小续命汤有效成分组对局灶性脑缺血/再灌注大鼠恢复早期的神经保护作用研究

目的观察小续命汤有效成分组对局灶性脑缺血／再灌注大鼠恢复早期的神经保护作用。方法选用健康♂ SD大鼠，采用插线法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血／再灌注（ MCAO）模型，缺血2 h后实现再灌注。应用Zea-Longa′s级标准评分法评价动物脑缺血程度，将造模成功的大鼠随机分为模型组、小续命汤有效成分低、中、高剂量组和阳性药银杏叶提取物EGb 761组，以假手术大鼠作为对照组，术后1～14 d灌胃给药，每日1次。通过Zea-Longa′s级标准评分、改良神经功能缺损评分（ mNSS ）和转角实验（ CT ）等系列行为学评价手段，评测小续命汤有效成分组对局灶性脑缺血／再灌注大鼠不同恢复时期行为学的变化，每天1次，连续测定14 d；选用TTC染色法观察大鼠脑梗死体积百分比；采用分光光度法检测大鼠脑缺血半暗带和缺血核心区脑组织中脂质过氧化物丙二醛（ MDA）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH-Px）、超氧化物歧化酶（ SOD）、一氧化氮合酶（ NOS）活性的变化。结果随着给药时间延长，与模型组相比，小续命汤有效成分组能够有效降低MCAO大鼠神经功能缺损评分，表现为MCAO大鼠行走趋于正常，平衡木上停留时间增长，感觉功能恢复，转角实验中MCAO大鼠向右转向的比率逐渐接近正常。自给药5d起，与模型组相比，小续命汤有效成分组开始明显改善MCAO大鼠上述神经行为学表现，差异具有显著性（P＜0.05，P＜0.01）。并且小续命汤有效成分组能够明显降低术后5 d和14 d MCAO大鼠脑组织梗死体积百分比（ P＜0.01）。此外，小续命汤有效成分组能够明显减少MCAO大鼠缺血半暗带和核心区脑匀浆的MDA含量和降低NOS活力，提高SOD和GSH-Px活力。结论小续命汤有效成分组对局灶性脑缺血／再灌注大鼠损伤恢复早期即产生神经保护作用，可能与调节脑内氧化－抗氧化平衡有关。

基于UPLC/Q-TOF-MS^E分析小续命汤有效成分组的化学成分

目的:快速阐明中药复方小续命汤的化学组成。方法:利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF-MSE)对小续命汤有效成分组进行了快速分析和成分鉴定。液相条件:Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,流速0.35 m L·min-1;质谱条件:采用ESI源,正、负离子模式下分别进行数据采集。结果:通过与对照品信息的提取辨识、与数据库数据的匹配指认以及对文献资料的比照分析,从小续命汤有效成分组中鉴定了42个化合物,主要包括黄酮、生物碱、三萜皂苷等类成分,并归属了各化合物的单味中药来源。结论:本研究比较全面地阐明了小续命汤有效成分组的化学组成,为此中药复方的质量控制提供参考,也为其深入的药效物质基础及药理作用研究奠定了基础。

小续命汤有效成分组对脑缺血/再灌注大鼠恢复早期脑线粒体的保护作用研究

观察小续命汤有效成分组对脑缺血/再灌注大鼠恢复早期脑线粒体的作用,研究其对脑缺血/再灌注大鼠恢复早期的神经保护作用机制。采取插线法制备大鼠大脑中动脉阻塞脑缺血模型,2 h后再灌注。应用Zea-Longa's级标准评分法评价动物脑缺血程度,将模型成功大鼠随机分为模型组、小续命汤有效成分低、中、高剂量组和阳性药金纳多组,以假手术大鼠作为对照组。于给药5 d后梯度离心提取大鼠脑组织缺血周边区线粒体,通过Clark氧电极法检测线粒体呼吸功能,荧光探针法检测线粒体内ROS含量及线粒体膜电位,分光光度法检测线粒体琥珀酸脱氢酶活性和脑组织ATP含量。结果显示,小续命汤有效成分组能够显著改善脑缺血再灌注大鼠恢复早期脑线粒体的呼吸功能,提高线粒体琥珀酸脱氢酶的活性,降低线粒体ROS的含量,提高脑线粒体膜电位,促进脑组织ATP的合成。提示小续命汤有效成分组能够明显减轻脑缺血再灌注早期导致的脑组织能量代谢紊乱,改善脑线粒体结构和功能损伤,说明小续命汤有效成分组对脑线粒体的保护作用可能是其发挥神经保护的作用机制之一。