TYRP1和TYRP2的表达情况。结果 (1)原位表达结果:白斑区:所有病例MITF及TYR、TYRP1和TYRP2的表达均为阴性;正常肤色区:SV的MITF表达显著抑制,与NSV及正常人对比均具有统计学差异(P<0.05),NSV的MITF、NSV与SV的TYR、TYRP1和TYRP2表达与正常人对比均没有统计学差异(P>0.05)。(2)培养黑素细胞的蛋白表达结果:NSV的TYRP2表达下调,与正常人对比具有统计学差异(P<0.05),而MITF、TYR和TYRP1表达正常;SV的MITF与NSV及正常人对比均具有统计学差异(P<0.05),而TYR、TYRP1和TYRP2正常表达。结论 NSV和SV可能存在不同的MITF转录调控机制。

小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用

背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳朵、免疫系统、黑色素瘤,特别是骨骼和皮肤。目的:文章介绍MITF基因位点的发现与克隆,综述了MITF上调与破骨细胞活性相关的基因的表达和通过细胞融合调节破骨细胞的发育,敲除MITF后抑制破骨细胞的分化以及MITF及其信号通路在破骨细胞的分化中的作用。方法:作者以“MITF、骨破坏、破骨细胞、成骨细胞、小眼畸形相关转录因子、组织蛋白酶K、核因子κB、核因子κB配体”为关键词,检索2000年至2018年中国知网数据库和PubMed数据库中相关文献,并将这些文献进行筛选与总结。结果与结论:最终纳入文献43篇。①MITF对于多种细胞系的分化是必不可少的,并且通过与谱系特异性辅因子的相互作用以及其对特定信号级联的响应而获得其特异性;②MITF在破骨细胞的分化过程中发挥了重要的作用,其能够促进骨破坏;③研究MITF在骨破坏中的作用机制以及骨微环境的改变,可以成为治疗这一系列骨破坏疾病的关键靶点。

肥大细胞小眼畸形相关转录因子的研究进展

小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是调节基因表达的转录因子。MITF基因主要在黑素细胞[1]、视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelial cells,RPE)[2]、破骨细胞[3]和肥大细胞(Mast cell,MC)[4]中表达。MITF调控的生物过程的范围很广,包括细胞分化、存活、增殖、侵袭、衰老、代谢等[5],肥大细胞的生理功能离不开MITF。

白癜风表皮黑素细胞超微结构及小眼畸形相关转录因子转录调控研究

目的 研究白癜风黑素细胞超微结构和小眼畸形相关转录因子（MITF）及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白（TRP）与白癜风临床类型与病程的相关性.方法 选择不同病程的寻常型白癜风（VV）12例和节段型白癜风（SV）8例,分别取白斑区、白斑边缘正常肤色区和远离白斑正常肤色区的表皮片,经组织学确定其表皮的完整性.透射电镜观察10例患者（VV 6例,SV 4例）不同区表皮黑素细胞的超微结构特点.对所有20例远离白斑正常肤色区的表皮片黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测MITF及其转录调控的酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）和酪氨酸酶相关蛋白2（TYRP2）的表达水平.结果 白癜风表皮黑素细胞超微结构病理改变：10例中7例白斑区表皮内未见黑素细胞,1例短病程和2例长病程VV分别可见少量黑素体显著减少或缺失的黑素细胞;白斑边缘正常肤色区,6例VV中,3例病程小于15个月者可见黑素细胞超微结构异常,而4例SV中仅1例异常;远离白斑正常肤色区,10例黑素细胞超微结构均正常.白癜风表皮黑素细胞MITF及其转录调控TRP的表达：VV的MITF表达下调与TYR、TYRP1、TYRP2的表达下调一致;SV存在MITF显著表达下调.而TYR、TYRP1、TYRP2几均正常表达.结论 VV和SV可能存在不同的表皮黑素细胞超微结构病理改变和MITF转录调控机制.

小眼畸形相关转录因子在黑色素瘤转移中的作用

小眼畸形相关转录因子（MITF）一直是近几年黑色素瘤细胞研究中的热点.异常表达的MITF与黑色素瘤的发生和转移密切相关,且MITF低表达能促进黑色素瘤细胞的侵袭.研究MITF及与其相关的分子和信号通路的调节关系,将进一步加深对恶性黑色素瘤转移分子机制的理解,为开发新的分子靶向药物提供帮助.

喉癌及癌旁组织小眼畸形相关转录因子基因表达及临床意义

目的分析喉癌及癌旁组织中小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-asociated transcription factor,MITF)mRNA的表达情况,推测其临床意义。方法收集2014年3月至2016年6月南京鼓楼医院耳鼻咽喉头颈外科就诊的33例患者喉癌及癌旁新鲜组织标本,提取组织RNA,采用qPCR的方法检测MITF mRNA表达情况,收集患者的临床病理资料进行统计分析。结果喉癌组织中MITF mRNA的ΔCt值(10.01±4.61)高于相应的癌旁组织(7.64±6.57),MITF在喉癌中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.016)。喉癌组织中的MITF基因表达在不同年龄(P=0.259)、不同T分期(P=0.118)、是否淋巴结转移(P=1.000)、不同肿瘤部位(P=0.079)、不同分化程度(P=0.481)之间无统计学差异。但MITF mRNA在晚期(Ⅲ和Ⅳ期)喉癌患者中的表达明显高于早期(Ⅰ和Ⅱ期),差异有统计学意义(P=0.039)。33例喉癌组织中MITF低表达患者的中位总生存期为29个月(12~52个月),高表达患者的中位总生存期为30个月(8~56个月),低表达与高表达患者中位总生存期差异无统计学意义(χ^2=1.594,P=0.207)。结论喉癌组织中MITF mRNA表达较癌旁组织高,且MITF mRNA在晚期喉癌患者组织中的表达高于早期患者,MITF基因的表达可能与喉癌的发生发展相关。

小眼畸形相关转录因子基因表达调控及其相关疾病致病机制研究进展

小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是一种具有碱性螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链结构的转录因子,它在神经嵴源性黑素细胞的生存、增殖和分化以及黑色素的合成、转运和分布过程中起着至关重要的作用。MITF基因突变会影响黑素细胞的功能,从而导致与黑色素相关的疾病。了解MITF对黑素细胞的作用机制可为这些疾病的治疗提供一些线索。本文就MITF基因的表达调控、对黑素细胞的调控作用以及其导致Waardenburg综合征的机制做一综述。

小眼畸形转录因子家族相关性肾细胞癌四例并文献复习

目的探讨小眼畸形转录因子（MiTF）家族相关性肾细胞癌的临床和病理特征、诊断和治疗。方法回顾性分析2016年1月至12月收治的4例MiTF家族相关性肾细胞癌，并结合文献对该病的影像学、病理特征及免疫组织化学结果进行总结。结果4例患者中，3例因无痛性肉眼血尿就诊，入院后常规体检及相应的辅助检查后考虑为肾占位，行根治性肾切除术，术后免疫组织化学确诊为Xp11.2易位/TFE3融合基因相关性肾细胞癌；另1例因糖尿病16年常规体检发现肾占位就诊，入院后检查考虑为肾下极占位，行肾下极部分切除术，术后免疫组织化学确诊为t（6；11）（p21；q12）/TFEB融合基因相关性肾细胞癌。 结论MiTF家族相关性肾细胞癌是一种临床较为少见的易位性肾癌，临床表现与其他类型的肾癌非常相似，确诊需依赖病理检查及免疫组织化学结果，目前根治性手术切除是其主要的治疗方法，预后需密切观察。

小眼畸形转录因子基因家族相关肿瘤的分子病理研究进展

小眼畸形转录因子（microphthalmia-associated transcription factor，MiTF）位于3号染色体短臂（3p），是一种具有基本螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链（bHLHZip）结构的转录因子[1]。研究表明MiTF在结构上与TFE3、TFEB和TFEC最接近。

紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响

目的探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响。方法建立A375细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0μg/L)。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平。结果与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1期细胞比例均显著降低,S期和G_(2)/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论紫铆花素可能通过调节SCF,cKit,MITF的表达而影响A375细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性。

黑素合成相关MITF基因及其表达研究概况

小眼畸形相关转录因子(MITF)是黑素合成过程中最重要的转录因子。介绍了MITF基因及其转录水平的调控;综述了MITF蛋白及其对黑素细胞作用和黑素合成的调控,其主要通过调控酪氨酸酶(TYR)基因家族来控制黑素细胞的生存和分化以及黑素的合成、转运和分布;介绍了MITF在化妆品、医学方面的应用研究现状,并对其在该领域的应用和研究趋势进行了展望。

橘色双冠丽鱼体色相关基因mitf的结构及表达调控特性

为了解小眼畸形相关转录因子mitf基因在鱼类早期体色褪黑过程中的调控作用,本研究采用c DNA末端快速扩增(RACE)技术获得橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)mitf基因c DNA序列全长,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其在橘色双冠丽鱼胚胎不同发育时期、体色褪黑不同时期和各个组织中的表达规律。获得mitf基因2个亚型,其中,mitf1的cDNA全长为1816bp,包括5’非编码区(UTR)158 bp、3’UTR 428 bp、开放阅读框(ORF)1230 bp,共编码409个氨基酸;mitf2的c DNA全长为1638 bp,包括5’UTR 160 bp、3’UTR 428 bp和ORF 1050 bp,共编码349个氨基酸。同源性和系统进化分析显示,mitf1和mitf2聚在一小支,与慈鲷科(Cichlidae)鱼类同源性最高,与哺乳类动物同源性较低。qRT-PCR结果显示,在成鱼各个组织中,mitf1和mitf2均有不同程度表达,其中,眼部表达量最高且显著高于其他组织(P<0.05),肌肉、脑和肾脏也有较高表达;mitf1和mitf2在胚胎各个发育时期均有表达,在受精卵时期表达量最高,显著高于其他胚胎期;随着橘色双冠丽鱼体色由黑色过渡到橘黄色,mitf1和mitf2在鱼皮肤、鳞片、尾鳍中的表达均呈逐渐下降的趋势,表明mitf基因表达与鱼体色由黑到黄转变的表型间存在关联性,推测与鱼体色发育阶段色素细胞的分化和分布比例的动态变化相关。本研究通过了解鱼类体色发育和变异的分子基础,可为鱼类色素细胞发育和体色人工改良积累资料。

小鼠毛囊不同生长周期中MITF下游色素相关基因的定位表达及相关性分析

小眼畸形转录因子(MITF)不仅是黑色素细胞发育、增殖和存活的必要调节因子,而且对调节相关酶和黑素体蛋白表达来确保黑色素产生具有至关重要的作用。MITF下游色素相关基因在小鼠毛囊生长周期中的表达及相关性仍有待研究。HE染色结果表明不同毛囊时期的小鼠毛囊呈现典型的组织形态学结构;免疫组织化学显示,MITF、GPNMB、OA1、TYR、TYRP2在不同毛囊生长周期中的毛基质及内外毛根鞘均有不同程度的阳性表达。黑色素测定结果表明,在毛囊生长初期和中期,碱性可溶性总黑色素(ASM)、真黑素(EM)以及褐黑素(PM)相对含量高于毛囊生长末期。蛋白免疫印迹结果表明,MITF、GPNMB、OA1、TYR、TYRP2在毛囊生长初期和中期蛋白质相对水平明显高于毛囊生长末期。实时荧光定量PCR结果表明,MITF、GPNMB、OA1、TYR、TYRP2、PMEL在毛囊生长初期和中期,mRNA相对表达量显著高于毛囊生长末期。在不同毛囊生长周期小鼠皮肤的MITF下游色素相关基因表达存在显著差异,表明上述因子在维持黑色素细胞色素生成是不可或缺的因素。

IRF4与MITF协同作用于络氨酸酶启动子的相关机制

目的:探索干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)与小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)协同作用激活络氨酸酶(tyrosinase,T YR)启动子的作用机制。方法:利用荧光素酶检测、细胞免疫荧光蛋白定位、GST融合蛋白沉降技术(GST-pull down)、免疫共沉淀等多种体外细胞实验学方法,观察IRF4与MITF的协同转录激活效应、亚细胞定位和蛋白-蛋白相互作用情况。结果:IRF4与MITF蛋白共同表达于细胞核;IRF4可以增强MITF在TYR启动子上的转录激活作用,产生协同效应,而在其他MITF目标启动子上不产生;IRF4不能单独激活TYR启动子,且与丧失功能的MITF突变蛋白在TYR启动子上不能产生协同作用;两个蛋白之间无直接相互作用。结论:IRF4与MITF在TYR启动子上产生协同作用,该效应主要依靠MITF进行调节;两个蛋白之间的相互作用可能需要DNA参与。

PAX3对靶基因MITF转录活性调控的实验研究

目的探讨配对盒基因(pair box 3,PAX3)突变对小眼球畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因转录活性的影响及其在I型Waardenburg综合征(Waardenburg syndrome,WS)发病中的作用。方法野生型PAX3及其致病突变H80D和H186fsX5表达质粒瞬时转染293T细胞,应用荧光素酶活性检测系统对MITF报告基因活性检测,观察野生/突变PAX3蛋白对其靶基因MITF转录活性的调控作用及二个突变蛋白对野生PAX3蛋白功能的影响;应用生物素标记的含序列attaat的DNA寡核苷酸链探针分别沉淀PAX3、H80D和H186fsX5蛋白,检测野生/突变PAX3蛋白与靶基因MITF启动子的结合力。结果尽管H80D蛋白仍残余部分功能可增加MITF启动子转录活性,但与野生PAX3蛋白相比,二者差异有显著统计学意义(P<0.01),而H186fsX5蛋白则完全失去调控MITF启动子转录活性作用(P<0.01);二者均未对野生PAX3蛋白功能产生显性负效应作用(P>0.05)。突变H80D蛋白与野生PAX3蛋白均可与MITF启动子特异DNA序列attaat结合,而突变H186fsX5蛋白则不能与之结合。结论 H80D和H186fsX5影响靶基因MITF转录活性,使其表达下调、黑色素合成减少,以单倍体剂量不足效应致I型WS。

MicroRNA-100-5p通过成纤维生长因子21靶向调控羊驼黑素细胞的黑色素生成

目前已知许多microRNA(miRNA)可以调节动物毛色及黑色素生成,但miR-100-5p调节黑色素的分子机制尚未完全了解。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)是miR-100-5p的预测靶基因,萤光素酶报告基因检测结果表明,miR-100-5p通过与FGF21的3′非翻译区(3′UTR)结合来调节FGF21。在本研究中,用miR-100-5p过表达质粒和阴性对照质粒转染羊驼黑素细胞,结果表明,miR-100-5p过表达显著降低FGF21的mRNA和蛋白质表达。同时,抑制细胞外调控MAP激酶(extracellular regulated MAP kinase,ERK)信号通路,上调小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)和酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-related protein 2,TYRP2),从而增加了黑色素的产生。结果表明,miR-100-5p可能通过ERK信号通路靶向FGF21,从而调节黑色素生成。

小眼畸形转录因子和c-Met及组织蛋白酶-K在黑色素病变中的表达及意义

目的探讨小眼畸形转录因子(microphthalmia transcription factor,MITF)、c-Met和组织蛋白酶-K(cathepsin-K)在恶性黑色素瘤、痣和非典型性痣中的表达及意义。方法 32例恶性黑色素瘤(恶黑组)、13例普通痣患者(普通痣组)和6例非典型性痣患者(非典型痣组)的组织标本,采用免疫组织化学法检测3组组织中MITF、c-Met和cathepsin-K的表达情况。结果 MITF、c-Met表达于黑色素细胞的细胞核和细胞质,cathepsin-K表达于细胞质和细胞膜;MITF、c-Met和cathepsin-K阳性表达率恶黑组分别为93.8%、90.6%和93.8%,普通痣组分别为92.3%、92.3%和100.0%,非典型痣组分别为100.0%、100.0%和100.0%,3组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);恶黑组MITF()、c-Met()及cathepsin-K()阳性率高于普通痣组和非典型痣组(P<0.05);恶黑组转移者MITF、c-Met及cathepsin-K阳性率明显高于非转移者(P<0.05),结节性恶性黑色素瘤者MITF、c-Met及cathepsin-K阳性率高于表浅扩散性恶性黑色素瘤者(P<0.05);恶黑组转移者MITF、c-Met及cathepsin-K阳性率均为100%,高于HMB-45阳性率(75.0%)(P<0.05)。结论 MITF、c-Met及cathepsin-K对恶性黑色素瘤的诊断及评估其进展和生物学行为有重要价值。

小眼畸形转录因子家族在肿瘤发生中的作用机制

小眼畸形转录因子家族（MiT/TFE）能够广泛调节肿瘤细胞增殖及能量代谢。该家族可以通过溶酶体相关基因的上调以及作用于氧化代谢及氧化应激反应这样的特异性靶点促进肿瘤的发生及发展。此外，MiT/TFE可以调节溶酶体的信号传导，其中包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTORC1）通路和Wnt/βcatenin通路。而MiT/TFE和促卵泡激素基因（FLCN）的关系同样和肿瘤的进展密切相关。

小眼畸形转录因子基因家族易位性肾癌及间叶性肿瘤的新认识

小眼畸形转录因子基因家族包括了小眼畸形转录因子（MiTF）、TFE3、TFEB和TFEC。基因家族易位性肾癌包括Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌和新增的t（6；11）（p21.2；q13）/MALAT1-TFEB基因融合相关性肾癌。小眼畸形转录因子基因家族易位性肾癌根据易位的靶基因不同，分为多种不同亚型，其形态学、免疫表型及预后具有差异，并各具特征。随着不断地深入研究，其基因谱也在不断壮大，对不同亚型的认识也在不断更新，一些亚型形态学上极具特征，而由于罕见，WHO也未给出描述，使诊断变得困难。此外，近年来关于小眼畸形转录因子基因家族易位的间叶源性肿瘤的报道逐渐增多，然而其命名却不尽相同，容易引起困惑。为此我们对此类肿瘤进行梳理和概括，并阐述我们对小眼畸形转录因子基因家族易位性肾癌及间叶性肿瘤的理解和认识。