小麦低聚肽-纳米二氧化硅蛋白冠复合物的制备及其性能研究

采用表面羧基化修饰后的纳米二氧化硅(Si O_(2)nanoparticles,Si O_(2)NPs)与小麦低聚肽(wheat oligopeptide,WOP)进行超声复合,使小麦低聚肽在纳米二氧化硅表面形成蛋白冠(protein corona,PC),制备出小麦低聚肽-纳米二氧化硅蛋白冠复合物(wheat oligopeptide-nanosilica protein corona complex,WOP-Si O_(2)PC)。研究不同反应条件对纳米二氧化硅与小麦低聚肽复合率的影响,并对小麦低聚肽-纳米二氧化硅蛋白冠复合物的抗氧化性、起泡性及乳化性进行测定。研究结果表明,小麦低聚肽-纳米二氧化硅蛋白冠复合物制备的最优条件为:超声波时间20 min,超声波温度65℃,Si O_(2)NPs质量分数0.75%。小麦低聚肽-纳米二氧化硅蛋白冠复合物的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率达到38.35%、55.12%。起泡性、起泡稳定性达到103.51%、15.21%;持水性、持油性达到423.67%、442.79%;乳化性、乳化稳定性达到16.81 m^(2)/g、65.21%。

饲粮中添加小麦低聚肽对肉羊生长性能、营养物质表观消化率和小肠形态的影响

试验旨在研究饲粮中添加小麦低聚肽对肉羊生长性能、营养物质表观消化率和小肠形态的影响。试验选取30只体重[(35.58±3.18)kg]相近的4月龄小尾寒羊公羊,随机分为2组,每组15只。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+0.3%小麦低聚肽,试验期60 d。结果表明:(1)试验组第16~30 d平均日增重显著高于对照组(P<0.05),料重比显著低于对照组(P<0.05)。(2)试验组干物质、粗蛋白、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、钙和磷的表观消化率显著高于对照组(P<0.05)。(3)试验组十二指肠和空肠绒毛高度显著高于对照组(P<0.05),十二指肠、空肠和回肠的隐窝深度显著低于对照组(P<0.05),十二指肠、空肠和回肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)值显著高于对照组(P<0.05)。试验结果表明,小麦低聚肽可通过改变小尾寒羊小肠的形态、提高营养物质表观消化率,进而提高生长性能。

小麦低聚肽对小尾寒羊屠宰性能、肉品质及瘤胃菌群结构的影响

本试验旨在研究饲粮添加小麦低聚肽对小尾寒羊屠宰性能、肉品质及瘤胃菌群结构的影响。选取平均体重为35 kg左右、4月龄的健康小尾寒羊公羔羊30只,随机分为2组,即对照组(饲喂基础饲粮)和试验组(饲喂基础饲粮+0.3%小麦低聚肽)。试验期共75 d,包括预试期15 d,正试期60 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加小麦低聚肽显著提高了肉羊背膘厚度(P<0.05),对肉羊胴体重、屠宰率、眼肌面积无显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,试验组肉羊背最长肌的pH_(45 min)、pH_(24 h)以及肉色中的亮度(L^(*))和红度(a^(*))值没有显著变化(P>0.05),而肉色中的黄度(b^(*))值显著提高(P<0.05),剪切力和失水率显著降低(P<0.05),蒸煮损失有降低的趋势(P=0.09)。3)与对照组相比,饲粮中添加小麦低聚肽对肉羊瘤胃菌群的alpha多样性无显著影响(P>0.05);在门水平上,与对照组相比,试验组拟杆菌门相对丰度有增加的趋势(P=0.08)。本试验结果提示,小麦低聚肽能够增加羊肉的嫩度和保水能力,同时具有调节小尾寒羊瘤胃菌群结构的潜力。

小麦低聚肽螯合铁的制备与结构表征

以小麦低聚肽和FeCl_(2)为原料,采用单因素试验和响应面中心组合设计法研究了制备小麦低聚肽螯合铁的最佳工艺,结果表明:温度为60℃,肽盐质量比为6∶1,pH为5,螯合反应时间为55.0 min时,螯合率为(62.61±0.84)%,产物得率为(51.13±1.16)%。通过傅里叶变换红外光谱分析小麦低聚肽螯合前后结构特征变化,结果表明:螯合前后物质的结构发生了变化,对光吸收性能发生改变,螯合物中Fe^(2+)与NH_(2)^(+)以及—COO—形成配位键,说明成功生成了一种新型小麦低聚肽铁螯合物,具有营养保健和补铁功能价值。

玉米低聚肽和小麦低聚肽及其金属螯合物的抗氧化和抗过敏活性

以分析玉米低聚肽和小麦低聚肽理化性质为基础,对2种低聚肽及玉米低聚肽-Ca螯合物与小麦低聚肽-Fe螯合物2种金属螯合物的抗氧化能力和抗过敏活性进行研究。利用DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及还原能力测试3种方法评价样品的抗氧化能力,并选择透明质酸酶抑制法评价样品的抗过敏活性。抗氧化能力分析表明,4种样品均有较强的抗氧化能力,且在羟自由基清除能力测试中,2种金属螯合物的羟自由基清除率明显高于对应的低聚肽。抗过敏活性分析表明,在质量浓度<20 mg/mL时,低聚肽金属螯合物的透明质酸酶抑制率远高于对应的低聚肽。这与羟自由基测试的结果类似,可见该条件下样品的抗氧化能力和抗过敏活性存在一定的正相关联系。而质量浓度为20~100 mg/mL时低聚肽的抑制率随浓度明显增大,螯合物的抑制率增长则趋于平缓。螯合物在质量浓度<20 mg/mL条件下同时具有较强的抗氧化能力和抗过敏活性,可在食品药品方向进一步应用发展。

玉米低聚肽-维生素D 3和小麦低聚肽-维生素D 3微胶囊的制备与表征

以玉米低聚肽和小麦低聚肽为壁材,维生素D_(3)油为芯材,吐温-20为乳化剂,利用喷雾干燥法成功制备了2种低聚肽包埋维生素D_(3)微胶囊,对比分析了两类微胶囊单因素条件差异原因,并利用正交试验法筛选出玉米肽微胶囊和小麦肽微胶囊的最佳制备条件均为喷雾干燥温度150℃、芯材壁材比1∶20、固形物质量浓度0.15 g/mL,包埋率分别为75.8%和73.8%。微胶囊稳定性分析表明,两类微胶囊均有较好的热稳定性、溶解性和胃环境缓释作用。

双酶法制备饲料级小麦低聚肽的工艺研究

试验旨在研究使用双酶法制备饲料级小麦低聚肽。试验对比了食品级与饲料级蛋白酶水解谷朊粉的多肽含量,筛选出最佳的复合酶种类;在单因素试验基础上,利用正交试验优化酶解条件并测定可溶性小肽含量。结果显示,酶解工艺条件为谷朊粉添加量12%、pH值7.0、中性蛋白酶与碱性蛋白酶各添加3%、水解5 h。在此条件下,可溶性小肽含量84.34%。使用高效液相色谱测定其重均分子量为764 Da,分子量小于1 000 Da的小麦低聚肽占比87.19%。研究表明,使用饲料级蛋白酶酶解谷朊粉,小麦低聚肽含量显著提高,并降低成本,具有作为功能性饲料添加剂应用的潜力。

小麦低聚肽营养成分和特征功能肽段研究

以谷阮粉为原料,利用复合蛋白酶酶解、分离、纯化、浓缩、喷雾干燥获得小麦低聚肽,并研究了小麦低聚肽的理化指标、氨基酸组成、分子质量分布以及具有功能活性特征肽段成分。结果表明,小麦低聚肽的总蛋白含量(干基)为93.27%,肽含量(干基)为79.77%,分子质量主要分布在1000 u以下,占比92.60%;小麦低聚肽的氨基酸总量为91.56%,尤其是谷氨酸含量占比最高,为37.13%;通过超快速液相色谱串联三重四极杆质谱从小麦低聚肽中鉴定出5条具有功能活性的特征肽段成分,分别为焦谷氨酰谷氨酰胺酰脯氨酸三肽(pyroglutamyl glutamyl proline tripeptide,pEQP)、缬氨酰谷氨酰胺酰谷氨酰胺三肽(valyl glutamyl glutamine tripeptide,VQQ)、丙氨酰谷氨酰胺二肽(alanyl glutamine dipeptide,AQ)、丝氨酰谷氨酰胺二肽(sericyl glutamine dipeptide,SQ)、异亮氨酰谷氨酰胺二肽(isoleucyl glutamine dipeptide,IQ),其含量分别为0.464%、0.046%、0.191%、0.446%和0.145%,小麦低聚肽批次间含量稳定。研究结果为小麦低聚肽在营养保健食品中的应用奠定了基础。

小麦低聚肽粉中谷氨酰胺含量测定方法及其临床应用前景

采用BTI-AQC二步柱前衍生法建立了一种有效检测小麦低聚肽粉中谷氨酰胺含量的方法。该方法在2～100μmol/L谷氨酰胺浓度内有很好的线性关系(r^2=0.999 9),最低检出限为2μmol/L,所有标准品3次重复的衍生峰面积相对标准偏差RSD均<1%,最适条件下标准二肽AQ(Ala-Gln)的检测回收率为(95.94±0.22)%。该方法检测小麦低聚肽粉中Gln含量为(23.54±0.49)%,远高于其他常见食源性低聚肽类产品。测定结果显示,除具有高的谷氨酰胺含量外,小麦低聚肽粉还具有水溶性好、稳定性强、易于消化吸收、蛋白含量高、氨基酸组成均衡等优势。

小麦低聚肽对H_2O_2所致HepG2细胞氧化损伤的保护作用

分析小麦低聚肽氨基酸组成和相对分子质量分布,并对其保护过氧化氢所致人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的作用进行了研究。首先采用不同浓度小麦低聚肽作用HepG2细胞4 h,然后用150μmol/L过氧化氢氧化损伤细胞4 h,以细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量评价小麦低聚肽对HepG2细胞的保护作用。结果表明,小麦低聚肽相对分子质量小于1 000的组分高达93.44%,谷氨酸及脯氨酸含量较高;小麦低聚肽具有增加细胞存活率、抑制细胞内ROS生成、降低细胞内MDA含量的活性,对减少HepG2细胞的氧化应激及提高细胞抗氧化能力具有较好的作用效果。本研究从细胞水平上揭示了小麦低聚肽对过氧化氢所致的肝脏损伤具有一定的预防保护作用。

小麦低聚肽对体外肠上皮细胞氧化应激损伤的保护作用

文中研究了小麦低聚肽对氧化应激损伤的体外肠上皮细胞的保护作用。将实验分为5组,对照Ⅰ(空白组0μmol/L H2O2)、对照Ⅱ(氧化应激组100μmol/L H2O2),处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ(分别在对照组Ⅱ的条件下添加1、5、10 mg/m L小麦低聚肽),通过MTT法比较不同培养时间(12、24、48 h)小麦低聚肽对氧化应激损伤Caco-2细胞增殖率的影响,通过取培养至不同时间(12、24、48 h)的Caco-2细胞上清液、细胞裂解液,测定LDH、SOD、MDA含量变化。结果显示:1 mg/m L小麦低聚肽对损伤肠上皮细胞表现出显著的保护作用,细胞毒性降低、增殖率提高,细胞内SOD、MDA含量与氧化应激组相比均有显著性差异;小麦低聚肽对细胞的保护作用随着培养时间的延长而增强,24、48 h培养组与12 h培养组相比有显著性差异。小麦低聚肽对氧化应激损伤的体外肠上皮细胞有一定的保护作用,并且在一定范围内与浓度时间正相关。

小麦低聚肽对HepG2细胞胆固醇代谢的影响

目的:在对小麦低聚肽的基础理化成分和分子量分布进行分析的基础上,观察不同浓度的小麦低聚肽对人肝癌细胞株HepG2胆固醇代谢的影响。方法:将培养的HepG2细胞随机分为5组:对照组、2、4、6、8g/L小麦低聚肽实验组。经小麦低聚肽作用24h后,进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),定量分析低密度脂蛋白受体(LDLR)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA的表达。结果:与对照组相比,经小麦低聚肽作用后,各实验组HepG2细胞LDLR mRNA表达明显增加(p<0.05或p<0.01),其中6g/L小麦低聚肽组的LDLR mRNA表达增加最多;HMGCR mRNA表达均降低,2、4、6g/L小麦低聚肽组的HMGCR mRNA表达极显著降低(均为p<0.01),其中2g/L小麦低聚肽组的HMGCR mRNA表达降低最多。结论:不同浓度的小麦低聚肽均能升高HepG2细胞内LDLR mRNA水平和降低HMGCR mRNA水平,从而起到降低胆固醇的作用,为其开发利用提供了一定的实验依据和理论基础。

小麦低聚肽和谷氨酰胺对大鼠胃肠黏膜损伤的保护作用

观察灌胃小麦低聚肽和谷氨酰胺对非甾体类药物(NSAIDs)致大鼠胃肠黏膜损伤的保护作用。挑选70只SD大鼠随机分为空白对照组、损伤组及低、中、高剂量小麦低聚肽组[灌胃剂量分别为20、100、500 mg/(kg·d)]和小麦蛋白组、谷氨酰胺组[灌胃剂量均为20 mg/(kg·d)]。每天灌胃1次,连续灌胃30 d。大鼠处死前,用非甾体类药物灌胃损伤大鼠胃肠2次。取大鼠血清、胃和小肠黏膜组织,观察血清细胞因子、胃肠病理切片、小肠黏膜抗氧化酶和阿片受体mRNA表达的变化。结果显示非甾体类药物可以显著增加小肠黏膜的氧化应激水平,小麦低聚肽能上调小肠黏膜中GSH-Px的活力,具有一定的抗氧化功能,能够减轻胃肠黏膜损伤。小麦低聚肽还可以显著降低了血清中TNF-α含量,下调mu-阿片受体mRNA的表达。说明非甾体类药物可以诱导大鼠胃肠黏膜损伤的模型,小麦低聚肽可以有效减少大鼠胃肠黏膜损伤。低剂量小麦低聚肽组作用最强,效果优于谷氨酰胺组。

小麦低聚肽对急性酒精中毒小鼠抗氧化功能的影响

通过研究小麦低聚肽对乙醇氧化损伤小鼠血清和肝脏组织中氧化损伤及抗氧化指标的影响,初步评价小麦低聚肽对急性酒精中毒小鼠是否具有抗氧化功能。将60只清洁级健康雄性ICR小鼠按体质量随机分为空白对照组、模型组及小麦低聚肽低、中、高剂量组(0.4、0.8、1.6 g/kg mb),连续灌胃30 d,末次灌胃后,模型组和小麦低聚肽3个剂量组小鼠禁食26 h,再以12 mL/kg mb剂量灌胃体积分数50%乙醇溶液,空白组不作处理;6 h后摘眼球取血处死小鼠,测定小鼠血清、肝脏中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)活力、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及肝脏组织中蛋白质羰基含量。结果表明:与模型组相比,小麦低聚肽各剂量组小鼠肝脏中T-SOD活力均极显著提高(P<0.01);小麦低聚肽低剂量组小鼠血清(P<0.05)和肝脏(P<0.01)中GSH水平显著升高、肝脏中蛋白质羰基含量显著降低(P<0.05);小麦低聚肽高剂量组小鼠血清中MDA浓度显著降低(P<0.05)。提示小麦低聚肽能提高急性酒精中毒小鼠体内抗氧化能力,对小鼠急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用。

小麦低聚肽的功能作用研究进展及应用前景展望

综述小麦低聚肽抗氧化、调节免疫功能、降血压等功能作用的研究进展和应用展望,为小麦低聚肽的进一步开发利用提供思路。

小麦低聚肽对大黄所致大鼠脾虚证的影响

目的:探讨小麦低聚肽是否具有健脾作用。方法:先将48只大鼠随机分为空白对照组12只,造模组36只2组,雌雄各半。给予造模组大鼠灌服10 g生药/kg体质量的大黄水溶液,每天1次,连续2周。然后,再将造模组大鼠随机分为模型组、小麦低聚肽低剂量组和高剂量组3组各12只,雌雄各半。小麦低聚肽低剂量组和高剂量组分别给予0.277 g/kg体质量和0.554 g/kg体质量的小麦低聚肽,每日1次,连续7周。在给药同时除空白对照组外,其余各组大鼠继续灌胃相同剂量的大黄水溶液,隔天1次,连续7周。实验结束后,将各组大鼠处死取材进行各项指标检测。结果:与模型组比较,小麦低聚肽高剂量组大鼠的脾虚症状得到明显改善,大鼠胃黏膜厚度均明显增加,外周血清中D-XY、AMY水平均明显增高。结论:小麦低聚肽能够改善大黄所致的大鼠脾虚证并具有健脾作用。

小麦低聚肽对肉羊体外瘤胃发酵参数的影响

本试验旨在利用体外批次培养法研究饲粮中添加不同水平的小麦低聚肽对肉羊瘤胃发酵参数的影响,以筛选小麦低聚肽在肉羊饲粮中的适宜添加量。试验选取6只年龄、体况相近的健康小尾寒羊作为瘤胃液的供体,采用单因素试验设计,设1个对照组和6个试验组,每组6个重复。对照组采用基础培养底物(基础饲粮),试验组在基础培养底物中分别添加0.05%、0.10%、0.15%、0.25%、0.35%和0.45%的小麦低聚肽。分别于体外发酵2、4、8、12和24 h后,测定培养液的pH、氨态氮(NH 3-N)、菌体蛋白(MCP)、挥发性脂肪酸(VFA)浓度以及干物质降解率,并应用多项指标综合指数(MFAEI)进行评定。结果表明:1)发酵2 h时,0.25%组的pH显著低于对照组(P<0.05);发酵12和24 h,除0.05%组外其他试验组pH均显著低于对照组(P<0.05)。2)发酵4 h,0.25%组的NH 3-N浓度显著高于对照组(P<0.05);发酵8 h,0.35%组的NH 3-N浓度显著高于对照组(P<0.05);发酵24 h,0.25%、0.35%和0.45%组的NH 3-N浓度显著高于对照组(P<0.05)。3)发酵2 h,0.15%、0.25%和0.45%组的MCP浓度显著高于对照组(P<0.05);发酵8 h,各试验组的MCP浓度均显著高于对照组(P<0.05);发酵24 h,0.10%、0.15%和0.25%组的MCP浓度显著高于对照组(P<0.05)。4)发酵2和4 h,试验组的乙酸和丙酸浓度均显著低于对照组(P<0.05);发酵8、12和24 h,试验组乙酸和丙酸浓度均显著高于对照组(P<0.05);发酵8 h,0.25%和0.35%组乙丙比显著低于对照组(P<0.05);发酵24 h,0.45%组乙丙比显著高于对照组(P<0.05)。5)发酵12 h,0.05%、0.10%和0.15%组的干物质降解率显著高于对照组(P<0.05)。6)MFAEI由高到低排序为0.25%组>0.35%组>0.45%组>0.15%组>0.10%组>0.05%组。综上所述,在本试验体外培养条件下,饲粮中添加小麦低聚肽可有效促进肉羊体外瘤胃发酵,且最佳添加量为0.25%。

复合酶法制备小麦低聚肽的工艺研究

以小麦蛋白为原料,采用酶解法水解小麦蛋白制备小麦低聚肽。筛选出水解度最佳的单酶以及复合酶。通过单因素试验以及正交试验优化小麦蛋白的水解工艺的条件可以得出:胰蛋白酶与碱性蛋白酶复合水解时,小麦蛋白的水解度最高,水解度可达到37.72%。最佳条件为:先采用胰蛋白酶进行水解,水解温度40℃、p H为10、酶添加量7%、水解时间4 h;再利用碱性蛋白酶水解小麦蛋白,水解温度65℃、p H为8、酶添加量7%、水解时间3 h。采用高效液相色谱测出水解产物分子量大部分集中在1374~445 Da,且由峰面积计算含量为52.03%。

小麦低聚肽抗疲劳活性研究

目的:探讨小麦低聚肽对力竭游泳运动大鼠的抗疲劳作用。方法:选取60只8周龄健康SD大鼠(实测样本53只),随机分为5组,即安静对照组(C组)、运动对照组(E组)和安静营养组(CW组)、运动营养组(EW组)、运动营养大剂量组(EHW组)[灌胃剂量分别为20、20、100 mg/(kg·d)],每组12只,每天灌胃1次。E组、EW组和EHW组进行游泳训练,C组和CW组不进行训练。4周后,E组、EW组和EHW组大鼠进行力竭游泳实验,记录力竭运动时间。休息24 h后,取各组大鼠骨骼肌组织,测定骨骼肌糖原和MDA含量、骨骼肌SOD和GSH-Px活性。结果:小麦低聚肽可显著延长大鼠力竭运动时间,促进力竭运动后大鼠骨骼肌糖原的含量的恢复,提高力竭运动后大鼠骨骼肌SOD和GSH-Px的活性,降低骨骼肌MDA的含量。结论:高剂量小麦低聚肽具有较好的抗疲劳活性。

小麦低聚肽酶解方法及生物活性研究进展

综述了小麦低聚肽的酶解方法以及抗氧化活性、血管舒张活性、降低胆固醇、降低血压、健脾等生物活性功能的最新研究进展,展望了小麦低聚肽在食品、饲料等方面的应用前景,为进一步的研究和应用提供思路。