玫红百合组培小鳞茎瓶内膨大影响因子的研究

玫红百合(Lilium amoenum)是具有玫瑰甜香味的珍稀百合资源。为探索玫红百合组培小鳞茎瓶内膨大的最适培养条件及培养基配方,以直径0.4~0.6 cm的玫红百合组培小鳞茎为材料,将其接种于添加不同质量浓度蔗糖或蔗糖与萘乙酸(naphthalene acetic acid,NAA)、6-苄氨基嘌呤[N-(phenylmethyl)-9H-purin-6-amine,6-BA]、吲哚丁酸(indole butyric acid,IBA)、多效唑(paclobutrazol,PP333)组合的Murashige&Skoog(MS)培养基中,设置16 h光照/8 h黑暗和全黑暗2种光照环境,培养45 d后统计小鳞茎的膨大系数和直径增大倍数。结果表明,在本试验条件下,随着蔗糖及激素质量浓度的升高,玫红百合组培小鳞茎膨大系数及直径增大倍数基本呈先增加后下降的趋势,其中:在添加蔗糖质量浓度为50~120 g/L处理中,以90 g/L蔗糖处理的膨大效果最好,小鳞茎嫩绿有光泽,抱合度好;当50~120 g/L蔗糖与0.1~0.7 mg/L NAA/6-BA、0.5~4.0 mg/L IBA或5~40 mg/L PP333协同作用时,以70 g/L蔗糖和1.0 mg/L IBA处理的小鳞茎膨大效果最好,其膨大系数与直径增大倍数最高,分别为3.63和1.83;高质量浓度的蔗糖与PP333协同作用会显著抑制小鳞茎的膨大。在16 h光照/8 h黑暗环境下培养的玫红百合组培小鳞茎较全黑暗环境下长势好,其膨大系数及直径增大倍数高,但黑暗环境下生根效果更好。本研究可缩短玫红百合田间培育成球时间,为种质资源保护提供了科学依据。

甘肃贝母离体小鳞茎直接发生途径的研究

目的:建立甘肃贝母组织培养小鳞茎的直接发生技术体系。方法:采用单因子试验设计,筛选适宜甘肃贝母组织培养的外植体及灭菌方法,探究外植体种类、茎段大小、培养温度、激素组合、培养方式等对小鳞茎诱导和增殖的影响。结果:休眠芽的最佳灭菌方式为75%乙醇灭菌30 s,0.1%升汞灭菌1 min,无菌水冲洗3~5次。休眠芽为外植体时培养效果最好,其次为茎段和小鳞叶,叶片效果较差。茎段大小对甘肃贝母组培小鳞茎诱导影响不大。固体培养基更适宜直接诱导小鳞茎,培养基配方为:1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L或1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,蔗糖3%、琼脂0.7%,pH 5.8。一定的变温培养有利于其鳞茎增殖。适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.5 mg/L+1.5%蔗糖+0.7%琼脂,pH 5.8。结论:建立了甘肃贝母离体培养小鳞茎直接发生技术体系,可为甘肃贝母种质保存及工厂化育苗提供技术支撑。

工厂化立体式兰州百合鳞片埋植条件下不同基质对小鳞茎繁殖效果的影响

为完善工厂化立体式条件下兰州百合鳞片埋植繁育技术,研究兰州百合不同层次鳞片小鳞茎繁殖效果对于添加不同基质的响应,优选出更具有生产应用价值的基质类型和鳞片层次,为工厂化立体式兰州百合鳞片繁育技术的示范和推广提供科学数据支撑。结果表明,蛭石处理的鳞片疑似发病率最低,25~50d鳞片疑似发病率快速上升,50~75d鳞片疑似发病率缓慢下降。外层鳞片疑似发病率最高,内层鳞片疑似发病率最低。蛭石处理75d时,中层鳞片分化率最高达到93.23%,中层、内层鳞片分化率高于外层;中层鳞片小鳞茎分化数最高2.21粒/片,内层和中层鳞片分化的小鳞茎数差异较小。小鳞茎繁殖效果指标均表现为蛭石处理最高、蛭石+营养土处理次之、营养土处理效果最差。蛭石处理单个鳞片小鳞茎鲜质量平均0.68g、根数平均0.77根、单个鳞片生子球数4.03个、周径>2cm鳞茎数量占比60.33%及繁殖系数2.68。

新铁炮百合鳞片扦插繁殖的小鳞茎形态发生

采用解剖学方法研究新铁炮百合鳞片扦插繁殖中小鳞茎的组织发生过程。研究结果表明 :小鳞茎起源于鳞片基部内层薄壁细胞而非愈伤组织 ,发生发展过程可分为启动期、生长锥形成期、叶原基形成期和小鳞茎形成期。

不同激素配比对红花石蒜小鳞茎及茎尖的分化培养的影响

以红花石蒜(Lycoris radiata)的鳞茎切块及茎尖为材料,采用不同激素配比的MS培养基,对离体小鳞茎的分化和增殖进行了研究。结果表明,BA 3 mg/L及NAA 1.5 mg/L配比获得的小鳞茎诱导频率最高,可达53%,诱导生成的小植株强健整齐。鳞茎茎尖培养可形成多种不同类型的愈伤组织,本试验中有2种类型愈伤组织转入分化培养基后可产生大量的小鳞茎。

濒危药材甘肃贝母试管小鳞茎再生的研究

目的:以甘肃贝母鳞茎为外植体,建立组培快繁体系,为资源保护和有效利用奠定基础。方法:研究了不同的外植体消毒方法,不同的激素浓度及配比,不同的培养条件等对原球茎发生、生长膨大、发芽生长的影响。结果:通过内吸性杀菌剂预处理,结合二次消毒可以较有效的控制外植体的污染;原球茎诱导过程中以鳞瓣为外植体的最优激素组合是ZT 3 mg/L+MEJA 3 mg/L+IAA 3 mg/L+BR 0.3 mg/L(或GA 4+7 0.2 mg/L),以鳞心为外植体最优激素组合是ZT 2 mg/L+SA 10 mg/L+BR 0.2 mg/L(或GA 4+7 0.2 mg/L),鳞心诱导效率高于鳞瓣;原球茎生长膨大阶段,鳞瓣原球茎生长膨大的最优激素组合是NAA 3 mg/L+SA 40 mg/L+BR 0.3 mg/L(或S-3307 5mg/L),鳞心原球茎生长膨大的最优激素组合是NAA 2 mg/L+SA 20 mg/L+BR 0.3 mg/L(或S-3307 3 mg/L),鳞瓣原球茎生长膨大效果明显优于鳞心原球茎;不同大小的试管小鳞茎在发芽生长特性方面存在较大差异。结论:建立了甘肃贝母试管小鳞茎的组培再生体系。

淡黄花百合丛生小鳞茎的诱导及快速繁殖

分别以淡黄花百合的鳞片、叶片、叶柄为外植体,“一步法”获得丛生小鳞茎及其再生植株,建立了淡黄花百合的快速无性繁殖体系。结果表明:鳞片为最佳外植体,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率最高达到95.0%,平均小鳞茎增殖系数最高可达8.6;叶片、叶柄最佳小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。

大蒜体细胞诱导再生植株和小鳞茎及其移栽试验

以栽培品种太仓白蒜的贮藏叶和鳞茎叶为外植体材料,接种在附加2,4-D 2mg/l,NAA 2mg/l,6-BA 0.5mg/l的MS培养基上,愈伤组织的诱导率在10％—30％之间;愈伤组织转到添加NAA0.05—0.5mg/l,6-BA 3mg/l的MS分化培养基上,植株再生率在25％—50％之间。体细胞再生植株在附加IBA 0.2mg/l的稍作修改的MS培养基上诱导小鳞茎发生,小鳞茎形成的频率达38％。待小鳞茎在试管内萌发出叶和根后,移植到由珍株岩粉和土(1:1)组成的基质里,移栽成活率达100％。

东方百合鳞片繁殖小鳞茎发生的形态学观察

采用解剖学方法研究东方百合鳞片扦插繁殖中小鳞茎的组织发生过程。结果表明:小鳞茎的形态发生起源于鳞片近轴面基部的几层薄壁细胞,细胞脱分化后形成分生组织,再经过器官发生途径形成小鳞茎,属于外起源。小鳞茎发生过程可分为未分化期、启动期、生长锥形成期、小鳞片原基和根原基形成期、小鳞茎形成期。

亚洲百合‘普瑞头’的组织培养及休眠小鳞茎获得的研究

以‘普瑞头'百合为试材,研究了百合鳞片分芽及生根的最佳培养基配方,对亚洲百合休眠小鳞茎的获得进行了探讨。结果表明:鳞片分芽的最佳培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.05～0.5 mg/L,生根培养基为1/4MS和1/4MS+N从0.5 mg/L;采用最佳配方25℃组织培养‘普瑞头'百合,培养120 d获得深度休眠的小鳞茎。

不同类型的东方百合小鳞茎冷藏生理变化和活性研究

以自繁的东方百合‘Siberia’小鳞茎（围径4~6 cm）为材料,选择珠芽、分生繁殖、扦插繁殖、试管繁殖途径获得的小鳞茎,研究（2±0.5）℃条件下冷藏生理和活性的一些指标变化特征。结果表明：不同类型的百合小鳞茎,在冷藏期间,可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性等生理指标都具有一个低谷和一个跃升高峰,珠芽、分生和扦插形成的小鳞茎生理变化表现相近,试管鳞茎的生理变化则明显迟滞一个时期;试管小鳞茎水分含量高,水分散失快,冷藏过程中呼吸强度偏高,出库后测定的发芽率和活力指数均低于珠芽、分生和扦插繁殖的小鳞茎。

百合顶芽离体诱导小鳞茎及开花球培育

以亚洲百合顶芽为外植体,进行了离体诱导小鳞茎及小鳞茎培育开花球研究。结果表明:在BA 1- 2 mg/L+NAA 0.1-0.2 mg/L+MS培养基上,顶芽培养产生丛芽的诱导率高达100％。丛芽在MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.05-0.1 mg／L培养基上不断增殖,并逐渐发育成无根苗,增殖系数为6。激素、蔗糖、光照强 度及低温处理等因素影响小鳞茎诱导,丛芽在MS+IBA 0.5 mg/L+质量分数为4％蔗糖培养基上,光照强度 1.5 klx时,诱导形成小鳞茎效果较好,诱导率100％,平均每株诱导小鳞茎1.5个,小鳞茎直径0.96 cm。小鳞 茎经5℃低温处理2周后,在BA 0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+MS培养基中诱导出小鳞茎,诱导率82.5％,每块鳞 茎片诱导4.2个小鳞茎,直径0.29 cm。直径0.8 cm以上试管鳞茎,经过5-8℃低温处理4周后,在福建省南 平海拔800 m处栽培8个月,收获的种球中45.8％达到开花球标准。试管鳞茎开花性状稳定。

朱顶红小鳞茎切割繁殖及其影响因素

利用双鳞片法获得朱顶红组培苗,利用其小鳞茎为材料,经切割诱导出芽产生新植株,以探讨朱顶红种苗工厂化生产技术。结果表明,用1/2MS培养基添加6-BA、NAA可诱导出芽;培养基糖浓度为45 g.L-1、pH为6.6时诱导率最高;小鳞茎四分切的繁殖系数高于二分切;切割代数不影响再切割成苗诱导率;添加磷酸二氢钾和三碘苯甲酸能提高小鳞茎重量。研究可为朱顶红种苗工厂化生产提供技术支持。

低温与热激处理对百合小鳞茎活力指数的影响

以自繁的百合小鳞茎‘Siberia’为材料，研究不同因素处理下种球活力指数的变化特征。结果表明：－2℃、2℃低温处理诱导了抽薹，加快小鳞茎活力的表达，处理135～165 d 为最佳活力表达期；5～8 g 大规格的小鳞茎整体活力较强；培养周期超过5．5个月可获得较高活力的小鳞茎；二次回归正交旋转组合分析，37℃＋3 h 热激处理下小鳞茎活力指数表现最优，热激处理为小鳞茎的低温春化提供了保护和储能基础。

百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+5 500 mg/L琼脂,光照强度1 500～2 000 lx。芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5 500 mg/L琼脂,黑暗条件。提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率。

郁金香鳞片离体培养再生小鳞茎研究

以两个郁金香品种小天使和圣诞节的种球鳞片为外植体,研究不同接种方式、不同部位鳞片、不同基因型和激素浓度对郁金香鳞片离体培养再生小鳞茎的影响。结果表明,以鳞片凸面朝上进行培养,其成活率较高,达76.67%;以内层鳞片进行培养,其成活率达85.00%;小天使鳞片在添加1.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的MS培养基上的成活率和分化率均最高,而圣诞节在含2.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的MS培养基上的分化率较高;两个品种的小鳞茎在含3.0 mg/L 6-BA、0.2 mg/L NAA的MS培养基上增殖效果最好。

百合小鳞茎膨大发育过程中氮磷钾的吸收与分配规律

以周径为4～6cm的‘耀眼'(Evening Star)百合小鳞茎为试材,研究了常规栽培条件下百合小鳞茎膨大发育过程中养分的吸收和分配规律,以期为百合种球生产制定合理的施肥管理制度及探索百合小鳞茎膨大发育机理提供理论依据。研究结果表明,百合小鳞茎在苗期以前,主要以消耗鳞茎中的养分为主;苗期后对营养元素的吸收量逐渐增大。氮和钾的吸收最大高峰期在半枯期后至采收期的37d,磷的吸收高峰期在现蕾24d后至采收期的58d,此期即为百合种球生产中需肥关键时期。现蕾期以前,营养元素主要分配于茎叶中,各养分含量水平于苗期达最高;现蕾24d后养分分配以鳞茎中为主;分配于根系和新鳞茎中营养元素仅为10%左右。

苏州野生水仙小鳞茎诱导的初步研究

以苏州三山岛上野生水仙鳞茎为材料,通过4℃低温预处理4～10周与未经过低温预处理(室温)对照,再以双鳞片为外植体,通过5种激素(6-BA、NAA、KT、2,4-D、IBA)的配比组合试验,筛选出苏州野生水仙分化最适培养基,建立快繁体系。结果表明:未经过低温预处理的鳞茎切片污染较重,成活率最低为5.0%,最高仅25.0%。经过4℃低温预处理4～10周的鳞茎切片污染率显著降低,成活率最低为25.0%,最高达91.7%;诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.2mg/L+NAA0.02mg/L,平均诱导产生小鳞茎4～5个,增殖率达322.22%。

寒地百合小鳞茎膨大发育过程中碳水化合物的变化研究

对2个百合品种的小鳞茎膨大发育过程中碳水化合物变化进行了研究。结果表明:百合鳞茎和新鳞茎中淀粉含量始终高于茎叶和根;小鳞茎中淀粉含量苗期前降低,苗期至半枯期持续增加,半枯期至采收期淀粉含量稍下降;鳞茎中可溶性糖含量于栽植期最高,栽植期至苗期迅速下降,此后其含量基本稳定;鳞茎中还原糖从栽植期至现蕾后24 d始终呈下降趋势,而后稳中有升;茎叶中淀粉和可溶性糖含量从栽植期至半枯期始终呈上升趋势;苗期后,根系中还原糖含量几乎始终呈上升趋势。

百合小鳞茎抽薹的差异蛋白质组学分析

为研究百合抽薹调控机理,以自繁的百合小鳞茎‘Siberia’为材料,分析小鳞茎在抽薹前后蛋白质组表达差异。经双向电泳分离,共得到差异表达蛋白质点21个。11个蛋白质点获得MALDI-TOF-TOF-MS的鉴定,其中包含2个伴侣蛋白质、4个参与能量代谢的蛋白质、1个胁迫诱导表达的c DNA产物、3个百合花中的c DNA片段和1个未知蛋白质。结果表明,在百合抽薹过程中,参与能量代谢的蛋白质表达量受到调控,为抽薹过程准备能量或重新合成储能物质;分子伴侣蛋白质或胁迫诱导蛋白质的表达量发生变化,是百合植株应对低温春化的生理反应。