变温条件下小菜蛾对不同温度效应杀虫剂敏感性的变化

为了明确变温环境条件对小菜蛾药剂敏感性的影响,本研究采用食料浸渍法比较了环境温度变化下四氯虫酰胺(正温度效应杀虫剂)和溴虫腈(无温度效应杀虫剂)处理对小菜蛾药剂敏感性的影响;模拟田间变温条件,研究这两种杀虫剂不同施药时间对小菜蛾毒力的影响。结果表明,四氯虫酰胺施药前,15、25、35℃预处理24 h,其35℃下温度系数分别为+28.53、+25.84和+18.77,均表现为显著的正温度效应,但温度系数随预处理温度上升而降低。溴虫腈在15℃预处理24 h,对小菜蛾表现为弱正温度效应,25℃和35℃下预处理均无温度效应。表明药剂处理前温度变化会影响杀虫剂的温度效应。在模拟田间变温的情况下,四氯虫酰胺经过高温预适应后于16:00(30℃)对小菜蛾的毒力最高(0.41 mg/L),显著高于清晨6:00(22℃)持续低温时的毒力(32.33 mg/L),毒力差异倍数高达78.85倍。一天中无温度效应杀虫剂溴虫腈的毒力受温度变化的影响较小。本研究为利用杀虫剂的温度效应指导田间高效防治小菜蛾提供了依据。

Biolog代谢表型技术解析小菜蛾肠道细菌河生肠杆菌的生物学特性

河生肠杆菌Enterobacter amnigenus为小菜蛾Plutella xylostella幼虫肠道优势可培养格兰氏阴性细菌,本文系统地阐述了河生肠杆菌在养分需求和环境适应力上的生物学特性。采用Biolog代谢表型技术,系统地研究了E.amnigenus的碳、氮、磷、硫需求及其在各种环境下的适应力。河生肠杆菌具有广泛的营养需求,可代谢38.42%的供试碳源、98.42%的供试氮源,以及100%的硫源和100%的磷源;高效代谢的碳源和氮源分别为有机酸类和糖类、及氨基酸类和肽类化合物。它表现出95种生物合成途径。河生肠杆菌具有广泛的环境适应力,能分别在高达6.5%氯化钠、5%硫酸钠、6%氯化钾、20%乙二醇、6%甲酸钠、4%尿素、10%乳酸钠、50 mmol/L苯甲酸钠(pH5.2)、200 mmol/L磷酸钠(pH7.0)、100 mmol/L硫酸铵(pH8.0)、100 mmol/L亚硝酸钠和100 mmol/L硝酸钠的渗透溶液中生长,而不能在11%~12%的乳酸钠渗透溶液中生长;其适应pH值范围为4.5~10.0,最适约为9.0。在多种氨基酸的作用下,河生肠杆菌具有脱羧酶和脱氨酶活性。小菜蛾肠道细菌河生肠杆菌具有广泛营养需求特性、渗透压与pH环境适应力。

不同药剂对甘蓝小菜蛾的田间药效试验

小菜蛾是蔬菜重点害虫之一,长期药剂防治可能会使其产生抗性。为筛选出防治甘蓝小菜蛾的理想药剂,以“京丰”为供试蔬菜品种,比较研究10%虫螨腈悬浮液、2.5%阿维菌素·氟铃脲和2%阿维·高氯杀虫剂对该害虫的防治效果。结果表明,在小菜蛾幼虫2~3龄前,3种方式对小菜蛾均有良好的控制效果,药后10 d均能有效控制小菜蛾为害,而且无药害现象。该试验为相关地区防治小菜蛾提供参考。

5种植物提取物对小菜蛾的生物活性

植物源杀虫剂相较于化学农药,具有源于自然易分解、生物活性多样、害虫不易产生抗药性等优点。为研制高效低毒的植物源杀虫剂,为开发研究新型植物杀虫剂提供数据基础,从已报道的具有杀虫活性的5个科中选取丁香、甘草、独活、赤芍、八角5种植物,并在室内测定5种植物水醇提取物对小菜蛾3种虫态的生物活性。采用浸卵法、浸叶法和非选择叶盘法测定5种植物提取物对小菜蛾卵触杀、幼虫胃毒、成虫产卵忌避效果;并通过高倍显微镜观察5种植物提取物处理后小菜蛾卵的外部形态。结果表明,5种植物提取物对小菜蛾卵和幼虫均有显著的杀虫活性,对成虫具有产卵忌避活性,生物活性与剂量基本呈正相关;在植物提取物质量浓度为100 mg/mL时,对小菜蛾卵和幼虫的校正死亡率以及成虫产卵忌避率均在85%以上。丁香、甘草、独活、赤芍、八角提取物对小菜蛾卵的毒力LC50分别为9.57、16.16、20.42、9.00、7.57 mg/mL,对小菜蛾幼虫的毒力LC50分别为7.46、13.49、21.31、54.67、9.87 mg/mL。其中,丁香提取物对小菜蛾卵和幼虫的毒力最高;5种植物提取物处理后的小菜蛾卵发育受到影响,卵内组织器官发育受阻或虫体畸形。丁香、甘草、独活、赤芍、八角提取物具有作为植物源杀虫剂材料来源用于防控小菜蛾的潜在价值。

小菜蛾杀虫抗体的对靶设计及验证

本研究拟通过模拟Cry毒素创制新型杀虫蛋白质用于小菜蛾防治,主要利用三维结构模拟及分子对接技术,以前期获得的抗Cry1Ab抗体为模板设计2个基因工程抗体(GEAb)。其中,具有杀虫活性的GEAb-GGCC与小菜蛾中肠刷状边缘膜囊泡(BBMV)具有较高结合活性,并与Cry1A和Cry1B具有重叠的BBMV结合位点。BBMV免疫沉淀分析鉴定结果显示,与GEAb-GGCC结合的中肠蛋白质包括氨肽酶N(APN)、V-ATP酶B亚基和polycalin。由于GEAb-GGCC缺乏Cry1A类蛋白质中负责成孔的α-螺旋结构,推测GEAb-GGCC或通过结合小菜蛾中肠受体激活下游信号通路,引起中肠损伤,导致虫体死亡。

小菜蛾UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆、表达及功能研究

【目的】克隆小菜蛾几丁质合成酶基因PxUAP并阐明其功能。【方法】基于小菜蛾基因组信息,利用RT-PCR克隆小菜蛾PxUAP基因的cDNA序列,并应用荧光定量PCR和RNA干扰技术分析该基因的表达模式及功能。【结果】PxUAP(GenBank登录号:OR659549)开放阅读框长度为1467 bp,预测编码488个氨基酸,蛋白分子质量为54.985 ku,理论等电点为6.12;与金凤蝶UAP(KPJ20218.1)同源蛋白亲缘关系较近,氨基酸同源性为80.33%。发育表达谱结果表明,PxUAP在小菜蛾各个发育阶段均有表达,在雄成虫期的表达量最高;组织表达谱结果表明,PxUAP在雌成虫足和翅膀的表达量最高。RNAi结果表明,与注射ds GFP对照组相比,注射ds PxUAP显著降低了靶标基因和几丁质合成酶PxCHSA基因的表达量,且PxCHSB基因在24和48 h的表达量也显著下降;注射ds PxUAP的小菜蛾大部分无法化蛹,蛹壳出现皱缩等畸形现象,并在注射后168 h全部死亡。【结论】PxUAP是小菜蛾几丁质合成酶通路中的关键调控基因,对小菜蛾生长发育起至关重要的作用。

天维菌素B杀虫活性测定及防治小菜蛾复配配方筛选

天维菌素B是中国自主创制的新型大环素内酯类杀虫剂。为挖掘其市场潜力,延缓害虫抗药性的产生,本研究采用浸叶法测定了天维菌素B对小菜蛾Plutella xylostella、玉米螟Pyrausta nubilalis、美国白蛾Hyphantria cunea等10种害虫的活性;采用喷雾法测定了其对棉蚜Aphis gossypii、二斑叶螨Tetranychus urticae和美洲斑潜蝇Liriomyza sativae的活性;采用孙云沛共毒系数法评价了其与硫虫酰胺、虫螨腈和茚虫威复配对小菜蛾的增效作用,并选择最优配比进行了田间药效试验。室内活性测定结果表明:天维菌素B对小菜蛾、玉米螟和二斑叶螨具有优异的杀虫、杀螨活性,LC50值分别为0.115、0.043和0.012 mg/L,活性显著高于或与阿维菌素相当;对黏虫Mythimna separata、美国白蛾、稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis、西花蓟马Frankliniella occidentalis和棉蚜也具有较好的活性,LC50值为0.337~9.784 mg/L。复配配方筛选结果显示:天维菌素B与硫虫酰胺、茚虫威的各组配比均无增效作用;而天维菌素B与虫螨腈在质量比为1:14时的共毒系数为178.59,增效作用明显。选择天维菌素B与虫螨腈质量比1:14复配混合物开展防治小菜蛾的田间药效试验,结果显示,该复配组合在有效成分用量75 g/hm2时,药后7 d和14 d的防效均可达80%以上。研究表明,天维菌素B对小菜蛾、二斑叶螨、棉蚜等多种害虫具有较好的活性,杀虫谱广,具有较好的市场开发前景;天维菌素B与虫螨腈按质量比1:14复配具有增效作用,可以用于防治田间小菜蛾,并有助于延缓其抗药性的产生。

小菜蛾RyR调控蛋白FKBP基因克隆及其时空表达谱

【目的】明确FK506结合蛋白(FKBP)基因在小菜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性形成中的作用,筛选出起主要作用的关键FKBP基因,为阐明小菜蛾抗双酰胺类杀虫剂的分子机理提供新思路。【方法】以抗氯虫苯甲酰胺种群和敏感种群小菜蛾为研究对象,采用浸叶法测定不同种群小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的敏感性差异;利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆3个FKBP基因(FKBP8、FKBP12和FKBP52)的全长序列,并通过GSDS 2.0、CDD和MEME在线分析软件分析其基因结构与蛋白保守结构域和Motif;采用实时荧光定量PCR分析抗性种群不同发育阶段和敏感、抗性种群4龄幼虫不同组织FKBP基因的时空表达特性。【结果】生物测定结果显示,抗性种群小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性倍数为122.67倍,属于高水平抗性。实时荧光定量PCR分析发现,抗性种群小菜蛾体内3个FKBP基因的相对表达量均显著高于敏感种群(P<0.05,下同),其中FKBP8基因的表达差异最显著,是敏感种群的968倍。通过RACE方法克隆得到FKBP52、FKBP8和FKBP12基因的全长序列,长度分别为1473、1525和649 bp,分别编码423、307和108个氨基酸残基,其蛋白均为亲水蛋白。FKBP52、FKBP8和FKBP12基因具有相同的基因结构,FKBP52和FKBP12蛋白具有相同的保守结构域FkpA,而FKBP8蛋白具有2个不同的保守结构域。抗性种群小菜蛾4龄幼虫体内3个FKBP基因表达量均高于蛹期,其中FKBP12和FKBP8基因在4龄幼虫中的表达量最高,显著高于其他龄期和蛹期。FKBP8基因在抗性种群小菜蛾中肠和表皮中的表达量显著高于敏感种群,分别是敏感种群的3.2和3.7倍。【结论】FKBP52、FKBP8和FKBP12基因在氯虫苯甲酰胺抗性种群小菜蛾中均过量表达,其中FKBP8基因在高抗氯虫苯甲酰胺种群小菜蛾的中肠高表达,表明其可能通过过量表达参与小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗药性。

小菜蛾幼虫生防菌株毒力测定及产毒条件优化

为丰富小菜蛾(Plutella xylostella)生物防治的微生物资源,本研究选用粉红粘帚霉(Clonostachys rosea)、淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)和02号生赤壳属(Bionectria sp.)三种具有较好生防效果的菌株开展其对小菜蛾幼虫毒力的菌株筛选试验,同时对选出的高毒力菌株进行毒力测定和产毒条件优化。结果表明,三种菌株对小菜蛾幼虫都具有防治效果,其中以粉红粘帚霉的生防毒力最强。毒力测定显示,粉红粘帚霉的半致死时间(LT_(50))为30.88 h,半致死浓度(LC_(50))为4.365×10^(4)个孢子/mL。从产毒条件优化结果看出,粉红粘帚霉产毒的最适培养基为萨氏葡萄糖琼脂酵母膏(SDAY),最适pH值为6,最适培养时间为7 d。综上表明,粉红粘帚霉对小菜蛾幼虫具有毒力高、致病速度快等特点,具有较大的生防潜力,可作为防治小菜蛾的优良生防真菌。

8种杀虫剂防治甘蓝小菜蛾田间药效试验

试验测定了8种杀虫剂对甘蓝小菜蛾的田间防治效果。结果表明:15%唑虫酰胺悬浮剂、30%虫螨腈悬浮剂、10%溴氰虫酰胺可分散油悬浮剂和5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂药后3 d防效>83%,且药后10 d防效>90%,具有较好的持效性,可有效防治甘蓝小菜蛾。150 g/L茚虫威悬浮剂药后3 d防效达89.22%,药后10 d防效降到84.93%,具有较好的速效性。10%虱螨脲悬浮剂和5%氟铃脲乳油药后3 d防效为75.09%~77.14%,药后10 d防效有较大的提高,达到83.99%~87.03%,药效作用较缓慢。5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂药后3 d防效为80.46%,药后10 d防效为83.98%,防治效果偏低。各试验药剂对甘蓝安全,对其他有益生物无不良影响。

PBS与小球孢白僵菌复配对温室小菜蛾幼虫的防治效果

本文研究小球孢白僵菌与PBS表面活性剂复配对寒地温室害虫小菜蛾幼虫的防治效果。通过平板计数法确定小球孢白僵菌菌种的菌含量,将小球孢白僵菌与PBS表面活性剂复配,制备成5种浓度梯度的菌悬液,分别命名为G_(1)~G_(5),以防治效果为实验测定标准,寻找出复配组分最优配比,筛选出防治小菜蛾幼虫的复配菌悬液的最佳防治浓度。试验数据表明,不同浓度下,用PBS培养真菌比蒸馏水更能保护微生物的活性及完整性。复配菌悬液对寒地温室害虫的致死效果较为明显,且不同浓度梯度混合液的防治效果不同,G_(1)~G_(5)浓度之间的小球孢白僵菌复配菌悬液均可配制形成生物农药用于温室小菜蛾幼虫防治。但在寒地温室害虫的防治过程中,浓度为G_(1)的小球孢白僵菌复配菌悬液的防效最高。总体来看,浓度为3×10^(7)cfu/mL的小球孢白僵菌复配菌悬液的速效性和持效性均优于其他复配组分。

小菜蛾抗药性及其生物防治研究进展

小菜蛾作为一种在全球范围内普遍存在的农业害虫,对蔬菜生产构成了严重威胁。目前,针对小菜蛾的防治策略主要包括化学防治、农业防治和生物防治等方法。然而,由于化学农药的大量使用,小菜蛾已经展现出了越来越强的抗药性,这使得其防治变得愈加困难。通过分析国内外的小菜蛾防治技术,可以发现生物防治方法在有效控制小菜蛾的同时,并不会引发害虫的抗药性问题。为了更加清晰地了解小菜蛾造成的危害性,从小菜蛾的发生概况与原因、抗药性的产生及其管理措施、抗药性监测等方面进行了综述。目前,小菜蛾的生物防治主要利用的是真菌、细菌、病毒以及天敌等生物因素。通过对最新研究进展的综述,展望了未来小菜蛾生物防治的发展前景。

利用性诱剂监测甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾发生动态探析

为了探明昆明市蔬菜主产区不同年度间甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和小菜蛾性诱剂诱集效果及气象因子对虫害的影响,2020-2022年在昆明市晋宁区利用性诱剂对甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和小菜蛾进行了3年的系统监测。结果表明,甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和小菜蛾全年均有发生,年度大致呈倒V形趋势,全年发生1~2个高峰期,甜菜夜蛾和斜纹夜蛾发生高峰为5月下旬至10月上旬,小菜蛾发生高峰为4月下旬至7月上旬。高温和较为干旱的天气更有利于甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和小菜蛾的繁殖和生长。本研究可为昆明蔬菜主产区甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和小菜蛾成虫活动规律和监测预警提供数据参考。

性信息素迷向防控甘蓝小菜蛾效果试验

小菜蛾繁殖速度快、适应性强,危害大,是十字花科蔬菜重要害虫。长期使用单一化学药剂防治小菜蛾的效果差、成本高,并易造成蔬菜农药残留超标,不利于农业可持续发展。作者开展了性信息素迷向防治小菜蛾效果试验。试验结果表明,4月7日~5月26日,常规防治区诱捕小菜蛾成虫4253头,性信息素迷向防治区诱蛾量为289头,平均迷向率为92.29%;5月19日、5月26日,性信息素迷向防治区小菜蛾幼虫总量分别为14头、9头,显著低于常规防治区(分别为41头、29头);性信息素迷向防治区小菜蛾的平均防效为67.41%。可见,应用小菜蛾性信息素迷向技术可干扰小菜蛾雌、雄成虫交配,降低雌虫产卵量,压低田间虫口基数,从而可减少化学药剂用量,具有显著的经济效益、生态效益和社会效益。因此,建议在甘蓝生产上推广应用小菜蛾性信息素迷向技术。

小菜蛾弯尾姬蜂引进及其控害潜能评价

从越南和我国台湾省引入十字花科蔬菜主要害虫小菜蛾幼虫的优势天敌小菜蛾弯尾姬蜂 ,研究了该寄生蜂的生物学特性和室内繁殖技术。通过田间释放 ,评价其定殖效果和控害潜能。结果表明 ,小菜蛾弯尾姬蜂能在云南田间续代增殖 ,自然寄生率可达 74 7% 。

银杏提取物对小菜蛾的生物活性及其解毒酶的影响

为探究银杏外种皮提取物(GBEE)对小菜蛾(Plutella xylostella)的毒杀作用,本文测定了不同溶剂GBEE对3龄小菜蛾幼虫的胃毒活性和拒食活性,及其对小菜蛾幼虫3种解毒酶活性的影响。研究结果表明,3种溶剂提取GBEE对小菜蛾幼虫均有一定毒杀作用,其中甲醇银杏外种皮提取物对小菜蛾的24 h LC_(50)为216.884 mg/mL,48 h LC_(50)为48.781 mg/mL;12 h AFC_(50)为230.083 mg/mL,24 h AFC_(50)57.560 mg/mL。LC_(50)剂量下处理小菜蛾后,CarE、GSTs和MFO活性引导24 h降低,表现为抑制作用,之后活性诱导升高,表现为激活作用。综上所述,银杏外种皮提取物对小菜蛾具有一定的毒杀作用,主要作用方式为胃毒作用和拒食作用,CarE、GSTs和MFO 3种解毒酶活性表现为先降低后升高。

小菜蛾绒茧蜂触角的超微结构

采用扫描电镜观察小菜蛾绒茧蜂Cotesiaplutellae的触角,发现主要感受器毛状感受器和板状感受器的数量较大;雌雄蜂的触角感受器在数量和分布上有所不同.

两种小菜蛾寄生蜂毒液器官超微结构的比较

应用超薄切片和电镜技术 ,观察比较了两种小菜蛾的内寄生蜂———小菜蛾盘绒茧蜂和半闭弯尾姬蜂毒液器官的形态结构。两种蜂的毒液器官均由一个毒囊和两条毒腺组成 ,但毒腺与毒囊的连接位点不同 ,毒腺分别接于毒囊的基部和顶端。它们的毒腺均由分泌细胞、退化的外胚层细胞和环腔的内膜三层结构构成 ,分泌细胞内含司分泌毒液的囊状细胞器及大量的内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体和液泡。半闭弯尾姬蜂的分泌细胞内有分支的细胞核。小菜蛾盘绒茧蜂的毒囊由肌肉鞘和扁平细胞层构成 ,内膜呈波浪状内突并沿囊腔有几丁质增厚 ;半闭弯尾姬蜂的毒囊由肌肉鞘、分泌细胞和扁平细胞三层构成 ,分泌细胞基部内陷成一系列大的突起 ,这些结构与雌蜂的分泌和排出毒液的行为密切相关。在衰老的小菜蛾盘绒茧蜂的腺细胞中还存在大量的髓样体。本文就两种寄生蜂毒液器官的生物学、细胞生理学及相关的分类进化的意义进行了讨论。

蜡蚧轮枝菌和球孢白僵菌对小菜蛾药效试验

室内药效试验结果,蜡蚧轮枝菌和球孢白僵菌对小菜蛾幼虫均有较高的致死率,蜡蚧轮枝菌孢子浓度高于5×105个/ml、球孢白僵菌孢子浓度高于3×107个/ml时,药后7天校正死亡率都在81%以上;田间药效试验结果,蜡蚧轮枝菌和球孢白僵菌对小菜蛾幼虫均有良好的防效,药后7天(浓度与室内试验相同)校正防效都高于80%。

西藏油菜田小菜蛾防控策略研究

小菜蛾Plutella xylostella是西藏主要农耕区油菜田上重要的害虫,严重威胁着西藏油菜产业的安全生产。西藏是我国重要的生态安全屏障,对油菜田小菜蛾的防控要最大限度避免对生态环境的不良影响。为此,提出了相应的防控策略建议:了解掌握油菜主产区小菜蛾的虫源问题,即小菜蛾迁飞与越冬;对油菜主产区小菜蛾进行抗药性监测;推广适合西藏使用的绿色防控技术。通过提出这些针对西藏小菜蛾的防控策略建议,以期为西藏小菜蛾的绿色防控提供理论依据,从而更好地保护西藏的生态环境和油菜产业。