高效液相色谱法评定二肽水解的研究

用高效液相色谱法测定了仔猪小肠刷状缘膜囊 (BrushBorderMembraneVesicles ,BBMV)孵育体系中甘 -L -亮 (Gly -Leu)和L -组 -L -亮 (His -Leu)等两种二肽的含量。分别以水 (pH值为 5 .5 5 )和乙腈 -三氟乙酸 (三氟乙酸浓度为 0 .1% )为流动相 ,经PhenomennexODS分析柱(2 5 0mm× 4 .6 0mm ,5 μm ,C18)分离 ,检测波长为 190～ 4 0 0nm。结果表明 ,两种二肽在 0～30 0 μgmL- 1的之间 ,其峰面积 (X)对质量浓度 (Y ,μgmL- 1)回归得方程分别Y =0 .0 0 0 1X +0 .8719,R2 =0 .9999和Y =0 .0 0 0 0 6X +6 .6 312 8,R2 =0 .9982 ;回收率依次为 99.91%和10 0 .0 5 % ,保留时间依次为 2 .0 7和 1.0 1min ;最大吸收波长依次为 197和 199nm。该方法快速、简便和准确 ,结果稳定 ,重现性好 ,可以用来评定该两种二肽在动物小肠BBMV体系中的水解状况。

小肽转运蛋白(PepT1)的活性调节

小肽是蛋白质在动物体内消化的主要产物,而位于小肠刷状缘膜上的小肽转运蛋白(PepT1)在小肽的吸收过程中发挥着重要作用,因此PepT1的活性直接影响小肽的吸收。文中主要介绍底物、营养不良、激素、昼夜节律和生长发育对PepT1的活性调节。

鸡蛋卵转铁蛋白过敏原的体外模拟消化特性

采用体外静态消化模式,分别模拟婴幼儿和成年人的胃液、小肠液以及小肠刷状缘膜酶消化鸡卵转铁蛋白,利用Tricine-SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS对消化产物进行分析,研究鸡蛋蛋清过敏原卵转铁蛋白的消化特性。结果表明:婴幼儿和成年人的模拟胃液、小肠液以及小肠刷状缘膜酶都能够消化卵转铁蛋白。在模拟婴幼儿消化体系中,卵转铁蛋白胃消化产物分子质量范围为5~15 ku和30~50 ku,进一步经小肠消化后的产物分布在0.4~10 ku,最后经小肠刷状缘膜酶消化生成0.5~0.7 ku的肽段及部分5~13 ku的蛋白。卵转铁蛋白经模拟成年人胃消化的产物分子质量范围与模拟婴幼儿的一致,胃-小肠消化主要生成0.5~0.8 ku的肽段,再经小肠刷状缘膜酶消化后仍可生成0.5~0.7 ku的肽段。研究初步揭示卵转铁蛋白体外胃肠消化的规律,为卵转铁蛋白导致婴幼儿过敏提供部分试验依据。