温州市食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因分布及遗传多样性研究

目的了解温州市食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的毒力基因分布及遗传多样性特征。方法对温州市食品及食源性疾病腹泻病人中分离得到的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行生物型、血清型和耐药性分析,并基于全基因组测序进行菌株的毒力基因、多位点序列分型(MLST)、核心基因组多位点序列分型(cgMLST)分析。结果71株食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌,94.4%(67/71)的分离株为生物1A型,生物血清型以1A/O∶5占比最高(29.6%,21/71)。分离株对14种抗菌药物的敏感率达到95.8%以上。共获得了16种126个毒力基因,其中2株菌株携带pYV质粒和染色体相关毒力基因。分离株以ST3型最常见(31.6%,12/38),cgMLST分析显示除具有相同ST型的菌株外,菌株无明显基因型簇形成。结论温州市食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌存在致病性菌株,菌株呈高度遗传多态性,需加强此类菌株的监测,以预防其引起食源性疾病的暴发。

小肠结肠炎耶尔森菌O∶9血清型特异性单克隆抗体筛选及其应用

目的利用杂交瘤技术筛选出能分泌小肠结肠炎耶尔森菌O∶9血清型特异性单克隆抗体的细胞株,用于该型菌株的鉴定。方法采用ELISA方法筛选克隆株,并用玻片凝集法进行单克隆抗体的特异性鉴定。结果筛选到3株能分泌小肠结肠炎耶尔森菌O∶9血清型特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分泌的抗体与经鉴定的18株小肠结肠炎耶尔森菌O∶9血清型菌株呈阳性反应,而与其他血清型小肠结肠炎耶尔森菌及常见肠道致病菌无交叉凝集反应;应用于小肠结肠炎耶尔森菌野生株分型鉴定时,能准确鉴定出其中的24株O∶9血清型菌株,与用日本进口分型血清鉴定、PCR毒力基因检测结果相同。结论筛选获得的细胞株产生的单克隆抗体,用于小肠结肠炎耶尔森菌O∶9血清型鉴定,具有很好的型特异性,避免了过去免疫血清制备中繁琐的抗原交叉吸收试验。

小肠结肠炎耶尔森菌O:8血清型特异性单克隆抗体的制备

目的利用杂交瘤技术制备小肠结肠炎耶尔森菌O:8血清型特异性单克隆抗体,用于小肠结肠炎耶尔森菌O:8血清型菌株的分型鉴定。方法用小肠结肠炎耶尔森菌O:8血清型菌株作为抗原,以骨髓杂交瘤细胞融合技术制备小肠结肠炎耶尔森单克隆抗体,用玻片凝集筛选法进行单克隆抗体的特异性鉴定。结果筛选到1株与小肠结肠炎耶尔森菌O:8血清型菌株呈现阳性反应,并与日本的抗血清检测结果相一致,而与被检测的其他血清型小肠结肠炎耶尔森菌和常见肠道致病菌无交叉凝集反应。结论本实验筛选获得的单克隆抗体,用于小肠结肠炎耶尔森菌O:8血清型菌株鉴定,具有良好的特异性,避免了免疫血清难以避免的交叉凝集现象。

小肠结肠炎耶尔森氏菌不同温度下生长预测模型的初步研究

目的研究小肠结肠炎耶尔森氏菌（以下简称耶氏菌）O：3和O：9血清型在增菌液MTSB中关于温度的生长模型。方法用液体稀释法计细菌总量，并应用此模型来预测耶氏菌O：3和O：9血清型在有效的生长温度下的生长速率，世代时间，迟缓期及不同时间的生长菌数．并比较相同条件下耶氏菌O：3与O：9血清型之间生长速率的差异。结果耶氏菌O：3血清型的最低生长温度为-17．8℃，耶氏菌O：9血清型的最低生长温度为-10．3℃，在增菌液MTSB中的生长模型：耶氏菌O：3血清型为√M=0．0134（T-255．1866），耶氏菌O：9血清型为√M：0．0173（T-262．7457）。结论在4～30℃的温度范围内，它们的生长速率都随着温度的升高而增加，而在4℃到15．7℃之间时，耶氏菌O：3血清型的生长速率大于耶氏菌O：9血清型，在15．7～30℃之间时，则耶氏菌O：9血清型的生长速率大于耶氏菌O：3血清型。

小肠结肠炎耶尔森菌不同pH值下生长模型的研究

目的:了解pH对小肠结肠炎耶尔森菌生长繁殖的影响,推导出该菌在某一温度下关于pH的生长预测模型。方法:用液体稀释法计细菌总量,再按对数法作出同一温度不同pH值下的生长曲线,将得到的不同pH值下的生长速率结合微生物预测模型理论建立生长速率与pH的关系模型。结果:在3个pH值下该菌延滞期的长短依次为:pH 5.5>pH 8.5>pH 7.0;生长速率为:pH 8.5>pH 7.0>pH 5.5;20℃时本菌(O:3血清型)的生长速率关于pH的生长预测模型符合Arrhenn ius关系式,为lnR=-0.076pH2+1.2005pH-5.3306。结论:实验表明该菌最适于微碱条件下生长,对酸性条件的非常敏感度;20℃时本菌(O:3血清型)的最适pH为7.898。

宁夏地区小肠结肠炎耶尔氏森菌监测分析

目的:探讨宁夏地区小肠结肠炎耶尔森氏菌感染性腹泻及其合并症的流行状况、宿主分布情况、流行菌株的型别和毒力特征。方法:采集动物和腹泻患者粪便标本以及鼠疫自然疫源地野生鼠盲肠内容物进行小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌培养,并对阳性菌株进行血清学分型和毒力基因检测。结果:样本分离出56株小肠结肠炎耶尔森氏菌,猪的带菌率最高,总的阳性率9.4%,其余样本未分离到菌株。所分离菌株的血清型主要以O:3、O:5、O:8、O:9为主,其中致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型以O:3为主,O:9次之,O:5、O:8为不致病或弱致病性菌株。对临床分离的56株菌进行ail、YstA、virF、YadA和YstB 5种毒力基因检测,其中O:3、O:9血清型菌株前4种毒力基因均为阳性。结论:本省小肠结肠炎耶尔森氏菌流行以O:3血清型为主,猪为主要宿主。其中O:3、O:9血清型携带4种毒力基因,为致病菌株。

江苏省小肠结肠炎耶尔森氏菌储存宿主调查报告

小肠结肠炎耶尔森氏菌(简称耶尔森氏菌)广泛分布于家畜、家禽,野生动物和外环境,通过食品等途径感染给人,引起耶尔森氏病。本病属于人兽共患性疾病,对人和家畜都可造成威胁,我省在全国耶氏菌科研协作组的统一布置下。

内蒙古敖汉旗首次发现O∶3血清型小肠结肠炎耶尔森菌

目的了解敖汉旗境内鼠类,家畜家禽携带小肠结肠炎耶尔森菌（以下简称为小肠结肠炎菌）情况,为疾病防治工作提供科学依据。方法在敖汉旗长胜乡随机采集鼠类、家畜家禽粪便等样品,对小肠结肠炎菌进行分离、培养、鉴定并分型,用PCR方法进行毒力因子测定。结果 2011~2012年共检验各类样品381份,检出小肠结肠炎菌7株,2011年检出的7株为生物1A和3型,生物3型的2株菌均为O∶3血清型,均携带ail,ystA,yadA,virF,rfbc毒力基因。结论猪是致病性小肠结肠炎菌重要的携带者,敖汉旗境内的猪体内具有携带O∶3血清型小肠结肠炎菌。

小肠结肠炎耶尔森氏菌O_3血清型生物3型菌株的致病性

许多国家已经报道小肠结肠炎耶尔森氏菌 O3血清型生物4型、O8血清型生物1型、O9血清型生物2型和 O5∶27血清型生物2型菌株是引起人胃肠炎及导致败血症或继发性后遗症(如关节炎等)的病原菌。在日本,已从临床病例及健康动物中分离到 O3血清型生物4型菌株。但有学者从临床和健康猪体内分离到一种属于 O3血清型生物3型的小肠结肠炎耶尔森氏菌,该菌株发酵乳糖、木糖和山梨糖,VP 反应阴性。

温州市食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌分布及分子分型研究

目的 了解温州市食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的分子分型及分布特征。方法 4℃增菌后用选择性培养基对食品中的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行分离鉴定,分析阳性菌株的生物型、血清型、毒力基因型、耐药性和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子型别。结果 采集6类食品,共676份样品,其中68份样品检出69株小肠结肠炎耶尔森氏菌,检出率为10.1%(68/676)。调理肉制品检出率最高(20.5%,9/44),其次为速冻食品(17.2%,11/64)。95.7%(66/69)的分离株为生物1A型,生物血清型以1A/O∶5(29.0%)为主,其次为1A/O∶8(14.5%);88.4%(61/69)的菌株仅携带ystB基因,检出1株4/O∶3型菌株携带毒力基因ail、ystA、yadA、virF。分离株对14种抗菌药物的敏感率达到94%以上。32株血清已分型菌株,分为29种PFGE带型。结论 温州市食品中存在一定程度的小肠结肠炎耶尔森氏菌污染,且检出致病性小肠结肠炎耶尔森菌,菌株耐药率处于较低水平,分子分型提示菌株呈高度遗传多态性。

2011～2012年赤峰市松山区动物中检出41株小肠结肠炎耶尔森菌

目的了解赤峰市松山区境内鼠类,家畜家禽携带小肠结肠炎耶尔森菌情况,为疾病预防控制工作提供科学依据。方法采集鼠类、家畜家禽的粪便、脏器等样品,进行小肠结肠炎耶尔森菌的分离、培养、鉴定和生物血清分型,并用PCR方法进行毒力因子检测。结果 2011～2012年共检验各类样品412份,检出小肠结肠炎耶尔森菌41株,皆来自猪咽拭子。2011年总检出率为16.02%,猪咽拭子的检出率高达28.28%。41株小肠结肠炎耶尔森菌中,携带了ail,ystA,yadA,virF,rfbc基因的3/O:3生物血清型菌株占95.12%;4/O:4生物血清型菌株占2.32%;其他占2.32%。结论赤峰市松山区境内的猪咽部携带小肠结肠炎耶尔森菌,猪是致病性小肠结肠炎耶尔森菌的重要携带者。

食源性疾病的流行菌株及流行趋势

食源性疾病对公众健康可产生巨大危害,估计美国每年约有六百万到八千万病例,约五百到九千人死亡,经济损失约为五十亿美元。有的食源性疾病看似温和,但后遗症可能是很严重的,例如:沙门氏菌可引起败血症;非伤寒沙门氏菌和小肠结肠炎耶尔森氏菌可引起Arthritis反应;弓形体病是先天性畸形的主要致病因素等。