中药调控小胶质细胞极化改善抑郁症研究进展

抑郁症是危害人类健康生活的常见精神类疾病,其发病机制尚未明确。目前认为神经炎症假说与抑郁症病理生理关系密切。该假说提出,在抑郁症病程中,持续的刺激过度激活小胶质细胞(Microglia, MG)的M1极化表型,通过分泌大量促炎因子,造成脑部病理损伤,加重抑郁的病理发展。因而通过调控MG极化表型,可能是改善抑郁症的一种有效干预策略。临床会应用抗炎药物改善患者抑郁情绪,虽然有一定的疗效,但存在适用范围窄、不良反应明显等局限性。中药具有多靶点、多途径的特点,其药性内容丰富且复杂。近年来,研究发现诸多中药通过修复线粒体功能障碍、促进脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)、调节蛋白表达、调节神经炎症反应等机制发挥了抗抑郁作用。因此,以MG为治疗靶点,对中药和复方减轻神经炎症改善抑郁症的文献研究进行梳理和探讨,期望为临床治疗抑郁症提供新的治疗思路。

电针调控小胶质细胞极化对脑卒中肢体痉挛大鼠的影响

目的观察电针对脑卒中肢体痉挛(PSS)大鼠的影响及小胶质细胞极化介导的神经炎症与大脑皮层神经递质谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)的关系,研究其缓解PSS的可能机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组10只。采用线栓法联合内囊注射N-甲基-D-天冬氨酸受体制备PSS大鼠模型。电针组选取“曲池”“阳陵泉”电针,30 min/d,连续7 d。模型组与假手术组进行同期固定,不予干预。对大鼠进行Zea Longa神经功能评分、改良Ashworth肌张力评分、电生理检测,试剂盒检测缺血侧皮质GABA、Glu、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量,Western blot检测缺血侧皮质γ-氨基丁酸A受体α1(GABRA1)、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)蛋白表达,免疫荧光染色检测缺血侧皮质离子化钙结合适配分子1(Iba-1)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)共表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分、肌张力评分均显著升高(P<0.01),肌张力显著增加(P<0.01);缺血侧皮质GABA、IL-10含量显著减少(P<0.01),TNF-α、Glu含量显著增加(P<0.01),Glu/GABA比值增加(P<0.01),GABRA1、GAD67蛋白表达显著降低(P<0.01),Iba-1与iNOS共表达显著增强(P<0.01),Iba-1与Arg-1共表达显著减弱(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠神经功能评分、肌张力评分均显著降低(P<0.05),肌张力显著减小(P<0.01);缺血侧皮质GABA、IL-10含量显著增加(P<0.01),TNF-α、Glu含量显著减少(P<0.01),Glu/GABA比值减少(P<0.01),GABRA1、GAD67蛋白表达显著升高(P<0.01),Iba-1和iNOS共表达显著减弱(P<0.01),Iba-1与Arg-1共表达显著增强(P<0.05)。结论电针能有效缓解PSS,其作用机制可能与调控小胶质细胞极化、减轻神经炎症有关。

lncRNA NEAT1沉默通过IL-10/STAT3信号通路调节小胶质细胞极化对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

目的探讨长链非编码RNA核富集转录体1(lncRNA NEAT1)沉默通过白细胞介素(IL)-10/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路调节小胶质细胞极化对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CIRI组、CIRI+si-NC组、CIRI+si-NEAT1组,每组24只。除Sham组外,其余各组大鼠采用线栓法构建CIRI模型。建模结束后,各组大鼠给予对应处理7 d。对大鼠神经功能缺损进行评分;观察脑组织病理学变化;检测脑梗死体积百分比,脑组织中离子钙接头蛋白分子1阳性(Iba1+)细胞中M1型、M2型极化标志物阳性(Iba1+CD86+、Iba1+CD206+)细胞的数量,IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10,lncRNA NEAT1、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)、IL-10 mRNA,IL-10、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果与Sham组相比,CIRI组大鼠脑组织病理损伤严重,神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、脑组织中Iba1+CD86+、Iba1+CD206+阳性细胞数量、CD86/CD206比值、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10水平、lncRNA NEAT1、iNOS、Arg-1、IL-10 mRNA水平、IL-10、p-STAT3/STAT3蛋白水平显著升高(P<0.05);与CIRI组和CIRI+si-NC组相比,CIRI+si-NEAT1组大鼠脑组织病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、脑组织中Iba1+CD86+阳性细胞数量、CD86/CD206比值、IL-1β、TNF-α水平、lncRNA NEAT1、iNOS mRNA水平显著降低(P<0.05),Iba1+CD206+阳性细胞数量、IL-4、IL-10水平、Arg-1、IL-10 mRNA、IL-10、p-STAT3/STAT3蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论沉默lncRNA NEAT1可能通过激活IL-10/STAT3信号通路,调控小胶质细胞极化,从而改善CIRI大鼠脑组织损伤。

小胶质细胞极化在视网膜退行性疾病发病过程中的作用研究进展

小胶质细胞参与视网膜退行性疾病的发生和发展,小胶质细胞的激活是视网膜退行性疾病发生的共同标志。小胶质细胞可以被不同的外部刺激因素激活,细胞极化为功能状态和表面标志物不同的两种表型。经典激活途径产生M1型小胶质细胞,主要发挥促炎和神经毒性作用;选择性激活途径产生M2型小胶质细胞,主要发挥抗炎及神经保护作用。精准地调控小胶质细胞的极化是治疗视网膜退行性疾病极具潜力的方法。本文对小胶质细胞极化在视网膜退行性疾病发病过程中的作用进行综述,旨在为视网膜退行性疾病的治疗开辟新的途径和研究思路。

基于JAK2/STAT3通路分析姜黄素对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响

目的探讨姜黄素(CUR)对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响,并通过JAK2/STAT3通路探讨其机制,以期为CUR的临床应用提供理论依据。方法健康雄性成年Sprague Dawley大鼠36只,随机分为假手术(Sham)组、RIRI组与CUR组,每组各12只。RIRI组和CUR组大鼠右眼采用高眼压法建立RIRI模型,Sham组仅将针头刺入大鼠右眼前房,不升高眼压。CUR组大鼠于建模前30 min腹腔注射CUR(100 mg·kg^(-1)),RIRI组和Sham组大鼠腹腔注射等剂量生理盐水。造模后24 h,采用HE染色及免疫组织化学染色法观察各组大鼠视网膜形态及视网膜神经节细胞(RGC)数变化,Iba-1/CD16、Iba-1/Arg1免疫荧光双标法检测CUR对RIRI大鼠视网膜小胶质细胞极化的影响,免疫组织化学结合Western blot检测观察CUR对RIRI大鼠RGC及JAK2/STAT3通路信号分子表达的影响。结果HE染色及免疫组织化学染色结果显示,Sham组大鼠视网膜细胞排列整齐,神经节细胞层见大量Brn-3a^(+)细胞(即RGC);与Sham组相比,造模后24 h,RIRI组大鼠内层视网膜厚度显著增加、RGC数显著减少,而CUR组大鼠内层视网膜厚度较RIRI组显著变薄,RGC数显著多于RIRI组(均为P<0.05)。免疫荧光双标染色结果显示,RIRI组大鼠视网膜Iba-1^(+)CD16^(+)细胞(M1型小胶质细胞)数较Sham组显著增加,而CUR组大鼠视网膜Iba-1^(+)CD16^(+)细胞数显著少于RIRI组,但仍多于Sham组(均为P<0.05);RIRI组大鼠视网膜Iba-1^(+)Arg1^(+)细胞(M2型胶质细胞)数较Sham组增加,而CUR组大鼠视网膜Iba-1^(+)Arg1^(+)细胞数显著高于RIRI组(均为P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,与Sham组相比,RIRI组大鼠视网膜p-JAK2^(+)、p-STAT3^(+)细胞数均较Sham组增多,而CUR组大鼠视网膜p-JAK2^(+)、p-STAT3^(+)细胞数均显著少于RIRI组(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,Sham组大鼠视网膜p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平较低;造模后24 h,RIRI组大鼠视网膜p-JAK2和p-STAT3蛋白表达显著升高,而CUR组大鼠视网膜p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量均较RIRI组显著下降,但仍高于Sham组(均为P<0.05)。结论CUR可调控小胶质细胞由M1型向M2型极化,从而减轻大鼠RIRI,具有神经保护作用,其机制可能与JAK2/STAT3信号通路激活有关。

小胶质细胞极化在卒中后认知障碍神经炎症损伤中的作用机制及中药药理的研究进展

神经炎症是卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)神经损伤、空间和记忆能力下降的主要机制之一。当中枢神经系统受到刺激时,小胶质细胞作为免疫效应细胞被激活,并通过自身表型转换启动免疫级联反应,释放细胞因子等参与神经炎症反应。诱导小胶质细胞从促炎性M1表型向抗炎性M2表型极化,能够促进组织神经功能的修复再生,减轻脑卒中损伤后的炎症反应和认知损害。中药单体、活性成分及复方可以靶向调节小胶质细胞表型转化,保护大脑神经元免受炎症影响,通过减少神经元凋亡来调节学习记忆能力。基于此,本文就小胶质细胞极化在PSCI神经炎症损伤中的作用及中医药潜在的调控机制进行综述,以期为中医药治疗PSCI提供新的研究思路。

MG53蛋白对创伤性脑损伤小鼠小胶质细胞极化和神经炎症的调控作用

目的:研究MG53蛋白对创伤性脑损伤(TBI)小鼠小胶质细胞极化和神经炎症的调控作用。方法:改良式自由落体法建立中度TBI小鼠模型,随机分为TBI组和MG53组,每组3只;免疫荧光检测脑组织中CD3、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、CD86、CD206和巢蛋白(Nestin)的表达;ELISA法检测血清IL-1β、TNF-α、IL-4和IL-10水平;qRT-PCR检测脑组织中CD86、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD206、精氨酸酶1(ARG1)、Nestin、双皮质醇(DCX)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)mRNA的表达;Western blot检测脑组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Cleaved-Caspase-1和IL-1β蛋白的表达。结果:与TBI组相比,MG53组小鼠脑组织中CD3、GFAP的表达减少,血清中促炎因子IL-1β和TNF-α水平降低,而抗炎因子IL-4和IL-10水平升高(P<0.05)。此外,与TBI组相比,MG53组小鼠脑组织中CD86和iNOS mRNA表达降低,而CD206、Nestin、DCX、BDNF和NGF mRNA表达增加(P<0.05)。与TBI组相比,MG53组小鼠NLRP3、Cleaved-Caspase-1和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05)。结论:MG53蛋白可能通过抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路,抑制小胶质细胞极化和神经炎症,进而对TBI小鼠发挥神经保护作用。

MCAO大鼠皮质小胶质细胞极化的研究及脑泰方Ⅱ号的干预

目的探讨局灶性脑缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠皮质小胶质细胞(microglia,MG)极化的变化规律,揭示脑泰方Ⅱ号调节MG极化的方式与特点。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、MCAO模型组、米诺环素组、脑泰方Ⅱ号组,于造模后d 1、3、5、7激光共聚焦观察MG形态;Real time-PCR法检测M1/M2型表面标记分子表达。结果 MCAO模型组MG胞体胀大,突触变粗、短,分支减少;脑泰方Ⅱ号可明显促进突触分支与MG增殖。模型组M1/M2型标志分子随时间被不同程度活化;脑泰方Ⅱ号自d 3后(米诺环素自d 1后)可逐步明显抑制M1型标记分子,促进M2型标记分子表达(P <0.05或P <0.01);脑泰方Ⅱ号对M1/M2型标记分子的调节作用均在d 5后明显优于米诺环素(P <0.05或P <0.01)。结论 MCAO大鼠皮质MG极化具有时序性;脑泰方Ⅱ号可抑制MG M1型极化,促进其M2型极化,其调节作用较米诺环素具有一定的滞后性,但显示出良好的持续性。

加味温胆汤对抑郁大鼠HMGB1/TLR4/NF-κB通路及小胶质细胞极化的影响

目的:探讨加味温胆汤对抑郁大鼠的作用机制。方法:将48只大鼠随机分为正常组、模型组、加味温胆汤组、氟西汀组每组各12只,除正常组外,其余各组采用孤养结合慢性不可预见性应激制备大鼠抑郁模型。旷场实验、糖水消耗实验检测大鼠行为学,苏木精-伊红染色观察海马区形态,免疫荧光染色观察小胶质细胞极化情况,ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-10、IL-4、IL-13水平,蛋白免疫印迹(western blot,WB)检测海马区高迁移率族蛋白B1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠海马区神经元排列紊乱,神经元形态异常,核深染甚至消失;加味温胆汤组和氟西汀组部分神经元排列较整齐,部分形态恢复;与正常组比较,模型组旷场实验水平穿越格数、竖立活动次数、糖水偏爱率、M2型小胶质细胞比例、血清中IL-10、IL-4、IL-13水平降低(P<0.05),M1型小胶质细胞比例,血清中TNF-α、IFN-γ、IL-1β水平,海马区HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白水平升高(P<0.05);加味温胆汤组上述指标均有明显改善(P<0.05)。结论:加味温胆汤可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路的激活和促进小胶质细胞从M1型向M2型转化,实现神经元的修复,对抑郁大鼠发挥保护作用。

M2型小胶质细胞极化促进少突胶质祖细胞的分化--促进多发性硬化症髓鞘再生的有效途径

中枢神经系统(central nervous system,CNS)持续性的自身免疫性炎症和髓鞘脱失是多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的典型病理特征,尤其以神经系统持续衰退导致慢性脱髓鞘轴突病变引起的继发-进展型MS(secondary progressive multiple sclerosis,SPMS)最为难治。有多种免疫细胞和神经细胞参与MS的疾病进程,但在CNS中主要负责炎症反应调节和髓鞘再生的分别为小胶质细胞(microglia,MG)和少突胶质祖细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)。在MS患者病灶部位发现具有MG M1/M2极化失衡和OPCs分化受阻导致的髓鞘再生障碍的现象,以往研究通常把MG的极化失衡和OPCs分化受阻当成两个独立的现象。但近期研究表明,两者之间存在交互式作用,MG极化失衡是导致OPCs分化受阻的核心机制之一,而OPCs也可反作用于MG,两者共同影响髓鞘的再生过程。在MS的治疗上,目前临床上治疗MS的药物只能对症治疗,无法根治MS。探索新的药物研发方向是目前MS临床治疗中亟待解决的关键科学问题。本研究就“从极化到分化”这一领域进行综述,聚焦于通过靶向MG极化失衡从而促进OPCs的分化和髓鞘再生的新策略,以期为MS及其他以CNS组织修复障碍为共同病理特征的神经退行性疾病的治疗提供新的药物研发方向。

IL-4调控小胶质细胞极化在血管性认知障碍中的作用机制研究进展

血管性痴呆(vascular dementia,VD)的核心症状是认知功能障碍。大脑缺血后小胶质细胞被激活,进而诱导神经炎症反应是血管性认知功能障碍发生的关键。既往部分研究认为,小胶质细胞在病理状态下主要发挥促炎作用,但近年来越来越多的研究发现,小胶质细胞极化后的不同表型可发挥不同的作用,提示小胶质细胞极化在VD机制研究中的重要地位。白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)作为诱导小胶质细胞从促炎的M1表型极化到抗炎的M2表型的重要调节因子,已被证明与学习认知的病理过程密切相关。本文着重对小胶质细胞极化在血管性认知障碍中的研究进展及IL-4在小胶质细胞极化转化过程中的作用机制进行综述,以期为血管性痴呆的治疗提供新的思路。

lncRNA LINC01089对氧糖剥夺/复氧损伤后小胶质细胞极化的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01089对小胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤后表型和炎症反应的影响及其机制。方法 体外培养小鼠小胶质细胞B-V2细胞,OGD/R损伤后,转染lncRNA LINC01089过表达质粒及其空载质粒、沉默质粒siRNA及阴性对照,以及miR-449c-5p模拟物、抑制剂及其阴性对照寡核苷酸。采用qRT-PCR检测M1型小胶质细胞标记物iNOS mRNA和CD86 mRNA、M2型小胶质细胞标记物Arg1 mRNA和CD206 MRNA、lncRNA LINC01089、miR-449c-5p的表达水平;采用ELISA检测细胞上清液炎性因子的含量;采用免疫印迹法检测细胞STAT6蛋白表达水平。荧光素酶报告基因实验验证lncRNA LINC01089与miR-449c-5p以及miR-449c-5p与STAT6的靶向关系。结果 OGD/R损伤后,B-V2细胞lncRNA LINC01089表达水平显著下调,miR-449c-5p表达水平显著上调。荧光素酶报告基因实验结果显示,lncRNA LINC01089靶向负调控miR-449c-5p表达,miR-449c-5p靶向负调控STAT6表达。过表达lncRNA LINC01089,显著降低M1型标记物iNOS mRNA和CD86 mRNA表达水平及细胞上清液促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,明显增高M2型标记物Arg-1 mRNA和CD206mRNA表达水平及细胞上清液抗炎因子IL-4、IL-10和TGF-β的含量。过表达lncRNA LINC01089可靶向负调控B-V2细胞miR-449c-5p表达,促进STAT6蛋白表达。结论 小胶质细胞OGD/R损伤后,lncRNA LINC01089表达下调,促使小胶质细胞向M1型转化,诱导炎症反应,其机制可能与靶向负调控miR-449c-5p/STAT6信号轴有关。

小胶质细胞极化在多发性硬化发病中的作用机制研究进展

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种以中枢神经系统(central nervous system,CNS)炎症反应和髓鞘脱失为主要病理特征的自身免疫性疾病,具有青壮年高发、致残率高等特点,具体发病机制尚不明确。研究发现,MS发病时CNS固有的免疫细胞—小胶质细胞向促炎态M1型极化,导致体内小胶质细胞M1/M2比率失衡,形成CNS促炎态的微环境,损害神经组织。受损神经组织进一步促进小胶质细胞极化,构成恶性循环,最终加重病情。小胶质细胞极化状态失衡是启动MS的关键病因,为此,本文将综述近年来国内外小胶质细胞在MS发病中作用机制的研究进展,旨在为进一步阐明MS发病机制及寻找潜在的治疗靶点提供借鉴。

丁苯酞对脑出血后小胶质细胞极化的影响及其机制

目的:脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)具有较高的发病率、致残率及病死率,寻找新的有效的ICH治疗方法具有重要意义。本文旨在探讨丁苯酞(butyphthalide,NBP)对ICH后继发性损伤和小胶质细胞极化的作用和机制。方法:将48只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为6组,分别为假手术24 h组、假手术72 h组、ICH24 h组、ICH 72 h组、ICH+NBP 24 h组、ICH+NBP 72 h组。术后评估神经功能缺损,采用蛋白质印迹法检测各组Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)、紧密连接蛋白、小胶质细胞不同表型的表达;采用ELISA检测炎症因子;采用免疫荧光染色检测小胶质细胞的极化情况。结果:1)与假手术组相比,ICH组中血肿周围脑组织TLR4(24 h:P<0.05;72 h:P<0.01)、NF-κB(均P<0.01)、Nrf2(均P<0.01)表达均增加,小胶质细胞激活增加(均P<0.01),血肿周围组织的促炎症因子IL-6(24 h:P<0.05;72 h:P<0.01)、TNF-α(均P<0.01)表达均增加,而抗炎因子IL-4表达均减少(均P<0.01),同时AQP4表达均增加(均P<0.01),紧密连接蛋白闭锁小带蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)与闭合蛋白(occludin)表达均下降(均P<0.01),大鼠的神经功能均受损(均P<0.01)。2)与ICH组相比,ICH+NBP组的血肿周围组织TLR4(均P<0.05)及NF-κB(均P<0.01)表达均下降,Nrf2表达上升(均P<0.05),M1型小胶质细胞标志物CD86表达均下降(均P<0.05),M2型小胶质细胞标志物CD206表达均上升(均P<0.01)。3)在炎症反应方面,与ICH组同时间点相比,ICH+NBP组IL-4表达均增加(24 h:P<0.05;72 h:P<0.01);ICH+NBP 72 h组IL-6较ICH 72 h组下降(P<0.01);ICH+NBP 24 h组的AQP4表达较ICH 24 h组明显下降(P<0.05),ICH+NBP 72 h组其表达与ICH 72 h组相比有下降趋势,但差异无明显统计学意义(P>0.05)。4)ICH+NBP组ZO-1表达较ICH组上升(24 h:P<0.05;72 h:P<0.01);与ICH组相比,ICH+NBP组大鼠神经缺损症状最终得到了改善(均P<0.05)。结论:ICH后TLR4/NF-κB通路活化,M1型小胶质细胞表达及促炎因子释放增加,抗炎因子表达减少,AQP4表达上调,血脑屏障紧密连接蛋白破坏,大鼠神经功能受损。NBP能够通过抑制TLR4/NF-κB、增加Nrf2表达而逆转ICH后小胶质细胞极化、神经炎症、血脑屏障的变化,从而起到神经保护的作用。

柚皮苷通过调节小胶质细胞极化对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的认知功能影响

目的探究柚皮苷(naringin)对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠小胶质细胞极化的调节效应及该效应对Aβ聚集和认知功能的影响。方法3月龄APPswe/PS1dE9转基因雄性小鼠随机分为模型组(APPswe/PS1dE9)和柚皮苷治疗组(APPswe/PS1dE9+柚皮苷100 mg/(kg·d)),选择年龄体重匹配同窝非转基因小鼠作为阴性对照组和柚皮苷单独给药组(柚皮苷100 mg/(kg·d)),对照组及模型组给予常规的标准鼠粮,APPswe/PS1dE9+柚皮苷组和柚皮苷单独给药组在常规标准鼠粮中加入100 mg/(kg·d)的柚皮苷治疗16周。新物体识别实验检测小鼠非空间短期记忆能力;酶联免疫吸附法检测柚皮苷对小鼠肝肾功能的影响;q-PCR检测小鼠脑组织中小胶质细胞M1型和M2型标记物的表达;免疫荧光染色检测活化小胶质细胞对Aβ的吞噬作用以及Aβ的含量。结果与对照组相比,模型组小鼠新物体识别实验中识别指数显著降低(P<0.05),脑组织M1型标记物(CD16、TNF-α、i NOS、MCP-1)的mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),而M2型标记物(CD206、TGF-β、Arg1、YM-1)的mRNA表达均显著降低(P<0.05),大脑皮层和海马的Aβ阳性区域明显增加(P<0.05)。与模型组相比,柚皮苷治疗组小鼠识别指数显著增加(P<0.05),M1型标记物mRNA表达水平均显著降低(P<0.05),M2型标记物mRNA表达均显著增加(P<0.05),促进小胶质细胞对Aβ的吞噬,Aβ免疫阳性区域显著减少(P<0.05)。各组之间小鼠肝肾功能各参数值无显著性差异(P>0.05)。结论柚皮苷通过调节小胶质细胞M1向M2的极化,进而促进活化的小胶质细胞对Aβ的吞噬,最终改善小鼠认知。

鱼藤酮对大鼠认知功能及其海马Warburg效应和小胶质细胞极化的影响

【目的】探究鱼藤酮(ROT)对大鼠认知功能及其海马Warburg效应和小胶质细胞极化的影响。【方法】雄性SD大鼠随机分为对照组和ROT处理组。ROT处理组大鼠颈背部皮下注射ROT(2 mg/kg),对照组注射等量的溶剂。Y迷宫实验和新物体识别实验评估大鼠的认知功能,Western blot检测海马Warburg效应相关蛋白己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK-1)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和小胶质细胞极化标志性蛋白诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、几丁质酶3样分子3(Ym-1)的表达水平,乳酸试剂盒检测海马组织乳酸含量,Griess法测定海马组织一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附测定法检测海马组织IL-1β、IL-4和TGF-β1含量。【结果】ROT处理组大鼠在Y迷宫实验中的正确交替率(P<0.05)和在新物体识别实验中的识别指数(P<0.001)较对照组降低,表明ROT损害大鼠的认知功能。ROT处理组大鼠海马组织HK2(P<0.05)、PKM2(P<0.01)、PDK-1(P<0.05)和LDHA(P<0.05)的表达下降,PDH的表达上升(P<0.05),乳酸的含量减少(P<0.05),表明ROT抑制大鼠海马Warburg效应。ROT处理组大鼠海马组织iNOS的表达增加(P<0.05)、NO的含量增加(P<0.05)、IL-1β的分泌增加(P<0.01)、Arg-1(P<0.01)和Ym-1(P<0.01)的表达降低、IL-4(P<0.05)和TGF-β1(P<0.05)的分泌减少,表明ROT促进大鼠海马小胶质细胞M1极化。【结论】ROT可破坏大鼠的认知功能、抑制海马Warburg效应、促进海马小胶质细胞M1极化。

红景天苷通过NF-κB途径调节小胶质细胞极化并减轻大鼠脊髓损伤后的神经炎症的机制

目的探讨红景天苷减轻大鼠脊髓损伤后神经炎症的作用及其机制是否与调节小胶质细胞极化有关。方法选择40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为5组,每组各8只。假手术组实施假手术,腹腔注射0.9%氯化钠溶液1 mL。模型组、红景天苷低、中、高剂量组造成脊髓损伤模型,模型组腹腔注射0.9%氯化钠溶液1 mL,红景天苷低、中、高剂量组分别腹腔注射10、20、40 mg·kg^(-1)·d^(-1),干预28 d。通过脊髓损伤行为学(BBB)评分和斜坡试验评估各组大鼠运动功能。实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测各组大鼠脊髓中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、核转录因子κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)的mRNA表达。蛋白质印迹检测其脊髓中磷酸化单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的蛋白表达情况。结果与假手术组大鼠相比,脊髓损伤模型组大鼠运动功能受损,脊髓中M2/M1极化比下降,Bax、NF-κB、iNOS和COX-2 mRNA水平显著升高,Bcl-2 mRNA水平显著下降,p-AMPK表达水平明显降低,p-mTOR的表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);红景天苷低、中、高剂量组可显著恢复大鼠运动功能,增加脊髓中M2/M1极化比,降低Bax、NF-κB、iNOS和COX-2 mRNA水平,增加Bcl-2、p-AMPK表达、减少p-mTOR的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,以红景天苷高剂量组作用最为显著。结论红景天苷可显著恢复脊髓损伤大鼠运动功能并减轻神经炎症,其机制主要通过调节小胶质细胞极化和AMPK/mTOR信号通路实现,且其作用效果存在一定剂量依赖。

小胶质细胞极化在抑郁症发病中的作用

应激可诱发抑郁症,严重影响人们的身心健康。小胶质细胞是中枢神经系统的主要免疫细胞,在各种神经退行性疾病中发挥重要作用。不同极化类型的小胶质细胞可分泌不同作用的炎症因子,介导神经炎症,与抑郁症的发生密切相关,但目前其机制尚不明确。抑郁症与应激、小胶质细胞极化和神经炎症等因素的相互作用有关。本文综述了小胶质细胞极化在抑郁症发病中的作用研究进展。

microRNAs调控小胶质细胞极化在神经炎症中的作用

microRNAs(miRNAs)是一类长度约为19-25个核苷酸稳定的内源性小分子非编码RNA,小胶质细胞是广泛分布于中枢神经系统的常驻免疫细胞,miRNAs与小胶质细胞的极化有着密切的关系。本文综述近年来促炎型/抗炎型miRNAs调控小胶质细胞M1型/M2型极化及其在相关炎症介导的神经系统疾病中的研究进展,充分阐明小胶质细胞极化过程中miRNAs调控机制,为寻找治疗与小胶质极化相关炎症介导的神经系统疾病的新靶点提供了有力的理论依据。

小胶质细胞极化在创伤性脑损伤中的作用及潜在的药物干预治疗靶点

创伤性脑损伤是一种由外部机械力引起的,对脑组织危害极大的疾病。小胶质细胞是中枢神经系统中的主要细胞成分,在神经系统的发育及神经元的形成等生理活动方面发挥着重要作用。本文综述小胶质细胞极化在创伤性脑损伤中的作用以及对治疗创伤性脑损伤可能有效的潜在药物。