白黄小脆柄菇和阴沟肠杆菌跨界融合条件优化及融合子SEM形态

对白黄小脆柄菇和阴沟肠杆菌的原生质体跨界融合进行条件优化,并对筛选出的融合子进行扫描电子显微镜观察,测定融合子的细胞形态。首先进行原生质体融合条件优化,在单因素实验的基础上采用三因素三水平的响应面分析,根据回归分析确定较优的融合条件为:PEG 34.9%、时间10.4min、温度36.4℃。然后用含抗生素的培养基对融合子进行初筛,将筛选出的11株融合子进行降解木质素研究,其中融合子PE-9经2天的培养后,木质素去除率达到了27.3%,具有良好的降解木质素潜力。最后将复筛的高效融合子PE-9与亲本菌株进行扫描电镜SEM比较观察。

白黄小脆柄菇发酵液中的一个新的血苋烷型倍半萜（英文）

从白黄小脆柄菇(Psathyrellacandolleana)发酵液提取物的乙酸乙酯层中分离得到一个新的血苋烷型倍半萜(1)和一个已知的没药烷型倍半萜(2)。通过质谱、核磁等方法确定化合物1的结构为15-hydroxy-drimenol。通过文献对照核磁数据确定化合物2为1α-hydroxy-bisabola-2,10-dien-4-one。

一株小脆柄菇的分离培养及木质素降解酶活性

【目的】为一株野生小脆柄菇开发利用奠定理论和实验基础。【方法】采用组织分离法获得菌株纯培养,提取菌丝体总DNA提取、ITS扩增与测序、BLAST在线比对,利用MEGA 7.0软件进行构建发育树,并计算遗传距离。综合菌丝生长速率和长势,确定其最适生长条件。采用光吸收法测定漆酶、锰过氧化物酶和木素过氧化物酶酶活。【结果】获得纯培养菌株,编号F1734,经鉴定为白黄小脆柄菇(Psathyrella candolleana)。菌丝最适生长条件结果表明:最适碳源为麦芽糖,最适氮源为胰蛋白胨,最适C/N比为10/1,最适温度范围为25~30℃,最适pH值范围为7.0~9.0。液体发酵产木质素降解酶结果表明,锰过氧化物酶在第7天时达到最大,为(186.32±7.29)U/mL;木素过氧化物酶在第5天时达到最大,为(4890.20±979.37)U/mL;发酵9d未测得胞外漆酶活性。【结论】F1734菌株为白黄小脆柄菇,营养需求简单,属于LiP-MnP类白腐真菌,为其进一步开发利用奠定试验基础。

沈阳天柱山小脆柄菇属真菌资源种类

采用随机踏查法,对沈阳天柱山小脆柄菇属真菌资源种类多样性进行了系统调查。结果表明:在天柱山区域内共计采集标本25份,鉴定出小脆柄菇属真菌13种,其中中国新纪录种2种、辽宁新纪录种6种。中国新纪录种为毕夫朗小脆柄菇(Psathyrella bifrons(Berk.)A.H.Sm.)和菜豆孢小脆柄菇(Psathyrella delineata(Pk.)Smith),并进行了形态学描述;同时对该区域内各种小脆柄菇资源真菌生长的生境林型、食药用价值以及国内分布情况进行了描述。

中国小脆柄菇属已知种类及其分布

对中国小脆柄菇属(Psathyrella)真菌进行了整理、修订,对有关分类学问题进行了讨论。中国小脆柄菇属真菌共51个名称记录,分布于26个省(自治区)。其中有18个分类单元引证了标本,2个记录的报道未提供形态描述,2个种存在错误拼写。

亚热带木腐真菌产漆酶及其酶学性质

对选育的一株木腐真菌Psathyrella candolleana进行液体深层发酵生产漆酶,通过硫酸铵盐析和离子交换色谱等纯化技术分离发酵酶液后,得到纯度较高的漆酶,并对其酶学性质进行研究.结果表明:P.candolleana在发酵罐中的漆酶产量最高可达9100U/L;分离纯化后得到漆酶活性组分,其比活力达到438.0 U/mg,纯化倍数为13.2,得率为50.1%;该漆酶蛋白分子质量约为61.2 ku,米氏常数为16μmol/L;该漆酶催化反应最适温度和pH值分别为45℃和5.0,在4～10℃和pH 9.0的条件下漆酶活力稳定性较好,Mg2+、Mn2+、Zn2+等金属离子对其活力的影响较小.

基于ITS序列对秦岭4种未知真菌进行分子鉴定

[目的]为秦岭山区菌种鉴定和种类划分提供分子依据。[方法]以秦岭4种未知真菌(N1、N2、N3、N4)为试验材料,分离纯化菌丝体,提取基因组DNA并扩增其rDNA的ITS(Internal transcribed sequence,ITS)区,基于ITS序列对菌株的分类地位进行确定。[结果]经鉴定,N1、N2、N3、N4分别为北冬虫夏草(Cordyceps militaris)、猴头菇(Hericium erinaceum)、白黄小脆柄菇(Psathyrella candolleana)和云芝(Trametes),其大小分别为541、597、682和602 bp。[结论]该研究为秦岭山区大型真菌的开发利用奠定了基础。

河南的鬼伞科真菌资源研究

根据野外采集的标本，经鉴定、整理河南境内生长分布的鬼伞科（Ｃｐｏｒｉｎａｃｅａｅ）的大型真菌资源种类有１２种，分别隶属鬼伞属（Ｃｐｏｒｉｎｕｓ）、小脆柄菇属（Ｐｓａｔｈｙｒｅｌａ）和斑褶菇属（Ｐａｎａｅｏｌｕｓ）。其中食用菌７种、药用菌４种、毒菌３种。此外，还有些种类的子实体含有抗癌物质，具有抑制肿瘤的作用。

一株产漆酶白腐菌的鉴定及提高其漆酶产量的研究

由广州地区的亚热带阔叶林区采集菌样,经实验室筛选分离出一株白腐菌株,通过分子生物学的方法,扩增其18s rDNA序列并分析,对菌株进行分类鉴定,初步确定该菌为白黄小脆柄菇。该菌株液体发酵产漆酶的最高峰在第3天,酶活为31525 IU/L。Native-PAGE电泳谱图显示P.candolleana在培养过程中至少能够分泌两种漆酶同工酶。通过在液体培养基中添加天然底物进行发酵,第5天漆酶活性达到最高,其相对漆酶酶活为2.7左右(规定不加底物的发酵液的漆酶酶活为1),纤维素酶与半纤维素酶活性较低且变化不大。

一株木质素降解白腐菌的筛选、鉴定及其产漆酶培养基的优化

为筛选产木质素降解酶的菌株,采用苯胺蓝-PDA平板法和愈创木酚-PDA平板法从铁皮石斛生长的树皮中筛选到菌株SHIHU-X2,经ITS测序分析将SHIHU-X2鉴定为白腐真菌白黄小脆柄菇(Psathyrella candolleana)。应用响应面法优化产漆酶培养基,结果表明SHIHU-X2菌株产漆酶的最优培养基是:去皮马铃薯200 g/L,葡萄糖20 g/L,蛋白胨1.24 g/L,KH2PO4 1 g/L,酒石酸铵0.02 g/L,CuSO4 0.01 g/L,MgSO4 0.56 g/L,MnSO4 0.057 g/L。漆酶活力从初始产酶培养基1.11 U/mL提高到响应面优化后的2.32 U/mL,漆酶活力提高了109 %。

中国刺毛鬼伞属的物种多样性

刺毛鬼伞属Tulosesus是鬼伞类真菌中已知物种数量仅次于拟鬼伞属Coprinopsis的第二大属,其主要特征为菌盖和菌柄均具囊状体,此前一直被认为是小鬼伞属Coprinellus的成员,直到近期才作为属级分类单元独立,然而其系统学位置和框架仍存争议。2021–2023年我们对该类群在全国范围内开展了野外调研,共发现20余种,其中中国新记录种10种,本研究对这些新记录种进行描述并绘制线条图,分别为短毛刺毛鬼伞Tulosesus brevisetulosus、织篮刺毛鬼伞T.canistri、灰白刺毛鬼伞T.cinereopallidus、褐囊刺毛鬼伞T.fuscocyetidiatus、灰糠刺毛鬼伞T.marculentus、半透刺毛鬼伞T.pellucidus、斜孢刺毛鬼伞T.plagioporus、沙生刺毛鬼伞T.sabulicola、塞斯刺毛鬼伞T.sassii和绒幕刺毛鬼伞T.velatopruinatus。联合ITS和LSU片段,对该属进行分子系统学研究,结果表明Tulosesus单系,由3个独立的亚属级分支构成,结合形态学特征,初步阐明该属的属下各分支的特征。