发酵棉籽粕对育肥猪生长性能、蛋白酶活性及肠道小肽转运载体的影响

文章旨在研究发酵棉籽粕对育肥猪生长性能,蛋白酶活性及肠道小肽转运载体的影响。试验将200头体重(36.49±1.34)kg的育肥猪分为4组,每组5个重复,每个重复10只。各组分别使用0%、1%、2%和4%的发酵棉籽粕替换豆粕。试验为期100d,预饲期10d,正试期90d。在初重无显著差异的基础上(P>0.05)添加2%和4%的发酵棉籽组肥猪的FBW显著降低3.12%和3.83%(P<0.05);添加2%和4%的发酵棉籽组肥猪的ADG显著降低4.44%和5.57%(P<0.05);添加2%和4%的发酵棉籽组肥猪的料重比显著提高5.51%和5.57%(P<0.05)。添加2%和4%的发酵棉籽组肥猪的十二指肠胃蛋白酶活性显著降低(P<0.05);添加4%的发酵棉籽组肥猪的空肠胃蛋白酶和胰蛋白酶活性均显著降低(P<0.05)。添加2%和4%的发酵棉籽组肥猪的十二指肠CAT1和PepT1基因表达显著降低(P<0.05);添加1%~4%的发酵棉籽组肥猪的空肠CAT1和PepT1基因表达显著降低(P<0.05);添加1%~4%的发酵棉籽组肥猪的回肠CAT1基因表达显著降低(P<0.05)。总之,发酵棉籽可能通过下调肥猪肠道蛋白酶活性和小肽转运载体mRNA表达影响肠道蛋白和氨基酸消化吸收,从而抑制育肥猪生长。

小肽转运载体1的生物学特性及其功能

小肽转运载体1(PepT1)是H+/肽偶联的转运载体。该载体通过利用肠腔到肠细胞的质子梯度来转运二肽和三肽。PepT1对游离氨基酸、多肽在动物肠道内的转运调控具有重要作用。本文综述了PepT1的分类、生物学特征及功能,并探讨了影响PepT1活性调控的因素。

鳜小肽转运载体PepT1基因分子特征及其表达研究

小肽转运载体(PepT1)是低亲和力、高容量的肽转运载体,在小肽的吸收过程中发挥着重要的作用。研究采用同源克隆和RACE技术克隆了鳜鱼(Siniperca chuatsi)PepT1基因全长cDNA序列,其cDNA序列全长为2480 bp,包含43 bp的5′UTR序列,232 bp的3′UTR序列,以及2205 bp开放阅读框,编码735个氨基酸。氨基酸序列同源性分析结果显示,鳜鱼与石斑鱼(Epinephelus aeneus)、鲈鱼(Dicentrarchus labrax)PepT1间同源性均为89%,与其他非鱼类物种的同源性则在46%—56%。经预测,鳜鱼PepT1编码蛋白的分子量为64.8 kD,等电点为8.97,该蛋白具有与哺乳动物同源蛋白相似的12个螺旋跨膜结构,并且在跨膜区9和10之间有一个大的外环;跨膜区氨基酸高度保守,并存在有5个膜外N-糖基化位点和3个膜内含蛋白激酶C基序的相同区域。实时荧光定量表达分析表明,鳜鱼PepT1基因在前肠和中肠中表达量显著高于后肠(P<0.05),这说明前、中肠是鳜鱼肠道吸收小肽的主要部位;在胚后不同发育阶段鳜鱼前肠均能检测到PepT1基因的表达,并且在10 g个体中表达量最高,之后随着体重的增加其表达量维持在一个稳定水平。本研究结果首次报道了鳜鱼PepT1基因全序列及其分子表达特征,为鱼类营养及生理学的研究提供有价值的参考资料。

小肽转运蛋白(PepT1)及其活性调控

小肽是蛋白质消化的主要产物,在氨基酸消化、吸收以及动物营养代谢中起着重要的作用。小肽转运蛋白(PepT 1和PepT 2)的克隆揭示了动物小肽转运的机制。主要综述了小肽转运蛋白(PepT 1)的分子结构特征,PepT 1 mRNA在不同动物、不同组织中的分布,以及各种因素对PepT 1转运活性的影响,并就需要进一步深入研究的问题进行了探讨。

小肽转运载体的分子营养学的研究进展

目前动物体内的小肽转运载体发现的至少有五种,其中研究最为广泛的是PepT l和PepT 2。PepT 1和PepT 2都是依质子的寡肽转运载体(POT)家族的成员。PepT 1是低亲和力、高容量的肽载体,PepT 2是高亲和力、低容量的肽载体。PepT l主要在消化道中表达,在肾脏中也有微弱的表达:PepT 2主要在肾脏中表达。本文主要对小肽转运载体的组织分布、分子结构特征以及影响小肽转运载体转运的因素等方面的研究进展作一综述。

小肽转运载体2及其在乳腺泌乳中的作用

作为一种潜在的重要的乳腺小肽转运系统,PepT2在乳腺氨基酸氮转运、降低乳汁药物分布以及乳腺疾病治疗方面都起到重要作用。对PepT2在乳腺中作用的深入研究在泌乳生理和临床治疗上都有着非常重要的意义。本文主要从PepT2的蛋白质结构与功能、底物转运特性、表达调控以及其在泌乳生理中的作用4个方面进行简要综述。

小肽转运载体(PepT1和PepT2)研究进展

由小肽转运载体介导的小肽吸收对动物的生长和发育有着特殊的作用,因此,对小肽转运载体的深入研究在生理、药理和临床上都有着非常重要的意义。文中主要从小肽转运载体(PepT1和PepT2)的蛋白质分子结构与功能、主要的组织分布和影响其活性的因素三方面进行简要综述。

饲粮精粗比对犊牛肠道小肽转运蛋白mRNA表达的影响

本试验旨在研究不同精粗比颗粒料对犊牛肠道黏膜小肽转运蛋白Pep T1、Pep T2、PHT1和PHT2 mRNA表达的影响。选择日龄、体重相近的中国荷斯坦公犊牛6头,分为2个处理,每个处理3头,各处理精粗比分别为75∶25(Ⅰ)和65∶35(Ⅱ),预试期14 d,正试期56 d。结果表明:1)十二指肠和空肠Pep T1 mRNA表达丰度极显著高于回肠、盲肠和结肠(P<0.01);处理Ⅰ犊牛十二指肠和空肠Pep T1 mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01);2)与Pep T1 mRNA相比,Pep T2 mRNA在犊牛肠道中表达丰度较低;处理Ⅰ十二指肠和结肠Pep T2 mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01);3)处理Ⅰ盲肠PHT1 mRNA表达丰度极显著低于处理Ⅱ(P<0.01),处理Ⅰ犊牛回肠和结肠PHT1 mRNA表达丰度显著高于处理Ⅱ(P<0.05);4)处理Ⅰ犊牛盲肠PHT2 mRNA表达丰度极显著低于处理Ⅱ(P<0.01),处理Ⅰ犊牛十二指肠和结肠PHT2mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01)。以上结果说明,与精粗比为65∶35的饲粮相比,精粗比为75∶25的饲粮更能够促进犊牛肠道中Pep T1、Pep T2、PHT1和PHT2 mRNA的表达。

影响小肽转运蛋白表达的因素

小肽转运蛋白的活性和表达量直接影响小肽的吸收。文章主要介绍了日粮、激素、疾病等因素对小肽转运蛋白表达的影响。

小肽转运蛋白(PepT1)的活性调节

小肽是蛋白质在动物体内消化的主要产物,而位于小肠刷状缘膜上的小肽转运蛋白(PepT1)在小肽的吸收过程中发挥着重要作用,因此PepT1的活性直接影响小肽的吸收。文中主要介绍底物、营养不良、激素、昼夜节律和生长发育对PepT1的活性调节。

饲粮精粗比对马肠道小肽转运蛋白mRNA表达的影响

试验研究日粮精粗比对马肠道小肽转运蛋白mRNA表达的影响。选取(102±4)日龄、体重(120.14±4.06)kg的6匹马,分为2个处理,每个处理3个重复。处理Ⅰ的日粮精粗比为75∶25,处理Ⅱ的日粮精粗比为65∶35。预试期14 d,正式试验期56 d。结果显示,马十二指肠和空肠的PepT1 m RNA表达丰度极显著高于回肠、盲肠和结肠(P<0.01),结肠PepT1 mRNA表达丰度显著高于盲肠(P<0.05)。与处理Ⅱ相比,处理Ⅰ的马十二指肠、空肠和结肠PepT1 mRNA表达丰度显著升高(P<0.05),十二指肠、回肠的PepT2 m RNA表达丰度极显著升高(P<0.01)。处理Ⅰ的盲肠PHT1 mRNA表达丰度极显著低于处理Ⅱ(P<0.01);处理Ⅰ的回肠和结肠PHT1 mRNA表达丰度显著高于处理Ⅱ(P<0.05)。处理Ⅰ的马十二指肠、结肠PHT2 mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01),盲肠PHT2 mRNA表达丰度极显著低于处理Ⅱ(P<0.01)。研究表明,与精粗比为65∶35的日粮相比,精粗比为75∶25的日粮能够促进马肠道中小肽转运蛋白mRNA的表达。

肠道氨基酸和小肽转运载体的基因表达、影响因素与分子调控机制

饲粮蛋白质在瘤胃或肠道被降解成多肽,并进一步被分解成氨基酸和小肽,然后被吸收、利用。肠道氨基酸的转运受多种氨基酸转运载体,如中性、酸性和碱性氨基酸转运载体等的调节,小肽的转运则由小肽转运载体1介导。目前,对氨基酸及小肽转运载体基因的表达和功能调节相关的分子机制还不清楚,有待于进一步研究。本文综述了动物小肠肽与氨基酸转运载体等,重点介绍了其基因表达调节的分子机制、影响因素以及营养调控方面的研究进展。

鱼类小肽转运载体PepT1研究进展

小肽作为蛋白质主要的消化产物,与氨基酸的吸收是两个相互独立的转运系统。Peptide Transporter 1(PepT1)是其中一种重要的小肽转运载体。文章就鱼类PepT1的分子特点,PepT1 cDNA的克隆与表达,以及PepT1的转运机制等研究作一综述。

电针“足三里”穴对脾气虚大鼠小肽转运体表达的影响

目的:探讨电针"足三里"穴对脾气虚模型大鼠小肠黏膜组织内的小肽转运体(PepT1)的蛋白及基因表达的影响。方法:将40只SD雄性大鼠按照随机数字表法随机分为正常组、脾气虚组、足三里组、非经非穴组,每组10只。大鼠均统一饲养于SPF级动物实验中心。正常组给予正常饮食,其余3组均采用不规则饮食和劳倦过度复合法建立脾气虚证大鼠模型。造模成功之后,对足三里组进行电针"足三里"穴、非经非穴组大鼠电针非经非穴点干预处理7 d。观察各组大鼠免疫器官胸腺指数及脾脏指数的变化;观测各组大鼠小肠推进率;采用HE染色法观察各组大鼠小肠黏膜组织形态的变化;采用蛋白质免疫印迹法检测大鼠小肠黏膜组织内的PepT1的蛋白含量变化;采用荧光定量PCR法检测大鼠小肠黏膜组织的PepT1的mRNA表达水平。结果:脾虚组大鼠的胸腺和脾脏质量以及小肠推进率都明显低于正常组,足三里组相比于脾虚组有所升高;HE染色结果示:与正常组相比,脾气虚组大鼠小肠黏膜组织有萎缩、糜烂等改变,足三里组的组织形态较脾气虚组大鼠相比有所恢复;WB及PCR结果示:与正常组相比,脾气虚组大鼠小肠黏膜组织内的PepT1蛋白和基因表达水平均明显低于正常组(P<0.05);与脾气虚组相比,足三里组大鼠小肠黏膜组织内的PepT1蛋白和基因表达水平有所升高(P<0.05),非经非穴组未见显著性差异(P>0.05)。结论:电针"足三里"穴可以调控脾气虚大鼠小肠黏膜组织内的PepT1蛋白及基因的异常表达,参与小肠对蛋白质的吸收作用,进而改善脾气虚证。

配合饲料替代活饵对鳜生长性能、消化功能及小肽转运载体基因表达的影响

【目的】比较投喂活饵鱼和配合饲料对鳜(Siniperca chuatsi)生长性能、消化功能及肠道PepT1基因表达的影响,明确其摄食配合饲料后的消化、吸收生理变化,为提高鳜对配合饲料的利用效果提供理论依据。【方法】挑选驯化鳜鱼苗(初始平均体质量5.92±1.41 g)和未驯化鳜鱼苗(初始平均体质量6.06±1.73 g)各300尾,分别使用配合饲料或活饵鱼喂养30 d,饲养结束后测定分析其生长性能、肌肉成分、消化道结构、消化酶活性及小肽转运载体(PepT1)基因表达情况。【结果】配合饲料组鳜的终末平均体质量、总摄食量、尾摄食量、饵料系数、日增重量、日增重率、特定生长率、蛋白质效率、存活率及肥满度均极显著低于活饵鱼组鳜(P<0.01,下同),脏体比和肝体比显著高于活饵鱼组鳜(P<0.05,下同)。以配合饲料替代活饵鱼投喂鳜,对其肌肉成分有明显影响,具体表现为鳜肌肉水分含量极显著低于活饵鱼组鳜,粗蛋白含量显著高于活饵鱼组鳜。在消化酶活性方面,配合饲料组鳜的幽门盲囊胰蛋白酶活性极显著低于活饵鱼组鳜,幽门盲囊脂肪酶活性显著低于活饵鱼组鳜,但肝脏和肠道中的消化酶活性无显著差异(P>0.05,下同);配合饲料组鳜的肝细胞排列松散,肝细胞间有脂肪堆积,胃、肠道肌层及胃黏膜下层厚度极显著小于活饵鱼组鳜,肠道单个褶皱绒毛层杯状细胞数极显著多于活饵鱼组鳜,幽门盲囊褶皱间距极显著大于活饵鱼组鳜。PepT1基因在鳜肠道中的相对表达量表现为前肠>中肠>后肠,且在前肠表现为配合饲料组鳜极显著低于活饵鱼组鳜,在中肠和后肠则表现为差异不显著。【结论】鳜对配合饲料的摄食量和利用率均低于活饵鱼,消化道组织结构及其消化酶活性也因摄食配合饲料发生适应性变化。投喂配合饲料显著影响鳜的消化吸收功能和生长性能,因此,还需针对其摄食和代谢特性进一步改良配合饲料的营养组分或优化鳜的配合饲料驯化技术。

蛋氨酸三肽对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白和小肽转运载体基因表达量的影响

本试验旨在研究蛋氨酸三肽(Met-Met-Met)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)酪蛋白和小肽转运载体基因表达量的影响。采用酶消化法培养的第3代奶牛乳腺上皮细胞为模型,各处理在培养基中分别添加0(对照)、40、50、60、70和80μg/mL的蛋氨酸三肽,每个处理5个重复,每个重复1个培养孔,分别培养细胞24、48和72h,检测奶牛乳腺上皮细胞的相对增殖率,整体试验重复2次,确定最佳培养时间;各处理在培养基中分别添加0(对照)、40、50、60、70和80μg/mL的蛋氨酸三肽,每个处理3个重复,每个重复1个培养孔,以最佳培养时间培养,用实时定量PCR法检测酪蛋白基因的表达量,确定适宜蛋氨酸三肽浓度,整体试验重复3次;以最佳培养时间和适宜蛋氨酸三肽浓度培养细胞,以未添加蛋氨酸三肽的培养基为对照,每个处理3个重复,每个重复1个培养孔,测定小肽转运载体基因的表达量,整体试验重复3次。结果表明:在培养基中添加蛋氨酸三肽培养奶牛乳腺上皮细胞24h时,相对增殖率最高;培养基中加入60μg/mL的蛋氨酸三肽培养细胞24h,αs1-酪蛋白和β-酪蛋白的基因表达量最高,同时发现奶牛乳腺上皮细胞中小肽转运载体1和小肽转运载体2基因表达量显著高于对照处理(P<0.05)。综上所述,培养基中添加60μg/mL的蛋氨酸三肽能够提高奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白和肽转运载体基因的表达量。

驴小肽转运载体1基因的克隆、序列分析及组织表达研究

小肽转运载体1(PepT1)在动物肠道小肽的摄取过程中发挥重要作用。本试验旨在研究驴(Equus asinus)PepT1(ePepT1)基因的分子克隆、序列分析和组织表达。提取驴肠道组织总RNA,PCR克隆ePepT1基因片段,测序验证并进行序列分析;采用实时荧光定量PCR(real⁃time qPCR)方法分别测定驴肾脏、脾脏、心脏、肝脏、肺脏、胃、十二指肠、空肠和回肠组织中ePepT1基因的相对表达量。结果表明:ePepT1开放阅读框为2124 bp,共编码707个氨基酸残基。蛋白质理化性质预测显示,ePepT1蛋白分子质量为78.6 ku,等电点为7.52,具有11个跨膜区(TMD),且TMD 9和TMD 10之间有1个大的细胞外环;ePepT1蛋白有5个胞外N-糖基化位点,5个胞外蛋白激酶C(PKC)作用位点和3个蛋白激酶A(PKA)作用位点。组织分布研究发现,ePepT1基因在各组织均有表达,但在肠道(十二指肠、空肠和回肠)中相对表达量最高。综上所述,本研究首次克隆了ePepT1基因,研究了其组织表达规律,为进一步研究驴肠道小肽吸收提供了基础。

小肽转运载体PEPT1及其在新药创制中的应用

针对某种转运体或受体对难吸收的药物进行结构改造，合成前药来提高口服生物利用度是现在组合化学的新思路。小肠上皮中有多种转运体参与药物的吸收转运，肽类转运体就是其中一大类。迄今为止，肽类转运体已经发现了PEPT1、PT1、PTR3和PHT1等。其中对小肽转运载体PEPT1（peptidetransporterl）功能的研究是目前的热点。

鱼类肠道小肽转运载体PepT1的研究进展

从生理特性,cDNA序列和蛋白质分子结构,组织分布与表达这三个方面叙述了欧洲鳗鲡(An-guilla anguilla),罗非鱼(Oreochromis mossambicus),rockfish(Sebastes caurinus),银鱼(Chionodraco hama-tus),斑马鱼(Danio rerio),亚洲泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),大西洋鳕鱼(Gadus morhua)和欧洲黑鲈(Dicentrarchus labrax)中有关肠道Ⅰ型肽转运载体(PepT1)方面的研究进展情况。

鱼类小肽转运载体PepT1研究进展

小肽作为蛋白质主要的消化产物,与氨基酸的吸收是两个相互独立的转运系统。PepT1是其中一种重要的小肽转运载体。文章就鱼类PepT1的分子特点、PepT1 cDNA的克隆与表达以及PepT1的转运机制等研究作一综述。