肝癌细胞系中circAMOTL1的表达及对肝前体细胞增殖和恶性转化的影响

目的探讨环状RNA circAMOTL1在肝癌细胞系中的表达及其对肝前体细胞(HPCs)系WB-F344的增殖迁移及恶性转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR检测circAMOTL1在5种肝癌细胞系和正常肝细胞系L-02以及HPCs系WB-F344中的表达;同时构建过表达和敲除circAMOTL1的WB-F344的细胞系;通过CCK-8实验检测过表达或敲除cAMOTL1后HPCs的增殖变化;细胞划痕实验验证细胞迁移的变化;通过蛋白免疫印迹实验验证过表达或敲除circAMOTL1后对肝癌干细胞(LCSCs)标志物CD133的表达影响。结果5种肝癌细胞系中circAMOTL1的表达水平均高于L-02(P<0.05);过表达circAMOTL1后HPCs的增殖能力显著提高(P<0.01),敲除circAMOTL1后细胞的增殖能力显著下降(P<0.001);过表达circAMOTL1后显著提升了细胞的迁移能力(P<0.01),敲除后细胞的迁移能力明显下降(P<0.01);过表达circAMOTL1后可以检测到CD133的表达。结论circAMOTL1在5种肝癌细胞系中高表达,过表达circAMOTL1可以促进HPCs的增殖和迁移能力,诱导其向LCSCs方向恶性转化。

术前误诊为肝细胞癌的肝脏上皮样血管平滑肌脂肪瘤1例

上皮样血管平滑肌脂肪瘤(epithelioid angiomyolipoma,EAML)是一种来源于间叶组织具有恶性潜能的肿瘤,肾脏好发,而在肝脏及其他器官少见[1]。肝脏上皮样血管平滑肌脂肪瘤(hepatic epithelioid angiomyolipoma,HEAML),与富含脂肪的血管平滑肌脂肪瘤不同,因其缺乏特征性的临床表现及实验室检查指标,且影像学表现多样,给术前明确诊断带来一定困难[2]。

肝干/前体细胞治疗失代偿期肝硬化研究进展

随着生物技术和再生医学的发展,细胞药物逐渐从动物实验发展到早期临床试验,并初步显现了一定的治疗有效性,有望成为治疗失代偿期肝硬化的新兴手段。本文主要对肝干/前体细胞在肝硬化进程中活化及其机制,以及在治疗失代偿期肝硬化中的应用进行综述。

益脾养肝方对肝癌前病变大鼠肝星状细胞活化的影响

目的探讨益脾养肝方对二乙基亚硝胺(Diethylnitrosamine,DEN)诱导的肝癌前病变中肝星状细胞活化及胶原沉积的影响。方法将26只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、益脾养肝方组和护肝片组,空白组5只,其余3组各7只。腹腔注射DEN诱导肝癌前病变模型,给药14 w后处死。取肝组织观察并记录其大小、外观等变化,计算肝重比(肝脏指数),通过HE染色观察大鼠肝组织病理形态学改变,天狼星红染色观察各组胶原沉积表达,免疫组化检测α-平滑肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)的表达,实时定量PCR(Real Time PCR,RT-PCR)检测Ⅰ型胶原蛋白(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)的表达,以研究益脾养肝方对大鼠肝癌前病变模型的影响。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与模型组相比,益脾养肝方组和护肝片组肝脏病理形态显著改善,肝脏指数、CollagenⅠ和α-SMA表达均降低(P值均<0.05);与护肝片组相比,益脾养肝方组对肝脏的保护作用更显著,其肝脏指数、CollagenⅠ和α-SMA表达均显著降低(P值均<0.05)。结论益脾养肝方可有效改善DEN诱导的大鼠肝癌前病变,其机制可能与抑制肝星状细胞活化,减少胶原沉积有关。

术前口服营养补充护理方案在原发性肝细胞癌患者中的应用

目的探讨术前口服营养补充护理方案在原发性肝细胞癌患者中的应用效果。方法选取2022年9月-2023年10月我院接受手术治疗的原发性肝细胞癌患者96例为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组,各48例。对照组给予常规营养护理,观察组在对照组的基础上给予术前口服营养补充护理。比较两组术前及术后7d营养指标、免疫水平、炎症应激水平,术后恢复状况及并发症发生率。结果两组术后7d血清总蛋白(TP)、前白蛋白(PA)、血红蛋白(HB),CD8^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均升高,IgM、IgG、IgA,肿瘤坏死因子(TNF-a)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)水平均降低,且观察组各项指标均优于对照组(P<0.05);观察组早期进食时间、第一次肛门排气及排便时间均短于对照组(P<0.05);观察组并发症发生率低于对照组(P<0.05)。结论术前口服营养补充护理方案可显著提高原发性肝细胞癌患者术后营养水平及免疫功能水平,降低炎症应激水平,促进患者康复。

AlkB同源蛋白5去除前mRNA加工因子6的mRNA甲基化修饰调控肝细胞癌的细胞增殖

目的探讨AlkB同源蛋白5(AlkBhomolog5,ALKBH5)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的细胞增殖中的作用。方法通过癌症基因组图谱数据库分析ALKBH5和前mRNA加工因子6(pre-mRNA processing factor 6,PRPF6)在HCC组织中的表达水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测ALKBH5和PRPF6在HCC细胞系(Huh7和Hep3B)中的mRNA和蛋白表达水平。荧光原位杂交确定ALKBH5和PRPF6在HCC细胞系(Huh7和Hep3B)中的亚细胞定位。在免疫沉淀复合物中检测PRPF6的N6-甲基腺苷甲基化水平。通过过表达和敲低基因表达的方法,将Huh7细胞和Hep3B细胞分别进行转染,分组为sh-NC组(阴性对照转染细胞)、sh-ALKBH5实验组(ALKBH5干扰序列转染细胞)、sh-ALKBH5+ex-PRPF6实验组(ALKBH5干扰序列转染+PRPF6 pcDNA 3.1过表达质粒转染细胞),并采用CCK-8和染色增殖试验检测各组细胞的增殖情况。裸鼠异种移植瘤实验验证ALKBH5和PRPF6在体内的生物学功能。蛋白质印迹法检测各组细胞中AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果HCC细胞中ALKBH5的表达上调,可以去除PRPF6的甲基化修饰。体外和体内实验结果显示,ALKBH5可通过调节PRPF6的表达参与HCC细胞的恶性增殖。此外,敲低ALKBH5会抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的磷酸化,而PRPF6的过表达则有助于AKT和mTOR的磷酸化。结论ALKBH5能促进HCC细胞的增殖,相关机制是通过ALKBH5/PRPF6/AKT/mTOR轴实现的。

术前外周血血小板/淋巴细胞比值在肝细胞癌术后微血管侵犯预测中的价值

目的探讨肝细胞癌(HCC)微血管侵犯(MVI)的危险因素及术前外周血血小板/淋巴细胞比值(PLR)在预测HCC术后发生MVI中的价值。方法回顾性分析西安交通大学第一附属医院2017年1月至2018年12月收治的166例行根治性切除术的HCC患者临床资料。将可能影响MVI的14个因素纳入分析,包括一般观察指标(性别、年龄、肝炎病史、是否患糖尿病)、实验室相关指标[D-二聚体、纤维蛋白原、血浆纤维蛋白(原)降解产物、血小板计数、甲胎蛋白、中性粒细胞/淋巴细胞比值、PLR]及肿瘤相关指标(是否合并门静脉癌栓、肿瘤分化程度、T分期)。结果单因素分析结果显示,术前PLR>150、是否合并门静脉癌栓、肿瘤分化程度、肿瘤T分期与HCC术后MVI的发生有相关性(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,术前PLR>150、肿瘤分化程度、T分期是HCC术后发生MVI的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)显示,肿瘤分化程度、T分期及PLR的AUC值分别为0.694、0.721、0.748,具有较好的MVI预测价值。结论本研究分析表明,术前PLR>150作为一个简单且易获得的炎性指标,可作为预测HCC患者根治性切除术后发生MVI的重要因素。

基于M1型巨噬细胞极化-慢性炎症-肝细胞恶变探究益脾养肝方治疗肝癌前病变作用机制

目的基于M1型巨噬细胞极化-慢性炎症-肝细胞恶变发展过程探究益脾养肝方治疗肝癌前病变大鼠的作用机制。方法90只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、护肝片组和益脾养肝方高、中、低剂量组,每组15只。空白组予蒸馏水腹腔注射,其余各组予二乙基亚硝胺腹腔注射诱导肝癌前病变模型,每周2次(50 mg/kg),连续16周。造模第2日起,益脾养肝方高、中、低剂量组分别予1.2、0.6、0.3 g/mL益脾养肝方灌胃,护肝片组予护肝片溶液921 mg/kg灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃,连续16周。观察肝脏外观,ELISA检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)含量,HE染色、Masson染色观察肝组织形态,免疫组化检测肝细胞恶变标志物OV6、细胞角蛋白19(CK19)、CD133和上皮细胞黏附分子(EpCAM)表达,qPCR检测肝组织CK19、CD133、EpCAM mRNA表达,免疫荧光共定位检测M1型巨噬细胞标志物CD68与IL-6和TNF-α共表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肝脏质硬,表面粗糙、边缘变钝,可见大量结节,血清ALT、AST、ALP、AFU、TNF-α、IL-6、i NOS、MCP-1含量明显升高(P<0.01),肝组织有大面积异型增生结节、炎性细胞浸润,胶原纤维增多,肝组织OV6、CK19、CD133、EpCAM表达显著升高,CD68与IL-6和TNF-α共表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肝脏结节减少且较小,血清ALT、AST、ALP、AFU、TNF-α、IL-6、iNOS、MCP-1含量均显著降低(P<0.01),肝细胞异型增生及炎性细胞浸润显著改善,胶原纤维减少,肝组织OV6、CK19、CD133、EpCAM表达显著降低,CD68与IL-6和TNF-α共表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论益脾养肝方可能通过抑制M1型巨噬细胞极化减轻炎症反应,改善肝细胞恶变,对二乙基亚硝胺诱导的肝癌前病变大鼠发挥治疗作用。

血清前白蛋白对TACE治疗不可切除肝细胞癌预后模型的建立与验证

目的 建立术前血清前白蛋白水平的预后诺模图,预测TACE治疗不可切除肝细胞癌(HCC)患者总体生存期(OS)。方法 将2007年1月至2018年12月在苏州5家医疗中心接受TACE治疗的1 041例不可切除HCC患者分为训练队列(n=768)和验证队列(n=273)。Cox回归分析影响HCC患者1、2、3年(OS)的独立因素。基于独立危险因素构建诺模图,并在内部测试序列进行了验证。通过C指数、接收器工作特性曲线下面积(AUC)、校准曲线和判决曲线分析(DCA)来评估诺模图的性能。结果 Cox回归分析显示,AFP、BCLC、HBV感染、肝内血管侵犯、肿瘤数目、前白蛋白、PS、肿瘤大小均为影响TACE治疗不可切除HCC患者OS的独立危险因素。诺模图中训练队列C指数为0.739 (95%CI:0.719~0.759),验证队列C指数为0.715(95%CI:0.678~0.752)。训练队列中1、2和3年OS的AUC分别为0.877、0.794、0.799;验证队列的1、2和3年OS的AUC分别为0.840、0.741、0.671。诺模图AUC均高于其他评分系统,显示该诺模图具有良好区分度。校准曲线提示该模型的预测结果与实际观测值之间存在良好的一致性。DCA显示该诺模图具有很高的潜在临床实用性。诺模图风险评分显示,低风险组的患者存活率显著高于高风险组。结论 基于术前前白蛋白水平的诺模图对TACE治疗不可切除HCC患者显示出良好的预测能力。

脾脏卡波西样血管内皮细胞瘤伴肝脏转移一例并文献复习

本文为回顾性研究,遵守《赫尔辛基宣言》,经过铜仁市人民医院伦理委员会批准,免除受试者知情同意,批准文号:202433。患者男,47岁,2020年4月因“上腹部疼痛10余天”就诊于铜仁市人民医院。体格检查:脾脏体积增大,肋下可及3 cm,质韧,表面光滑,有压痛。皮肤黏膜色泽正常,无皮疹及出血点。实验室检查:血小板79×109/L,肿瘤标记物阴性。腹部超声:脾脏增大,内见一混合回声团块,血流丰富,考虑血管瘤。

胃肝样腺癌肝转移超声误诊为肝细胞癌1例

1资料患者,男性,57岁,因“间断腹痛、腹胀10 d”于2022年3月入院,既往无肝炎及肝硬化病史。体格检查:右上腹膨隆,肝肋下可及,质硬,全腹无压痛,移动性浊音阴性。

芪术化积方治疗肝细胞癌癌前病变患者的随机对照研究

背景肝细胞癌(HCC)存在发病率高、死亡率高的特点,在癌前病变阶段进行早期诊断及时干预可有效降低HCC的发生率,对其防治具有显著意义。现代医学对于HCC癌前病变的治疗存在干预时机难以把握、治疗手段单一等问题,中医药防治HCC癌前病变或许是一种简单有效的新途径。目的观察芪术化积方治疗HCC癌前病变(肝郁脾虚、痰瘀互结证)的临床疗效及安全性。方法纳入2019年10月—2020年3月在山东中医药大学附属医院、威海市中医院、泰安市中医院肝病科门诊就医且符合中医证型“肝郁脾虚、痰瘀互结证”的HCC癌前病变初诊患者为研究对象。收集患者的一般资料[性别、年龄、乙型病毒性肝炎(HBV)后肝硬化史、HCC家族史、10年以上饮酒史],患者的中医证候积分、肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)]、肿瘤标志物指标[甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、异常凝血酶原(DCP)]、影像学指标(病灶类型、病灶性质、病灶长径)、安全性指标、不良反应。采用随机数字表法将符合纳入标准且完成研究的64例患者分为观察组(n=34)和对照组(n=30),对照组予以抗病毒、抗炎保肝等常规治疗;观察组予以常规治疗联合芪术化积方治疗。疗程为48周,停药后随访48周,观察两组患者治疗周期及随访周期中HCC发生率及并发症的发生情况,比较两组患者治疗前后中医证候改善指标(中医证候积分、总有效率)、肝功能指标、肿瘤标志物指标、影像学指标(病灶长径、病灶稳定率、病灶改善率)、安全性指标(安全率)的差异。结果治疗后两组中医证候积分、ALT、AST、TBIL、GGT、ALP、AFP-L3均低于治疗前,ALB水平高于治疗前(P<0.05);观察组患者治疗后的DCP值、病灶长径均低于治疗前(P<0.05)。组间比较结果显示,观察组中医证候积分、AST、ALP水平低于对照组,ALB水平高于对照组(P<0.05)。治疗周期结束后观察组的中医证候总有效率(91.2%)高于对照组(63.3%)(P<0.05);观察组病灶改善率(35.3%)和病灶稳定率(50.0%)与对照组(20.0%,43.3%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。随访周期结束后观察组HCC发生率(8.8%)与对照组(16.7%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);并发症发生率(8.8%)低于对照组(30.0%)(P<0.05)。安全性指标方面,观察组2例出现轻度不良反应,对照组3例出现轻度不良反应,两组均未出现安全性指标异常,观察组安全率(94.1%)与对照组(90.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论芪术化积方治疗HCC癌前病变(肝郁脾虚、痰瘀互结证),在改善中医证候、改善肝功能、缩小病灶结节、降低远期HCC发生率及减少肝硬化并发症等方面有较好的临床疗效及安全性。

炎性指标在术前预测肝细胞癌微血管侵犯中的研究进展

肝细胞癌目前已成为严重威胁人们生命安全的重大疾病,其死亡例数逐年增加。手术切除是目前最主要的治疗方法,但肝癌复发仍是目前医学无法解决的难题,同时也是影响肝细胞癌患者生存的主要障碍。微血管侵犯(MVI)是肝血管内微转移的肿瘤细胞栓子,由肝癌组织冰冻病理检出,与肝细胞癌术后复发转移及不良预后密切相关。炎症在恶性肿瘤的发生发展中起着重要作用。本文对炎症指标在术前预测肝细胞癌MVI状态的相关研究进展进行综述。

术前增强MRI在预测肝细胞癌根治术后早期复发中的价值

目的:探讨术前增强MRI在预测肝细胞癌根治术后早期复发中的价值。方法:选取2020年11月—2021年12月在哈尔滨医科大学附属肿瘤医院行肝细胞癌根治术治疗的96例患者,根据是否复发分为观察组与对照组,分析两组临床特征、生物学特征及影像学特征,单因素回归分析评估与肝细胞癌根治术后早期复发相关的MRI特征及病理学特征。结果:观察组与对照组巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期、病理分级、微血管侵犯、卫星结节指标对比差异有统计学意义(P<0.05);观察组与对照组肿瘤直径>5 cm、异质性、肿瘤坏死、动脉期不规则边缘样强化、瘤周动脉期增强、包膜破裂、非光滑肿瘤边缘对比差异有统计学意义(P<0.05);在多变量Cox比例风险模型中,瘤周动脉期增强和非光滑肿瘤边缘是MRI识别早期复发的独立预测因子(P<0.05);临床病理特征中,微血管侵犯和卫星结节是早期复发的独立预测因子(P<0.05)。结论:对于肝细胞癌患者,术前增强MRI检查有助于早期复发的预测,为临床制定合理的治疗方案提供依据,值得临床推广。

肝动脉化疗栓塞治疗肉瘤样肝内胆管细胞癌1例

该文报道了暨南大学附属珠海医院收治1例肉瘤样肝内胆管细胞癌患者采用肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗,首次治疗后,经评估肿瘤进展,随后调整治疗方案为TACE联合PD-1抑制剂治疗,目前患者仍在定期随访中。对于肉瘤样肝内胆管细胞癌治疗而言,定期随访和多学科治疗仍是改善预后的有效手段。

微囊小肝细胞样前体细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭

目的探索大鼠海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊小肝细胞样前体细胞(SHPC)移植治疗急性肝衰竭(AHF)大鼠模型的可行性和有效性。方法选择体质量150~180 g健康雄性Wistar大鼠10只。采用Retrosine(30 mg/kg)腹腔内注射联合2/3肝切除诱导雄性Wistar大鼠SHPC增殖模型,改进Seglen胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心分离SHPC,倒置显微镜、电子显微镜下观察,并进行免疫组织化学染色;静电液滴法APA微囊包埋。选择体质量180~220 g健康雌性Wistar大鼠20只,随机分为A组(微囊化SHPC腹腔内移植)、B组(空囊对照组);采用D-氨基半乳糖腹腔注射制备大鼠AHF模型;观察模型一般状况及生存时间,术后不同时间点检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)及血氨水平,检测肝脏病理改变。结果Retrosine腹腔内注射联合2/3肝切除成功建立SHPC增殖模型,分离获得细胞符合大鼠SHPC;APA微囊呈光滑规则球形,直径为(300±40)μm,强度、韧性良好,囊内细胞形态完整,存活率为(90.0±1.3)%。微囊SHPC移植后,A组较B组中位生存时间延长(119.00 h vs 70.33 h),差异有统计学意义(P<0.05);随时间延长,A组大鼠血清ALT、AST、TBiL及血氨水平明显下降,均低于移植前水平,各时间点A组明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);肝组织病理显示A组肝细胞损伤较B组明显改善;存活48 h大鼠腹腔内微囊保持完整光滑球形,囊内SHPC形态完整,1周微囊有散在破损皱缩,囊内细胞有增多聚集趋势,细胞存活率85%以上。结论APA微囊化大鼠SHPC腹腔内移植能改善大鼠AHF模型生存时间、生物化学指标(ALT、TBiL等)及病理损伤。

胸腹部CT平扫与3期增强扫描对高危肝母细胞瘤患儿术前预测价值分析

目的:探讨高危肝母细胞瘤患儿进行胸腹部CT平扫与3期增强扫描对患儿术前的预测价值。方法:选取2017年9月—2023年9月徐州医科大学附属徐州儿童医院收治的25例高危肝母细胞瘤患儿和35例非高危肝母细胞瘤患儿作为研究对象。将高危肝母细胞瘤患儿作为观察组,非高危肝母细胞瘤患儿作为对照组。两组均行胸腹部CT平扫与3期增强扫描。比较两组CT形态特征、肿瘤最大直径、CT参数,在此基础上,采用Logistic回归进行分析对变量之间的差异进行统计处理,以确定影响高危人群发病风险的独立风险因素,并进行受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果:两组CT形态特征除肿瘤破裂征外比较,差异无统计学意义。观察组肿瘤最大径大于对照组,肿瘤破裂征占比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组各项肝母细胞瘤CT参数比较,差异无统计学意义。Logistic多因素逻辑回归分析结果显示,肿瘤最大径和肿瘤破裂征均为高危肝母细胞瘤的危险因素,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤最大径和肿瘤破裂征联合诊断的ROC曲线下面积(AUC)值为0.881 (95%CI:0.830~0.932),灵敏度为86.30%,特异度为76.20%,联合诊断的灵敏度高于单独诊断(P<0.05)。结论:在胸腹部CT平扫与3期增强扫描中,肝母细胞瘤患儿如果肿瘤直径> 10.5 cm,且有证据表明肿瘤破裂,则可确诊为高危肝母细胞瘤,有利于医师进行相应的术前治疗,帮助患儿改善病情。

血清KLF5和actinin-4水平与肝细胞肝癌肝动脉化疗栓塞术治疗预后的关系

目的探讨血清Krüpple样因子5(KLF5)、辅肌动蛋白4(actinin-4)对肝细胞肝癌(HCC)肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗预后的关系。方法选取西安交通大学第二附属医院2015年3月至2020年3月期间收治的130例HCC患者作为HCC组,同期收治的86例肝硬化患者作为对照。术后随访3年,根据生存结局分为生存组(n=38)和死亡组(n=92)。采用ELISA检测各组血清KLF5和actinin-4水平,并分析血清KLF5与actinin-4水平之间的相关性;Cox回归分析HCC患者预后死亡的影响因素;受试者工作特征曲线(ROC)评估血清KLF5和actinin-4水平对HCC患者预后死亡的预测价值。结果死亡组患者血清KLF5和actinin-4水平明显高于生存组(P<0.05),且血清KLF5与actinin-4水平呈正相关(P<0.001);低分化、中国肝癌分期方案(CNLC)分期为Ⅲa期、血管侵犯、KLF5和actinin-4水平升高是HCC患者预后死亡的危险因素(P<0.05);血清KLF5和actinin-4单独及联合预测HCC患者预后死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.835、0.866、0.936,联合预测效果较高(Z二者联合-KLF5=2.792,P=0.005,Z二者联合-actinin-4=2.014,P=0.044)。结论HCC患者血清KLF5和actinin-4水平升高,二者血清水平对预后具有较高预测价值。

基于脱细胞方法制备3D植物肝组织工程支架及表征

背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜苹果分别采用磷酸盐缓冲液和十二烷基硫酸钠溶液进行脱细胞处理,然后用磷酸盐缓冲液进行脱毒获得处理后的苹果组织和苹果脱细胞支架材料,然后在扫描电镜下观察苹果材料的脱细胞效果。实验从BALB/C小鼠腹股沟脂肪中提取脂肪干细胞,并且通过流式细胞术鉴定其干细胞相关标记物(CD45,CD34,CD73,CD90,CD105)的表达。然后分为无支架对照组和有支架组,在两组中接种等量脂肪干细胞,通过CCK-8、苏木精-伊红染色、鬼笔环肽骨架染色评价该脱细胞支架与脂肪干细胞的生物相容性,在光学显微镜、扫描电镜下观察细胞在支架上的黏附及生长情况。然后将支架分为非诱导组和成肝诱导组,将脂肪干细胞种植在脱细胞苹果支架上,分别在普通培养基和成肝诱导培养基中培养14 d后进行对比,通过肝细胞标记物(白蛋白、细胞角蛋白18、细胞色素P450家族1亚家族1)进行免疫荧光染色,通过酶联免疫吸附实验来检测白蛋白、甲胎蛋白的分泌情况,并通过扫描电镜观察支架上诱导培养的细胞形态,验证该脱细胞支架材料上肝细胞相关蛋白的表达。最后,实验通过将钴60照射消毒后的苹果脱细胞支架移植于小鼠肝脏表面,28 d后通过大体观及苏木精-伊红染色观察该支架的降解情况。结果与结论:①扫描电镜结果显示,脱细胞后的苹果支架材料具有约100μm大小的孔隙结构,不存在残余细胞。②通过流式细胞学鉴定,提取培养的细胞为脂肪间充质干细胞。③CCK-8结果表明,所制备的苹果组织脱细胞支架材料无细胞毒性;苏木精-伊红染色和鬼笔环肽骨架染色观察到脂肪间充质干细胞能够在苹果组织脱细胞支架上黏附和聚集生长。④免疫荧光染色、酶联免疫吸附实验结果显示,培养在苹果组织脱细胞支架上的脂肪间充质干细胞高表达白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白18及细胞色素P450家族1亚家族1肝脏相关蛋白,说明被诱导分化为了具有肝细胞功能的肝细胞样细胞。⑤干预7 d时植入的苹果脱细胞支架与肝脏融合,部分支架已经降解,干预28 d时苹果脱细胞支架已完全降解,被新生组织替代。⑥结果表明,来源于苹果组织制备的脱细胞支架材料具有良好的生物相容性,可促进脂肪间充质干细胞的增殖、黏附及成肝细胞分化。

肝细胞癌组织中PLAGL2和SNX5的表达及临床预后价值研究

目的探讨肝细胞癌(HCC)中多形性腺瘤基因样蛋白2(PLAGL2)和分拣微管连接蛋白5(SNX5)的表达及临床预后价值。方法回顾性选取2019年2月至2020年2月在山西医科大学附属忻州医院接受治疗的92例HCC患者为研究对象。采用免疫组化法检测HCC组织和癌旁组织中PLAGL2、SNX5表达情况。绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较PLAGL2、SNX5阳性和阴性患者3年累积生存率。采用单因素和多因素Cox回归分析影响HCC预后的独立危险因素。结果HCC组织中PLAGL2和SNX5阳性率分别为78.26%(72/92)和76.09%(70/92),高于癌旁组织的6.52%(6/92)和4.35%(4/92),差异均有统计学意义(均P<0.01)。肿瘤最大径>5 cm、TNM分期Ⅲ期的患者PLAGL2和SNX5阳性率分别高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤最大径≤5 cm的患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。PPLAGL2阳性患者3年累积生存率为51.39%(37/72),低于PLAGL2阴性患者的80.00%(16/20),差异有统计学意义(P=0.037)。SNX5阳性患者3年累积生存率为50.00%(35/70),低于SNX5阴性患者的81.82%(18/22),差异有统计学意义(P=0.020)。肿瘤最大径>5 cm、TNM分期Ⅲ期、PLAGL2阳性及SNX5阳性均是影响HCC患者预后的独立危险因素(均P<0.01)。结论HCC组织中PLAGL2、SNX5阳性率升高,两者均参与促进HCC的发生、发展。PLAGL2阳性和SNX5阳性是影响HCC患者预后的独立危险因素,是HCC潜在的预后相关肿瘤标志物。