黄芩苷对GBS诱导小鼠乳腺炎症反应的干预作用及机制

为明确黄芩苷对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,GBS)诱导的小鼠乳腺组织炎症反应的干预作用及机制,本研究将分娩后7 d~10 d的40只健康BALB/c泌乳小鼠随机分为阴性对照组、感染组、高中低剂量黄芩苷治疗组(20 mg/kg、40 mg/kg和80 mg/kg)。感染组和治疗组以GBS感染BALB/c小鼠,治疗组于感染24 h后每6 h经乳导管灌注相应剂量的黄芩苷一次,连续4次,最后一次给药6 h后摘取乳腺组织,HE染色后观察乳腺组织病理变化;利用RT-q PCR和间接ELISA检测各组小鼠乳腺组织中炎症因子及NLRP3炎症小体通路相关因子m RNA的相对转录水平及分泌水平;利用免疫组化试验检测各组小鼠乳腺组织中NLRP3蛋白的定位及含量的变化。组织病变观察可见,GBS感染可导致小鼠乳腺上皮细胞坏死、脱落,乳腺腺泡腔固有结构消失;与感染组相比,各治疗组不同浓度的黄芩苷均可减轻小鼠乳腺组织病理损伤。RT-q PCR检测结果显示,感染组小鼠乳腺组织中IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA的相对转录水平显著或极显著高于阴性对照组小鼠(P<0.05或P<0.01);与感染组相比,各治疗组显著或极显著(P<0.05或P<0.01)下调IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、Caspase-1、NLRP3和ASC基因m RNA的相对转录水平。ELISA检测结果显示,与感染组相比,各治疗组小鼠灌注不同浓度的黄芩苷可极显著(P<0.01)下调乳腺组织中IL-1β、Caspase-1和NLRP3蛋白的分泌水平,且免疫组化试验结果显示各治疗组小鼠乳腺组织中NLRP3蛋白分布减少。综上所述,40 mg/kg黄芩苷降低小鼠乳腺炎症反应效果最好,可更有效下调NLRP3炎症小体通路相关基因m RNA相对转录水平,抑制NLRP3炎症小体活化,降低乳腺组织炎症因子m RNA相对转录和分泌水平,缓解GBS诱导的小鼠乳腺组织炎性损伤。本研究为应用黄芩苷治疗GBS感染导致的奶牛乳腺炎提供了参考依据。