PCV2-HPS二联亚单位疫苗对小鼠免疫保护效果的评价

为评价猪圆环病毒2型-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗(以下简称二联苗)对小鼠的免疫保护效果,本研究将猪圆环病毒2型(PCV2)cap基因克隆至pMAL-c5X载体中,并通过原核系统表达了重组Cap蛋白(rCap)。通过western blot检测显示原核表达的rCap与PCV2单克隆抗体发生特异性结合,表明rCap具有良好的反应原性。利用本研究室已经纯化并保存的副猪嗜血杆菌(HPS)重组蛋白rCdtB、rAfua和rOPPA,与rCap蛋白以及佐剂ISA201VG混合乳化后制成PCV2-HPS二联亚单位疫苗,疫苗中各蛋白(rCdtB、rAfua、rOPPA、rCap)浓度均为50μg/300μL。将60只6周龄BALB/c小鼠随机均分成免疫组和对照组,采用背部多点注射方式免疫,首免后间隔14 d二免。一免后以及二免后的14 d分别通过颌下采血方法采血,通过间接ELISA方法检测各组小鼠血清中的特异性抗体,结果显示,二免后14 d,免疫组小鼠血清中CdtB、OPPA、Afua抗体水平分别与PBS+ISA201VG对照组和免疫之前比较均极显著提高(P<0.0001);利用PCV2免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)抗体检测试剂盒检测各组小鼠血清抗体,结果显示在攻毒前PBS组均未检测到PCV2抗体,免疫组二免后14 d抗体水平为1∶800。二免后14 d,将免疫组和PBS组各随机分为3组(每组10只小鼠)进行攻毒保护试验,结果显示二联苗对PCV2攻毒组小鼠的免疫保护率为80%,对HPS5型HN10株攻毒组小鼠的免疫保护率为70%,与对照组比较差异极显著(P<0.01);对HPS13型ZD12株攻毒组小鼠的免疫保护率为80%,与对照组比较差异极显著(P<0.001)。上述结果首次表明,原核表达的rCap具有良好的免疫原性,PCV2-HPS二联亚单位疫苗对小鼠具有一定的保护效果,为后续PCV2-HPS二联亚单位疫苗的研究奠定了实验基础。

板蓝根提取物对小鼠免疫功能的影响

目的观察板蓝根提取物Fructopyrano-(1→4)-glucopyranose(FG)对小鼠免疫功能的影响。方法连续灌胃FG10 d后,处死小鼠,测定体质量、脾脏及胸腺重量,计算脾指数与胸腺指数,观察小鼠免疫器官重量的变化;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测试FG对小鼠非特异性免疫的影响;采用血清溶血素形成实验测试FG对小鼠体液免疫的影响。结果 FG能够增加小鼠免疫器官重量,提高巨噬细胞吞噬功能及增加B细胞产生抗体能力。结论 FG具有调节免疫功能,对非特异性免疫和体液免疫均有一定的增强作用。

金黄Ⅰ号对小鼠免疫功能的影响

复方合剂金黄朱丹号由黄芪、大枣、金银花等数味中药组成，方中的黄芪具有增强机体免疫、利尿等作用，并能使动物脾内浆细胞增生，促进抗体合成，对体液免疫功能有促进作用；大枣多糖对机体非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫均有显著增强作用。然而复方合剂金黄朱丹号是否也对机体免疫功能造成影响尚未证实，本研究探讨金黄朱丹号对小鼠免疫功能的影响。

夏枯草提取物对T淋巴瘤模型小鼠免疫机制的调控效果

目的:探讨夏枯草提取物对T淋巴瘤细胞模型小鼠抑瘤作用及其对T淋巴瘤EL-4细胞生长的影响。方法:优选BALB/C小鼠30只为研究对象,通过腹腔注射EL-4瘤株建立T淋巴瘤细胞小鼠模型。随机将其分为健康对照组、低剂量夏枯草、中剂量夏枯草、高剂量夏枯草、环磷酸胺组以及T淋巴瘤模型组,每组小鼠各5只。分别应用TUNEL法、MTT法、DNA琼脂糖凝胶电泳法分析夏枯草提取物对模型小鼠抑瘤率、细胞凋亡情况及细胞凋亡率的影响。结果:(1)体重分析:夏枯草中、高剂量组用药后小鼠体重与正常对照组无统计学意义(P>0.05),环磷酸胺组小鼠与对照组相比体重显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)抑瘤率:夏枯草提取物中、高剂量组抑瘤率高于低剂量组及环磷酸胺组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)TUNEL染色面积分析:夏枯草低剂量组及环磷酸胺组TUNEL染色中多见细胞核呈黄色浓染区,而中高剂量组及空白对照组仅出现个别棕黄色染色,且低剂量组及环磷酸胺组阳性区分光密度、阳性区面积、阳性平均灰度量化高于中高剂量组及空白对照组(P<0.05)。(4)Bax蛋白及BC2蛋白表达:夏枯草提取物中高剂量组与环磷酸胺组相比,Bax蛋白表达增加,而BC2蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:夏枯草提取物能有效抑制T淋巴瘤细胞生长,促进细胞肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能与其调控Bax蛋白及BC2蛋白表达有关。

小鼠免疫细胞流式染色过程中细胞丢失量的影响因素

目的观察和探讨小鼠免疫细胞多色流式染色过程中细胞丢失的影响因素。方法取C57BL/6J鼠制备脾细胞悬液,分别用不同种类、不同成分和不同pH值缓冲液洗涤和重悬细胞2次,并计数活细胞数量,观察对染色过程中的细胞丢失量有明显影响的因素。结果在小鼠免疫细胞的流式染色标记过程中,缓冲液种类对细胞丢失量有显著影响,含有钾离子的PBS缓冲液洗涤后会造成明显的细胞丢失;离心机转速过高或过低均会导致显著的细胞丢失;而缓冲液pH值的微量偏移和是否加入FBS/BSA对细胞的丢失影响不明显。结论小鼠免疫细胞的流式染色过程中使用含有钾离子的PBS缓冲液会造成明显的细胞丢失,应推荐使用不含钾离子的PBS缓冲液,同时保持离心转速适中。

北沙参对小鼠免疫功能的影响研究

北沙参为常用中药,2010版《中华人民共和国药典》收载为伞形科植物珊瑚菜Glehnia littoralisFr.Schmidt ex Miq.的干燥根,其化学成分丰富,类型复杂,具有镇咳祛痰、抗菌、抗癌和滋阴补虚等药理作用。目前对北沙参的相关研究主要集中在栽培种植技术和化学成分鉴定分离分析等方面,

玉屏风散发酵液对小鼠免疫功能的调节作用

1实验材料 试剂：RPMI-1640（Hyclone Cat．No．SH30197．01），标准胎牛血清（中国医学科学院工程研究所Cat．No．TB00032HYP），青链霉素（Hycloae Cat．No．SV30010），玉屏风散煎剂及玉屏风散发酵液由本室自制。仪器：酶标仪（Laysystems Multiskan Ascoent）。UV-2550紫外分光光度计（日本岛津）。动物：昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄不限，由本院实验动物中心提供。

人脐带间充质干细胞联合番茄红素对衰老小鼠免疫功能的影响

背景:人脐带间充质干细胞、番茄红素均有延缓衰老的作用,而二者联合应用对衰老机体免疫功能影响的研究却未见报道。目的:分析人脐带间充质干细胞联合番茄红素对D-半乳糖诱导衰老小鼠免疫功能的影响。方法:ICR小鼠雌雄各半,随机分为正常对照组、模型组、番茄红素组、干细胞组及干细胞联合番茄红素组。模型组与各治疗组连续8周颈背部皮下注射D-半乳糖溶液,同时进行相应的治疗干预。造模结束后检测各组小鼠血液衰老相关T淋巴细胞百分比、血清白细胞介素2、白细胞介素4水平并观察脾脏、胸腺组织结构。结果与结论:3个治疗组均能提高衰老小鼠血液CD3+、CD8+CD28+T细胞百分比及血清白细胞介素2、白细胞介素4水平(P<0.01);与模型组相比,联合组初始性CD8+T细胞百分比升高,记忆性CD8+T细胞百分比降低(P<0.05),干细胞及番茄红素组初始性及记忆性CD8+T细胞百分比变化不显著(P>0.05);各组初始性及记忆性CD4+T细胞百分比变化均不显著(P>0.05);胸腺、脾脏镜下观察发现:模型组胸腺小体缩小,脾脏淋巴小结明显增多,髓质淤血;正常对照组与3个治疗组胸腺、脾脏皮质髓质均未见明显病变。结果表明人脐带间充质干细胞、番茄红素均可以不同程度改善衰老小鼠免疫功能,且联合治疗效果更优。

四味藏木香软胶囊对环磷酰胺致小鼠免疫低下模型的影响

[目的]研究四味藏木香软胶囊对环磷酰胺致小鼠免疫低下模型免疫功能的影响。[方法]以昆明种小鼠为动物模型,分为空白组、模型组、四味藏木香软胶囊(大、小剂量)组和阳性药(盐酸左旋咪唑片)组,观察环磷酰胺致小鼠免疫低下模型腹腔巨噬细胞得吞噬率和吞噬指数,采用溶血素抗体测定法观察小鼠溶血素抗体生成和药物对DNFB所致小鼠迟发型变态反应的影响。[结果]与模型组相比,四味藏木香软胶囊能明显增加小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数;促进小鼠机体溶血素抗体的生成。试验中迟发型超敏反应的小鼠左右耳重量差异显著,且高于模型组和对照组,差异显著,有统计学意义。[结论]四味藏木香软胶囊能增强环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能。

乌药精颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的观察乌药精颗粒对小鼠免疫功能的影响。方法实验设乌药精颗粒低、中、高3个剂量组(1.0g/kg、2.0g/kg和6.0g/kg,分别相当于人推荐量的5、10、30倍),另设乌药组(0.9g/kg)、别直参组(2.0g/kg)及阴性对照组(H2O),经口给予30天。分别观察ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增生功能、对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素含量及NK细胞活性的影响。结果高、低剂量组乌药精颗粒均可明显提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增生功能,与阴性对照组比较有明显差异(P<0.05、0.01);乌药精颗粒高剂量组可明显提高对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应功能,与阴性对照组比较有明显差异(P<0.05);各剂量组乌药精颗粒对小鼠抗体生成细胞、血清溶血素含量及NK细胞活性均无明显差异(P>0.05)。结论乌药精颗粒可明显提高小鼠ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增生功能及二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应功能。

扶正女贞素片和贞芪扶正颗粒对小鼠免疫功能的影响

近年来，我国各型癌症的发生率呈逐年上升趋势。资料显示癌症的发生与机体免疫功能抑制密切相关。多种药物可以纠正免疫抑制状态，而中药以其独特的优势为人们逐渐接受和认可，并得以广泛应用，其中贞芪扶正颗粒和扶正女贞素片在临床上应用比较广。两药组方应用相近，但成分上存在单方与复方的不同，性价比亦有一定差距。为验证比较两药药效，我们从小鼠免疫功能的角度进行了初步证实观察，现报告如下。

芦荟多糖对正常小鼠免疫作用影响的研究

目的 :观察芦荟多糖对正常小鼠免疫功能的影响。方法 :用正常小鼠进行实验。结果 :芦荟多糖可显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数 ,促进溶血素及溶血空斑形成 ,促进淋巴细胞转化。结论 :芦荟多糖有好的免疫兴奋作用。

千斤拔不同萃取部位对小鼠免疫功能的影响

目的研究千斤拔不同萃取部位对小鼠免疫功能的影响。方法对小鼠连续灌胃10d,给予千斤拔水提物、石油醚部位、氯仿部位和乙酸乙酯部位提取物。进行脏器/体重比值测定、乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性、ConA诱导的淋巴细胞转化率实验和小鼠碳廓清实验。结果与对照组相比,千斤拔水提物组、乙酸乙酯萃取部位组小鼠的胸腺指数与脾脏指数升高、NK细胞活性增强、淋巴细胞增殖能力提高,而小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能没有明显变化。结论千斤拔水提物、乙酸乙酯萃取部位有增强小鼠免疫功能的作用。

园参与林下山参对小鼠免疫功能影响的比较

目的考察园参与林下山参对小鼠免疫功能的影响。方法将正常的小鼠随机分成7组,即:对照组,园参原粉小、中、大剂量(0.17、0.34、0.51g生药/kg)组,10年以上林下山参原粉小、中、大剂量(0.17、0.34、0.51g生药/kg)组,每组10只,连续灌胃给药30天后,处死小鼠。观察各组小鼠胸腺指数和脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬功能。结果园参原粉和林下山参原粉高剂量组显著增加正常成年小鼠的胸腺指数和脾脏指数:园参原粉和林下山参原粉大、中剂量显示出提高巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率。结论人参对于免疫器官重量及指数、脾淋巴细胞的增殖、腹腔巨噬细胞吞噬率有一定的提高作用,并且林下山参活性强于园参。

犬新孢子虫刺激小鼠免疫细胞IFN-γ和IL-12的变化

犬新孢子虫是一种传播范围极广的寄生性原虫,是导致母畜流产、死胎,新生胎儿运动或神经障碍的主要病原之一。本研究主要通过收集纯化了犬新孢子虫,制备可溶性抗原,分离培养小鼠脾细胞和树突状细胞,观察犬新孢子虫对小鼠脾细胞和树突状细胞的作用,发现犬新孢子虫滋养体抗原可以刺激小鼠T淋巴细胞和树突状细胞,分别产生很高的INF-γ和IL-12,说明犬新孢子虫感染宿主后可引起机体产生Th1型免疫反应,为进一步研究犬新孢子虫的感染和宿主免疫应答机制奠定基础。