小米米糠蛋白的等电点分析

采用盐析法对脱脂小米米糠进行蛋白质提取。结果表明,米糠蛋白质的最佳提取条件为柠檬酸钠饱和度80%,pH值4,温度45℃,上清液浓缩倍数4,蛋白质得率达87.52%。分离得到的蛋白采用碱溶酸沉法测小米米糠蛋白的等电点为3.5。

小米米糠中抗癌细胞增殖活性蛋白的分离纯化

采用丙酮沉淀、硫酸铵沉淀、Q阴离子交换柱、SP阳离子交换柱、蛋白热变性法对小米米糠蛋白进行逐步分离纯化,并结合细胞增殖抑制实验(MTT法),筛选纯化出小米米糠中抗肿瘤活性蛋白(FMB)。体外抗肿瘤活性实验表明:不同质量浓度(0.025、0.05、0.075、0.1μg/μL)的FMB均可抑制人结肠癌细胞株DLD1和人宫颈癌细胞株HeLa的增殖,并且具有明显的剂量依赖性;而对正常人肝细胞HL-7702无明显抑制作用。倒置显微镜下观察细胞形态特征发现:经FMB处理48h后,DLD1和HeLa细胞出现细胞核明显皱缩、部分细胞漂浮死亡等凋亡特征;而对正常肝细胞株HL-7702无明显影响。