异种器官移植排斥反应及其预防治疗策略

异种器官移植是解决人类器官短缺问题的潜在方案。在过去的上百年里,异种器官移植经历了早期尝试和不断进步,目前已进入新的高速发展阶段,取得了一系列的成果,但异种器官移植排斥反应的管理较同种异体器官移植排斥反应更为棘手。为此,研究者们开发出了一系列免疫抑制策略,如使用基因修饰猪供体、使用传统和新型免疫抑制药、将供体猪的胸腺与供器官一同移植等,以实现调整受体免疫系统反应,降低排斥反应强度并延长移植物存活时间。本文就异种器官移植排斥反应发生机制、预防和治疗策略的相关研究进行评述,以期为促进异种器官移植的进一步发展提供参考。

三级淋巴结构在器官移植排斥反应中的现状与展望

器官移植后,移植物的排斥反应是最常见的并发症之一,无论病因如何都会对移植物产生不良损害。三级淋巴结构(TLS)于病理情况下非淋巴组织内发生。针对调节移植物排斥反应的机制鉴定和表征,不仅能够促进人们对器官移植物的存活及预后的理解,而且还为治疗移植物排斥反应提供了思路。

外泌体检测在同种器官移植排斥反应中的应用进展

实体器官移植是终末期器官衰竭最有效的治疗方法,然而移植后排斥反应会对移植器官造成损伤,减少移植物存活时间。近年来,液体活检成为一种检测和诊断排斥反应的重要手段,其中外泌体的研究尤其受到关注。外泌体作为生物标志物,具有非侵入性、诊断准确性高等优点,可用于诊断移植排斥反应。文章就外泌体检测在同种器官(包括肾、肺、心脏、肝脏等)移植排斥反应中的研究进展进行综述。

体外光化学疗法对大鼠肾移植抗排斥反应的研究

目的 探讨输注体外光化学疗法处理的单核细胞对肾移植大鼠排斥反应影响。方法 首先手术建立大鼠肾移植模型,分离受体大鼠单个核细胞,制备8-甲氧基补骨脂素联合紫外线光照的大鼠单核细胞(ECP),根据静脉输注成分不同,将实验分为4组(每组12只),组1接受ECP处理,组2接受传统抗排斥药物,组3接受安慰剂处理,组4非移植组,接受ECP组和安慰剂组受体分别于手术前7 d、手术当天和术后7 d按组别从尾静脉注入ECP细胞(ECP组)或磷酸盐缓冲液PBS(安慰剂组);接受免疫抑制大鼠术后第1天起,皮下注射环孢素A 5 mg/kg连续10 d。组4未接受任何处理。观察受体大鼠的淋巴细胞数、细胞因子变化以及肾功能、移植大鼠肾病理情况。结果 ECP组和免疫抑制剂组大鼠IL-2、INF-γ有不同程度减少、IL-10水平升高,其CD4+、CD8+均有不同程度下降,血肌酐较安慰剂组低,排斥反应程度较安慰剂轻,与安慰剂组相比差异有统计学意义。结论 ECP可调节细胞因子和T细胞,减轻肾移植大鼠的排斥反应。

近交系大鼠小肠移植模型排斥反应的动态观察

目的 :动态观察近交系大鼠小肠移植排斥反应发生规律 ,探讨该模型对小肠移植排斥反应研究的价值。方法 :选用近交系大鼠F344 (RT11)和BN(RT1n) ,根据改良Monchik法建立下腔静脉回流式异位全小肠移植模型。实验分为同系移植组 (F344→F344 ,ITx 组 )和同种移植组 (BN→F344 ,ATx 组 ) ,每组各制作实验模型 8只。结果 :①ITx 组大鼠平均生存期 30d以上 ,ATx 组大鼠平均存活 12d。②ITx 组大鼠术后各时点的大体观察无明显差异 ,而移植小肠病理组织学POD 3d呈非特异性炎症反应表现 ,POD 0、5、7、9d与正常小肠的组织学特征基本相同。③IL - 2Rα和γ INFmRNA转录水平显著性改变早于排斥反应的病理诊断。④ATx 组在POD 5、7、9d的大体表现与组织病理改变分别符合轻、中、重度排斥反应的诊断标准。结论 :近交系大鼠BN→F344与近交系大鼠F344→Wistar适用于小肠移植排斥反应实验研究。

急性抗体介导排斥反应中能量代谢失衡致移植物损伤机制的研究进展

急性抗体介导排斥反应(AMR)是一种未被充分认识的同种异体移植排斥反应,是导致移植物功能损伤的重要原因。但目前AMR早期诊断和临床管理仍面临较多困难。在器官移植过程中,机体和移植物可能会出现不同程度能量代谢失衡,从而引起细胞、组织或器官的代谢特征改变,继而影响其正常的结构和功能。AMR发生后,免疫细胞能量代谢失衡可导致免疫功能紊乱,进而引起移植物损伤;当长时间经历低氧环境后,移植物出现能量代谢失衡,移植物细胞将暴露新的抗原表位,继而被免疫系统识别并清除,诱发或加重移植后排斥反应,从而对移植物造成不可逆性损伤;膜外三磷酸腺苷二磷酸水解酶1、缺氧诱导因子1等影响能量代谢的分子可通过催化底物分解和结合细胞特定靶点调节机体代谢水平,改变移植物细胞能量代谢失衡进程,从而影响移植物长期预后。深入探索AMR中能量代谢失衡致移植物损伤的机制,对促进器官移植术后AMR的预防和治疗具有重要意义。

他克莫司对肝移植急性排斥反应大鼠肠道菌群的影响

目的探讨他克莫司对心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肝移植后急性排斥反应大鼠肠道菌群的影响。方法构建稳定运行的常温机械灌注(normothermic machine perfusion,NMP)系统。夹闭Lewis大鼠胸主动脉30 min获取DCD肝脏,以棕色挪威大鼠(BN)为受体,建立原位肝移植急性排斥反应模型。根据对肝脏的不同处理方法,将BN大鼠分为以下3组:假手术(Sham)组、单纯NMP(NMP)组及NMP联合术后他克莫司(FMP)组,每组6只,术后14 d收集血液、肝脏和肠道内容物样本。血液标本检测肝功能,HE染色观察肝脏组织学变化并计算排斥活动指数(rejection activity index,RAI),16 SrDNA检测肠道内容物,观察各组肠道菌群结构、多样性及功能变化。结果FMP组(中位生存期>60 d)大鼠存活时间较NMP组(中位生存期为16.5 d)延长,肝功能和肝组织病理较NMP组显著改善(P<0.05)。计算RAI结果显示,FMP组(2.00±1.23)显著低于NMP组(7.60±1.14)(P<0.05)。与NMP组相比,FMP组肠道菌群丰度下降,两组在物种之间有明显差异,FMP组富含厚壁菌门、阿克曼菌科和毛螺菌科,且富集其他聚糖降解和鞘脂代谢通路。结论他克莫司能够改善DCD供肝移植后急性排斥反应大鼠肝损伤,同时调节肠道菌群结构和代谢途径。

肝、肾移植后外周血免疫排斥反应相关生物标志物的研究进展

器官移植已经成为器官功能衰竭、癌症等多种终末期疾病的有效治疗手段[1],目前我国器官捐献例数已经超过5000例/年,跻身全球第2位[2]。然而,移植术后免疫排斥反应对移植物存活率及受者生存率有着很大的影响,目前临床上诊断移植术后急慢性免疫排斥反应的金标准是移植物活组织检查(活检)。

来氟米特对大鼠不同器官移植排斥反应的抑制作用

目的：验证来氟米特（ｌｅｆｌｕｎｏｍ ｉｄｅ）对同种异体急性排斥反应的抑制作用。方法：６０ 只成年 Ｌｅｗ ｉｓ 雄性大鼠作为受体， Ａ Ｃ Ｉ大鼠作为供体，分别行原位肝脏、小肠、肾脏以及异位心脏、胰腺移植。除对照组外，给予每只受体来氟米特５ ｍ ｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １ 治疗１４ ｄ。结果：与对照组比较，来氟米特可显著延长受体及移植物存活时间。其中，来氟米特可将 ２／６ 肾移植受体及５／５ 肝移植受体存活时间延长至１００ ｄ 以上。结论：来氟米特可显著延缓大鼠同种异体小肠、心脏及胰腺器官移植排斥反应；可有效控制肝脏及肾脏移植排斥反应。

调节性T细胞在大鼠小肠移植急性排斥反应中的作用

目的 分析调节性T细胞在大鼠急性排斥反应中的作用。方法 采用免疫组化SABC染色法 ,测定BN→LEW大鼠小肠移植急性排斥反应时 ,外周血及移植肠浸润淋巴细胞中调节性T细胞 :CD4 + 、CD8+ 、CD2 5 + T淋巴细胞及相关细胞因子IL - 4和IFN -γ的表达 ,并与同基因大鼠间小肠移植 (BN→BN)作比较。结果 外周血淋巴细胞分析显示 ,大鼠小肠移植急性排斥反应时 ,以CD4 + CD2 5 + T细胞为主 ,CD8+ 淋巴细胞只占少部分 ;分泌IL - 4的细胞在术后 4、7、14d分别只占 14 .3% ,16 .2 %和 16 .9%。移植肠基底浸润的淋巴细胞以CD4 + 、CD2 5 + 和分泌IFN -γ的淋巴细胞为主。结论 在大鼠同种小肠移植中 ,急性排斥反应与CD2 5 + CD4 + T细胞及Th1相关细胞因子IFN -γ的表达增加相关。而CD8+ T淋巴细胞和Th2相关细胞因子IL-

青蒿琥酯对大鼠小肠移植急性排斥反应的作用

背景:随着强效、特异免疫抑制剂的问世,小肠移植的成活率有了一定程度的提高。但这些免疫抑制剂的不良反应及昂贵的治疗费用,让很多患者难以承受。所以,选择有免疫抑制作用的中药在临床上应用是很有意义的。青蒿琥酯有免疫抑制作用,可以减轻小肠移植急性排斥反应,提高小肠移植的成功率。目的:观察青蒿琥酯在大鼠小肠移植急性排斥反应中的作用及其机制。方法:选用封闭群SD大鼠和Wistar大鼠建立同种异基因小肠移植模型,随机分为3组:①同基因移植组(SD→SD)。②异基因移植组(Wistar→SD)。③异基因移植+青蒿琥酯治疗组(Wistar→SD+青蒿琥酯60 mg/(kg·d),腹腔注射)。结果与结论:同基因移植组大鼠存活均超过10 d,并于第10天全部处死。异基因移植组大鼠平均存活(6.73±0.58)d,治疗组大鼠平均存活(8.50±0.74)d,两组间比较差异有显著性意义(P<0.01)。病理组织学检查显示同基因移植组标本无明显排斥征象,异基因移植组标本在术后第3,5,7天分别符合轻、中、重度排斥反应,治疗组部分标本有轻度排斥表现,但出现较晚、程度较轻。ELISA法检测显示异基因移植组血清白细胞介素2、γ-干扰素表达水平在术后均显著高于其他2组(P<0.01),治疗组血清白细胞介素2表达水平与同基因移植组比较亦有升高,但差异无显著性意义(P>0.05),治疗组血清γ-干扰素表达水平高于同基因移植组(P<0.05)。结果可见青蒿琥酯对大鼠小肠移植急性排斥反应有抑制作用,其作用机制可能与抑制白细胞介素2、γ-干扰素等细胞因子的分泌表达有关。

普乐可复对大鼠小肠移植排斥反应的免疫抑制作用

目的 观察大鼠小肠移植术后应用普乐可复(FK5 0 6 )对小肠移植排斥反应的免疫抑制作用 .方法 选用近交系大鼠 F34 4/ N(RT 1 )和 Wistar大鼠进行全小肠异位移植 ,实验分 4组 .第 1组 ,异基因移植组 F34 4/ N- Wistar;第2组 ,小剂量普乐可复治疗组 F34 4/ N- Wistar+FK5 0 6 (0 .2mg· kg- 1 · d- 1 ,0～ 14d,im ) ;第 3组 ,普乐可复治疗组F34 4/ N- Wistar+FK5 0 6 (0 .5 m g· kg- 1· d- 1 ,0～ 14d,im ) ;第 4组 ,同基因移植组 (F34 4/ N- F34 4/ N ) .观察大鼠的一般状况及存活时间并于术后第 3,5 ,7日取移植小肠标本进行病理学检查和比较 .结果 第 1组大鼠存活时间与其他3组有显著差异 (P<0 .0 1) ,第 1组大鼠在术后第 3,5 ,7日病理学检查移植肠出现排斥反应 ,而第 2 ,3,4组无明显排斥 ,可长期存活 .结论 普乐可复能明显抑制小肠移植急性排斥反应的产生 。

IL-10对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响

目的:研究IL-10对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响。方法:将18只供体Wistar大鼠和18只受体SD大鼠分为3组,每组各有6只Wistar大鼠和SD大鼠。Ⅰ组:Wistar→SD小肠移植;Ⅱ组:Wistar→SD小肠移植+CsA;Ⅲ组:Wistar→SD小肠移植+rrIL-10。术后3、5、7d观察病理学改变并用半定量RT-PCR方法检测IFN-γ、IL-2mRNA。结果:Ⅰ组术后3 d出现排斥反应,第7 d时最重;Ⅱ组术后7d部分出现轻度排斥反应;Ⅲ组术后5d出现轻度排斥反应,术后7d出现中度排斥反应。Ⅰ组IFN-γ、IL-2mRNA术后明显增高;Ⅱ组术后略升高,与Ⅰ组差异有统计学意义(P<0.01);Ⅲ组术后升高,较Ⅰ组升高程度低,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-10可抑制大鼠小肠移植急性排斥反应。

大鼠小肠移植早期排斥反应中细胞凋亡与肿瘤坏死因子-α关系的研究

背景致炎细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)鄄α在诱导细胞凋亡中起重要作用。目的明确小肠移植早期排斥反应中存在细胞凋亡现象,探讨TNF鄄α与细胞凋亡的关系及其在凋亡发生中的作用。方法选用Sprague鄄Dawley(SD)大鼠和Wistar大鼠行异位节段小肠移植。同基因移植组SD(供体)鄄SD(受体);异基因移植组Wistar(供体)鄄SD(受体);异基因移植+环孢素A治疗组Wistar(供体)鄄SD(受体)+环孢素A每日10mg/kg。术后第1、3、5、7天,采用原位末端标记技术(TUNEL法)检测移植肠黏膜上皮凋亡细胞,夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TNF鄄α水平。结果同基因移植组术后排斥反应轻微,移植肠黏膜上皮凋亡细胞数无明显变化(P>0.05);异基因移植组术后凋亡细胞数随排斥反应的加重而增加(P<0.01),并显著高于同基因移植组(P<0.01);异基因移植+环孢素A治疗组凋亡细胞数亦显著高于同基因移植组(P<0.01)。同基因移植组术后血清TNF鄄α水平无明显变化(P>0.05),异基因移植组术后血清TNF鄄α水平随凋亡细胞数的增加而增高(P<0.01)。移植术后血清TNF鄄α水平随移植肠黏膜上皮细胞凋亡的轻重而变化,两者呈正相关(r=0.837,P<0.01)。结论TNF鄄α与大鼠小肠移植早期排斥反应中的细胞凋亡现象有关,并在细胞凋亡的发生中起调节作用。

TGF-β_1 mRNA与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系

目的 :研究TGF β1mRNA与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系。方法 :试验分 2组 ,Ⅰ组 :Wistar→SD小肠移植 ;Ⅱ组Wistar→SD小肠移植 +CsA。术后 3,5 ,7d观察病理学改变并用半定量RT PCR方法检测IFN γ、IL 2、TGF β1mRNA。结果 :病理改变 :Ⅰ组术后 3d出现排斥反应 ,7d最重 ,Ⅱ组术后 7d部分出现轻度排斥反应。Ⅰ组IFN γ、IL ImRNA术后明显增高 ,Ⅱ组术后略升高 ,两者相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。Ⅰ组TGF β1mRNA术后增高 ,Ⅱ组TGF β1mRNA术后增高大于Ⅰ组 ,两者差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :TGF

序贯疗法改善大鼠小肠移植慢性排斥反应的实验研究

目的本研究旨在通过序贯疗法治疗大鼠小肠移植慢性排斥反应的实验研究,探索小肠移植慢性排斥反应的病理特点及其免疫耐受机制。方法本研究应用大鼠原位小肠移植为模型。FK506加雷帕霉素序贯疗法控制慢性排斥反应。HE,Masson和Elastin染色用于反映移植物的组织病理学变化,免疫组化和流式细胞方法检测移植物及血液中细胞浸润和抗移植物循环抗体的表达。结果非序贯治疗组大鼠只有21%长期存活,而序贯治疗组大鼠91.7%得到长期存活。序贯治疗组大鼠表现出较完整的肠道及肠系膜组织学形态,并只有轻微的血管闭塞和胶原纤维的沉积。同时移植肠管肠系膜iNOS阳性吞噬细胞浸润显著增多,而抗移植物循环抗体显著降低。结论序贯疗法可明显缓解大鼠小肠移植慢性排斥反应发生,其机制可能与iNOS阳性吞噬细胞浸润和抗移植物循环抗体降低有关。

近系大鼠小肠移植模型排斥反应的研究

目的 动态观察近交系大鼠BN→F3 44组合模型小肠移植排斥反应的发生规律 ,探讨该模型对小肠移植排斥反应的研究价值。方法 选用近交系大鼠F3 44(RT1l)和BN (RT1n) ,根据改良Monchik法建立异位全小肠移植模型。实验分为同系移植组 (F3 44→F3 44,ITX 组 )和同种移植组 (BN→F3 44,ATX 组 ) ,每组供、受体大鼠各 8只。结果 (1)ITX 组大鼠平均生存期 3 0d以上 ,ATX 组平均存活 12d。 (2 )ITX 组术后各时点的大体观察无明显差异 ,而移植小肠病理组织学术后 3d呈非特异性炎症反应表现 ,术后 0 ,5 ,7,9d与正常小肠的组织学特征基本相同。 (3 )ATX 组在术后 5 ,7,9d的大体表现与组织病理改变分别符合轻、中、重度排斥反应的诊断标准。结论 近交系大鼠BN→F3 44组合模型轻、中、重三个层次排斥反应特点鲜明 ,适用于小肠移植排斥反应免疫机制的研究。

Th17细胞相关细胞因子在大鼠小肠移植急性排斥反应中的作用

目的通过对大鼠小肠移植FK506预处理模型研究,探讨Th17细胞相关细胞因子在大鼠小肠移植急性排斥反应中的表达。根据病理表现及相关细胞因子表达,进一步探究Th17细胞相关因子在大鼠小肠移植急性排斥的作用机理,试图为预防小肠移植急性排斥损伤提出新思路。方法雄性健康F344大鼠5对及Lewis大鼠10对,6～8周龄,采用数字表法随机分为对照1组(F344 5只、Lewis 5只)、对照2组(Lewis大鼠5对)和实验组(F344 5只、Lewis 5只)。采用供体肠系膜上动脉-受体腹主动脉端侧、供体门静脉-受体下腔静脉端侧吻合法,供体肠管近端旷置远端回肠-回肠端侧吻合的异体全段性小肠移植术式。实验组:FK506按2 mg/Kg的剂量实验前3日每日肌肉注射,手术当日及术后7 d,按0.3 mg.kg-1.d-1肌肉注射。术后7 d处死受体大鼠或濒死大鼠,取供体肠管行HE染色及免疫组织化学染色观察病理变化,右心室穿刺取血用ELISA方法检测血清中IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β、IFN-γ的含量。结果在大鼠小肠移植急性排斥反应模型中,移植肠管的黏膜发生明显的病理形态学改变。对照1组小肠黏膜的病理形态学改变最明显,实验组病理学改变相对较轻,对照2组大鼠小肠黏膜改变最轻。免疫组织化学染色提示巨噬细胞浸润以对照1组最明显,其次为实验组,对照2组浸润最轻。实验组和对照组的大鼠静脉血血清中的IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β平均浓度大体趋势相同,各种细胞因子以对照1组最高,实验组次之,对照2组最低。结论在大鼠小肠移植模型中,FK506预处理能减轻小肠移植急性排斥反应造成的黏膜损伤,有利于移植受体的存活。其机理与减少移植肠管巨噬细胞的浸润有关。对照1组和实验组大鼠血液中IL-17、IL-23等细胞因子水平均值都高于对照2组,提示Th17相关因子参与急性排斥反应过程。阻断Th17相关因子产生可能会减轻小肠移植急性排斥反应损伤。

OX34预防大鼠小肠移植急性排斥反应

目的:探讨可溶性抗CD2 mAb(OX34)在大鼠小肠移植(SBT)急性排斥反应中的治疗作用.方法:将两种近交系大鼠(SD,W istar)72只随机分为A,B,C,D 4组,A组为对照组(n=18)行虚拟手术,给予普通饲料喂养;B组(n=18)行同系小肠移植(iso-strain SBT),术后常规补液,给予抗生素;C组(n=18)行不同品系小肠移植(aniso-strain SBT),术后处理同B组;D组(n=18)行不同品系小肠移植,术后除常规补液、给予抗生素外,同时给予OX34.各组于术后3,5,7 d取材.行病理学及流式细胞术(FCM)检测.结果:手术后C组移植受体存活时间及外周血CD2阳性T淋巴细胞表达率较其他3组差异有统计学意义(P<0.05).移植肠病理学检查均有从轻度至重度急性排斥反应的发生.D组部分受体于术后5,7d出现轻度急性排斥反应.A,B组未见明显排斥反应发生.结论:OX34可有效抑制急性排斥反应的发生.

大鼠小肠移植排斥反应期移植肠RANTES的表达(英文)

背景：同种异体移植排斥反应是影响移植物功能和存活的最大障碍，小肠移植排斥反应的诊断与治疗尤为困难。目的：探讨移植肠RANTES的表达在小肠移植急性排斥反应中的意义，以及他克莫司对它的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2003-09／2005—03在解放军第四五一医院普通外科、解放军第四军医大学附属西京医院胃肠外科实验室、解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心为大专院校的实验室完成。材料：选用健康成年雄性SD和Wistar大鼠各72只。以SD大鼠为供者，Wistar大鼠为受者，施行异位小肠移植。方法：实施大鼠异位小肠移植，按照不同品系的组合将移植大鼠分为4组（n=18）：非手术对照组，Wistar大鼠作为正常对照，不实施小肠移植；同基因移植组，将Wistar大鼠的小肠移植给同品系的Wistar大鼠；异基因移植未治疗组，将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠，移植后不给予免疫抑制剂治疗；异基因移植他克英司治疗组，将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠，移植后0～7d肌肉注射他克莫司，1mg／（kg·d）。移柏后3，5，7d每组各处死6只大鼠，切取移植肠标本进行组织病理学检查，并采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦湿微镜技术对移植肠RANTES的表达进行连续定量测定。主要观察指标：①各组大鼠移植肠的组织病理学改变。②不同时间点移植物内RANTES阳性细胞的表达变化。③他克莫司对异基因移植大鼠移植肠RANTES表达的抑制作用。结果：72只受体大鼠均进入结果分析。异基因移植未治疗组大鼠后3，5，7d移植肠符合轻、中、重度急性排斥反应的病理学诊断标准；他克莫司治疗组大鼠和同基因移植对照组大鼠在观察期内未发现明显排斥反应征象。异基因移植未治疗组大鼠的移植肠RANTES表达在术后均显著高于其他3组（P〈0．01），其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关；他克莫司治疗组大鼠移植肠RANTES的表达明显低于未治疗组（P〈0．01）。结论：RANTES阳性细胞在小肠移植急性排斥反应中发挥了重要作用，动态检测移植肠RANTES的表达变化，可能成为小肠移植急性排斥反应有效的诊断指标之一。