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鸡小肠上皮干细胞的分离培养
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作者 裴沛 熊慧 +2 位作者 崔鹏 关伟军 马月辉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期85-91,共7页
为建立鸡小肠上皮干细胞(Intestinal epithelial stem cells,IECs)体外培养体系并对其进行生物学特性研究,取18日龄鸡胚,分离小肠获得IECs,在DMEM/F12培养基中培养并观察其形态。通过传代及生长曲线的绘制分析其增殖情况,并经形态学观... 为建立鸡小肠上皮干细胞(Intestinal epithelial stem cells,IECs)体外培养体系并对其进行生物学特性研究,取18日龄鸡胚,分离小肠获得IECs,在DMEM/F12培养基中培养并观察其形态。通过传代及生长曲线的绘制分析其增殖情况,并经形态学观察及细胞免疫组织化学、RT-PCR等方法对所得到的纯化后的鸡小肠上皮干细胞进行鉴定。结果表明,鸡IECs可在体外扩增培养,目前传代至P11,纯化所得的鸡小肠上皮细胞经形态学观察及免疫荧光、RTPCR法鉴定为阳性,由此可得出结论:鸡小肠组织中可以分离出IECs,且能够在体外增殖培养。 展开更多
关键词 小肠上皮干细胞 分离培养 鉴定
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胎牛小肠上皮干细胞的分离和培养并诱导其向肝细胞样细胞分化
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作者 孙婷婷 蔡连顺 关伟军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期54-57,61,共5页
目的建立胎牛小肠上皮干细胞(IESC)分离和培养的体系,并检测其表面标志物及向肝细胞样细胞分化的潜能。方法取3~5月龄胎牛,分离小肠组织,用胶原酶消化获得IESC,在DMEM/F12培养基中培养,观察其形态学特征。传代培养、生长曲线分析其增... 目的建立胎牛小肠上皮干细胞(IESC)分离和培养的体系,并检测其表面标志物及向肝细胞样细胞分化的潜能。方法取3~5月龄胎牛,分离小肠组织,用胶原酶消化获得IESC,在DMEM/F12培养基中培养,观察其形态学特征。传代培养、生长曲线分析其增殖能力,并探索体外分化潜能。反转录PCR检测IESC标志基因Bmi1、Hes1、Lgr5和细胞角蛋白19(CK19)的mRNA表达,免疫细胞化学染色检测CK19、Bmi1、LGR5蛋白的表达。经成纤维细胞生长因子4(FGF-4)和肝细胞生长因子(HGF)诱导后,通过糖原染色和反转录PCR法观察向肝细胞样细胞的分化情况。结果 IESC可在体外扩增培养,表达CK19、Bmi1、Hes1、Lgr5的mRNA和CK19、Bmi1、LGR5蛋白,诱导后细胞糖原染色阳性,表达甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的mRNA。结论成功建立了IESC的分离培养方法,并成功诱导IESC向肝细胞样细胞分化。 展开更多
关键词 胎牛 小肠上皮干细胞 分离培养 鉴定 诱导分化
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干细胞标志Lgr5在糖尿病小鼠小肠上皮中的表达
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作者 钟献阳 于涛 +3 位作者 黎洁瑶 杨洪生 欧阳慧 陈其奎 《新医学》 2015年第5期289-293,共5页
目的探讨糖尿病小鼠小肠上皮干细胞标志分子G蛋白偶联受体5(Lgr5)的表达及干细胞数量的改变情况。方法采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病小鼠模型,用免疫组织化学检查(免疫组化)检测糖尿病小鼠(6只)与正常小鼠(6只)小肠上皮组织中... 目的探讨糖尿病小鼠小肠上皮干细胞标志分子G蛋白偶联受体5(Lgr5)的表达及干细胞数量的改变情况。方法采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病小鼠模型,用免疫组织化学检查(免疫组化)检测糖尿病小鼠(6只)与正常小鼠(6只)小肠上皮组织中Lgr5的表达,并分离糖尿病小鼠与正常小鼠原代小肠上皮细胞,采用流式细胞技术测定Lgr5阳性细胞在上皮细胞中的比例。结果免疫组化结果显示糖尿病与正常小鼠小肠上皮每个隐窝单位的Lgr5阳性细胞数量分别为(3.7±0.5)个及(1.5±0.6)个,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞技术测得糖尿病与正常小鼠小肠上皮Lgr5阳性细胞比例分别为(28.75±3.69)%及(6.55±1.78)%,前者上皮组织中Lgr5阳性细胞比例显著高于后者(P<0.05)。结论链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠小肠上皮Lgr5阳性干细胞数量增加,Lgr5在糖尿病小鼠小肠上皮细胞高表达。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体5 糖尿病 小肠上皮干细胞 原代细胞分离
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Towards a multiscale model of colorectal cancer 被引量:1
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作者 Ingeborg MM van Leeuwen Carina M Edwards +1 位作者 Mohammad Ilyas Helen M Byrne 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第9期1399-1407,共9页
Colorectal cancer (CRC) is one of the best characterised cancers, with extensive data documenting the sequential gene mutations that underlie its development. Complementary datasets are also being generated describing... Colorectal cancer (CRC) is one of the best characterised cancers, with extensive data documenting the sequential gene mutations that underlie its development. Complementary datasets are also being generated describing changes in protein and RNA expression, tumour biology and clinical outcome. Both the quantity and the variety of information are inexorably increasing and there is now an accompanying need to integrate these highly disparate datasets. In this article we aim to explain why we believe that mathematical modelling represents a natural tool or language with which to integrate these data and, in so doing, to provide insight into CRC. 展开更多
关键词 Intestinal epithelium Crypt fission APC mutations Mathematical modelling Stem cell niche Wnt signalling
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