植物瞬时表达体系真空侵染法的优化

病毒能够激活宿主的防御途径,诱导宿主大量基因表达。辅助成分-蛋白酶(helper-component protease, HC-Pro)是RNA病毒编码的基因沉默抑制子,关于HC-Pro诱导植物内源基因表达的分子机制并不十分清楚。本研究利用农杆菌介导的真空侵染法在拟南芥(Arabidopsis thaliana)小苗中瞬时表达了外源基因HC-Pro,并对影响基因表达效率的真空侵染条件进行了优化。结果表明农杆菌重悬液浓度OD600=1.5,真空压力为0.08 MPa,HC-Pro基因表达效率最高(95%)。半定量RT-PCR检测结果表明在真空侵染14 d后,HC-Pro在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中得到了瞬时表达。通过优化了农杆菌介导的真空侵染法,外源基因快速、高效在拟南芥中得到了表达。本研究结果为研究病毒抑制子HC-Pro的功能提供了帮助。