单克隆非特异性抑制因子-β(MNSFβ)在大肠杆菌中的表达、抗体的制备及在小鼠子宫内膜上的组织定位

为了获得足够量的单克隆非特异性抑制因子-β蛋白(monoclonal nonspecific supressor factor β,MNSFβ)及其抗体用于探讨MNSFβ在着床中的作用机理,本研究构建了表达质粒pBV220/MNSFβ-hCGβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白MNSFβ-hCGβ,用抗hCGβ抗体对表达产物进行鉴定,结果表明融合蛋白MNSFβ-hCGβ得到了正确表达,且分子量和理论值相近。表达产物MNSFβ-hCGβ经初步纯化后用于免疫Balb/C小鼠,制备抗体。同时,我们还构建了表达质粒pGEX-4T-2/MNSFβ,在大肠杆菌中表达了融合蛋白GST-MNSFβ。用融合蛋白GST-MNSFβ对融合前的免疫小鼠回忆刺激并进行检测,制备了抗MNSFβ多克隆抗体和单克隆抗体。应用所制备的多克隆抗体进行免疫组化研究,对MNSFβ在小鼠子宫内膜上进行了组织定位,结果显示,MNSFβ在着床日(受精后第4.5天)小鼠子宫非着床位点的表达和着床位点相比明显提高。

冠心病心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂、不规则趋化因子、单核细胞趋化蛋白-1与心功能、心肌损伤指标相关性分析

目的:探讨冠心病(CHD)心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、不规则趋化因子(Fractalkine)与心功能、心肌损伤指标的相关性。方法:选取150例CHD心绞痛患者作为观察组(不稳定型心绞痛患者64例为A组、稳定型心绞痛患者86例为B组),同期收治的164例非CHD患者为C组。比较三组血清Fractalkine、Vaspin、MCP-1水平、心功能指标及心肌损伤指标,相关性采用Pearson相关性分析。结果:A组血清Vaspin水平低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组血清Fractalkine、MCP-1水平高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组各心肌损伤指标水平均高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。Pearson相关性分析:CHD心绞痛患者血清Vaspins水平与LVEF、FS成正比;血清Vaspins水平与LVEDD、LVESD、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEF、FS成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEDD、LVESD、CK、CK-MB、cTnI、H-FABP成正比(均P<0.05)。结论:随着CHD心绞痛患者病情加重,患者心功能及心肌损伤越严重,且患者血清Vaspins、Fractalkine、MCP-1与患者心功能及心肌损伤具有密切联系,临床可根据其水平变化评估病情进展情况。

Toll样受体4单克隆抗体对急性期溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜Toll样受体4介导的核因子-κB信号通路的影响

目的探讨Toll样受体4(TLR4)单克隆抗体(TLR4mAb)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜TLR4介导的核因子(NF)-κB信号通路中磷酸化IκB激酶(p-IKK)及NF-κB的影响情况。方法30只BALB/c小鼠均分为正常对照组(A组)、UC模型组(B组)及低、中、高剂量TLR4mAb干预组(C、D、E组)。A组小鼠饮用蒸馏水7d;B、C、D、E组小鼠饮用5%DSS水溶液7d以制成UC模型。造模同时,C、D、E组小鼠分别腹腔注射低、中、高剂量TLR4mAb。造模及干预7d后处死小鼠,观察指标包括疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分(HPS)。采用Western印迹法检测各组肠黏膜p-IKK的蛋白表达,蛋白凝胶电泳迁移率变动分析法(EMSA法)检测NF-κB的活性变化。结果B组小鼠的结肠黏膜DAI及HPS均显著高于A组(P值均<0.01)。与模型组相比,使用TLR4mAb干预后中、高剂量组HPS有不同程度的缓解(P值均<0.01)。②与B组相比,D、E组的TLR4mAb后p-IKK表达及NF-κB的活性均显著下降(P值分别<0.05、0.01)。结论TLR4mAb可以减轻肠道炎症,发挥干预作用,其机制可能是通过抑制TLR4介导的NF-κB通路关键蛋白的表达,降低NF-κB的活性,继而减少下游炎性因子过度表达。

巨噬细胞抑制因子-1单克隆抗体的研制及血清检测系统的建立

目的研制巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)单克隆抗体并建立MIC-1血清检测方法。方法应用自主研制的MIC-1抗原免疫BALB/C雌鼠,通过杂交瘤技术获得分泌抗MIC-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA方法构建MIC-1血清检测体系并对性能进行鉴定。结果成功获得了32株抗MIC-1单克隆抗体,选用其中2株高亲和力单克隆抗体建立了双夹心ELISA MIC-1血清快速检测方法。性能鉴定结果表明所建立的方法线性关系良好(R2值大于0.999);试验内变异系数为5.15%,试验间变异系数为9.51%;平均回收率为98.9%;37℃保存3天和4℃保存6个月稳定性良好。结论所制备的MIC-1检测方法各项指标均达到SFDA相关要求,能够满足科学研究和临床检测的技术需要,并进入产业化程序。

一株抗人血小板第4因子单克隆抗体(SZ-95)的特异性鉴定

目的 研究一株新制备的抗人血小板第４因子（ＰＦ４）单克隆抗体（ｍＡｂ）ＳＺ－９５的抗原表位和对ＰＦ４结合肝素功能的影响。 方法通过间接ＥＬＩＳＡ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ以及肝素－ＰＦ４复合物ＥＬＩＳＡ研究ＳＺ－９５所识别的抗原决定簇和其对ＰＦ４生物学功能的影响。 结果 这株特异性识别人ＰＦ４的ｍＡｂ不识别与ＰＦ４高度同源的β－血小板球蛋白（β－ＴＧ），以及包括ＰＦ４分子中部大部分β折叠的合成多肽（Ｐ３４－５８）。并且，抗体结合肝素－ＰＦ４复合物的数量随复合物中的肝素量增加而减少。结论我们推测ＳＺ－９５识别的抗原表位可能位于人ＰＦ４ Ｎ末端的可变区域或者Ｃ末端α螺旋。并且ｍＡｂ结合肝素－ＰＦ４复合物的肝素剂量依赖性改变，说明ＳＺ－９５识别的抗原表位与肝素与ＰＦ４的结合位点有关，可能影响ＰＦ４中和肝素的功能，有助于ＰＦ４结构和功能的进一步研究。

新型基因工程人肿瘤坏死因子-α对小鼠移植性肿瘤生长的抑制作用

目的 观察新型基因工程人肿瘤坏死因子α(nrhT NF α) ,对小鼠移植性肿瘤 (肉瘤S180、肝癌H2 2、黑素瘤B16和Lewis肺癌 )生长的抑制作用。方法以 3种剂量 (37 5、75和 15 0万U/kg体重 )的nrhTNF α肌肉注射小鼠 ,每天 1次 ,连续 8d。通过称量所形成的肿瘤重量 ,观察nrhTNF α对瘤细胞株的抑制作用。结果肿瘤抑制率计算结果显示 ,nrhTNF α对 4株瘤细胞的生长均有较明显的抑制作用 ,且呈剂量依赖关系。另外 ,在剂量相同的情况下 ,nrhTNF α的抑瘤作用明显强于重组人TNF α(rhTNF α)。结论nrhTNF α对小鼠移植性肿瘤生长具有很强的抑制作用。本研究为nrhTNF

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1高表达抑制黑素瘤细胞在小鼠体内的生长

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antienzyme inhibitor-1,OAZI-1)是细胞内调节多胺代谢的重要蛋白质因子。已有研究发现,OAZI-1高表达的黑素瘤细胞在体外能更有效地被抗原提呈细胞识别和吞噬,提示OAZI-1在肿瘤免疫治疗中具有潜在的应用价值。为进一步分析OAZI-1高表达对黑素瘤细胞在小鼠体内生长的影响,高表达OAZI-1的黑素瘤细胞(B16/OAZI-1)被接种到实验小鼠体内,结果发现,接种瘤出现先成瘤随后逐渐消退的现象,至第24 d时,接种瘤的平均体积为36±25 mm3~,而对照细胞接种瘤的平均体积为326±309 mm^3。为探索上述现象的机制,随后分析了B16/OAZI-1在小鼠体内诱导的抗肿瘤免疫效应,结果发现:1)B16/OAZI-1接种显著增加了小鼠脾脏细胞对B16-F1瘤细胞的杀伤活性;2)源于B16-F1的细胞抗原能更有效地促进B16/OAZI-1接种小鼠脾脏细胞的增殖;3)B16/OAZI-1接种小鼠的脾脏细胞具有更强的分泌IFN-γ的能力;4)当在预接种B16/OAZI-1 30 d后的小鼠体内再次接种B16-F1活细胞时,新接种瘤细胞的生长受到显著抑制,小鼠的存活率增加。上述研究结果提示,高表达OAZI-1的黑素瘤细胞在实验动物体内的生长受到显著抑制,其机制可能与OAZI-1能促进肿瘤抗原提呈和诱导抗肿瘤免疫效应相关。

微调三号方对小鼠大肠癌肝转移灶基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制因子-2的影响

目的:探讨微调三号方(WD-3)对小鼠大肠癌肝转移灶基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的影响。方法:建立BALB/c鼠结肠腺癌肝转移模型,随机分为6组:模型组,西药组,中药低、中、高剂量组,中西药组,分组治疗4周。免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测转移灶MMP-2、TIMP-2积分光密度及MMP-2/TIMP-2比值。结果:与模型组比,中西药组及西药组小鼠肝转移灶TIMP-2含量增高,且前者与后者比较,差异有显著性意义(P<0.05);中西药组和西药组小鼠MMP-2/TIMP-2比值均降低,与模型组及各中药组比较,差异有显著性意义(P<0.05),且中西药组与西药组比较亦有显著性意义(P<0.05)。结论:微调三号方配合化疗可降低肝转移灶内MMP-2/TIMP-2比值,提示对小鼠大肠癌肝转移可能具有抑制作用。

脑特异性血管抑制因子-1在宫颈鳞癌中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

目的观察脑特异性血管抑制因子-1(brain-specific angiogenesis inhibitor-1,BAI-1)在宫颈病变组织中的表达差异,分析其在宫颈鳞癌发生发展中存在的意义及与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的关系。方法分别通过SP法和PCR反向点杂交法对BAI-1和HPV在30例正常宫颈组织、61例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织(CINⅠ27例,CINⅡ~Ⅲ34例)以及54例宫颈鳞癌组织(Ⅰ~Ⅱ期34例,Ⅲ~Ⅳ期20例)中的表达和感染情况进行总结分析,从而探讨其与宫颈鳞癌发生发展的关系及与HPV感染的相关性。结果 BAI-1在不同宫颈组织中的阳性表达率分别为96.67%、74.07%、44.11%、18.52%,而HPV的阳性感染率为6.67%、37.04%、76.47%、100%。分析数据得出,随着宫颈病变的进展,BAI-1的阳性表达率逐渐在下降,而HPV的阳性感染率在上升,组间差异均有统计学意义(P<0.01);且BAI-1与宫颈鳞癌的临床分期有关(χ2=7.219,P=0.007),与年龄、分化程度及有无淋巴结转移无关;在不同宫颈组织中BAI-1的阳性表达与HPV的阳性感染呈负相关(rs=-0.486,P<0.01)。结论 BAI-1可能参与HPV感染导致的宫颈鳞癌的早期发生发展过程,为宫颈鳞癌的诊治及预后提供了新的方向。

特异性环氧化酶-2抑制剂对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用

目的:探讨特异性环氧化酶(COX)-2抑制剂rofecoxib对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用及其机制。方法:将12只3月龄MRL/lpr自发狼疮小鼠随机均分为rofecoxib组和无药物干预的对照组,rofecoxib组予以rofecoxib 10 mg.kg-1.d-1。12周后分别测定各组小鼠尿蛋白排泄量、血肌酐水平;放射免疫法测定血清抗ds-DNA抗体结合率、AngⅡ,尿TXB2、6-Ket-F1α的变化;肾组织病理学检查及免疫组化测定肾组织COX-2、TGF-β1蛋白的表达。结果:12周后,rofecoxib组尿蛋白排泄量、血肌酐水平降低(P<0.05);肾小球细胞外基质明显减少(P<0.05);免疫组化结果表明,rofecoxib组肾组织内COX-2、TGF-β1表达较对照组减少(P<0.05)。rofecoxib组尿TXB2及血AngⅡ水平较对照组明显降低(P<0.05),但两组血清抗ds-DNA抗体结合率和尿6-Ket-F la水平均无显著性差异(P>0.05)。结论:COX-2抑制剂对自发狼疮小鼠肾损害有良好的治疗作用,能减少细胞外基质的聚积,降低蛋白尿,稳定肾功能,具有保护肾脏的作用。

基质金属蛋白酶组织抑制因子-1对小鼠肝脏肝脏巨噬细胞募集作用的研究

目的观察用脂质载体Lipidoid携带小干扰RNA(siRNA)的方式降低小鼠肝脏基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)蛋白的表达对肝脏巨噬细胞募集的影响。方法 8周龄雄性C57BL/6小鼠分别给予四氯化碳(CCl4)灌胃建立小鼠肝脏纤维化模型,造模同时尾静脉注射Lipidoid、Lipidoid/siRNA-TIMP-1。应用Masson染色评估各组小鼠肝脏纤维化程度;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测Lipidoid/siRNA-TIMP-1对小鼠肝脏组织TIMP-1蛋白以及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平的影响;通过F4/80染色,观察Lipidoid/siRNA-TIMP-1降低TIMP-1后对小鼠肝脏纤维化过程中巨噬细胞募集的影响。结果 Masson染色发现,CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型中,Lipidoid/siRNA-TIMP-1能够缓解肝脏纤维化程度;qRT-PCR和Western blotting显示Lipidoid/siRNA-TIMP-1治疗组较CCl4+Lipidoid对照组小鼠肝脏组织中TIMP-1蛋白表达降低(P<0.05%),同时MCP-1蛋白的表达也受到抑制;F4/80染色结果提示,Lipidoid/siRNA-TIMP-1能够减少巨噬细胞在CCl4诱导的小鼠纤维化肝脏组织中的募集。结论 Lipidoid/siRNA-TIMP-1能够有效降低小鼠肝脏组织中TIMP-1的表达,影响巨噬细胞募集,发挥抗纤维化作用。

金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1,-3)mRNA在小鼠胎盘中的表达

本实验利用原位杂交对小鼠妊娠不同时期胎盘中MMP 2 ,TIMP 1, 3mRNA的表达进行了研究。结果表明 :MMP 2主要在具有很强的侵润能力的海绵滋养层细胞中表达 ,到妊娠 13 5天时 ,MMP 2的表达明显降低 ,说明此时的滋养层细胞基本上失去侵润能力。TIMP 1和TIMP 3在滋养层细胞和蜕膜细胞中都有表达 ,这两种抑制因子的协同表达 ,一方面能够调控滋养层细胞侵入子宫内膜的深度 ,另一方面 ,滋养层细胞自身既表达MMP 2又表达TIMPs,可能对其自身有保护作用 ,使得MMP的水解功能局限于子宫蜕膜的特定区域。在妊娠 10 5天 ,滋养层巨细胞同时表达TIMP 1, 3mRNA ,这可能与其功能的转换是一致的 ;因为此时小鼠滋养层巨细胞体积最大 ,且不再增殖 ,同时其功能也从侵入型向内分泌型转换。所以 ,MMPs和TIMPs在小鼠滋养层细胞和子宫蜕膜中的协同表达表明其在着床过程中可能发挥重要作用。

探析白血病抑制因子对小鼠眼视网膜缺血-再灌注损伤中的视网膜神经节细胞保护效果

眼部缺血-再灌注会导致视网膜组织的结构及代谢活动发生一系列的变化,从而导致视网膜神经组织损伤,造成永久性的视力损失。视网膜组织缺血-再灌注(RIR)损伤多是由糖尿病引起的视网膜病变、缺血性的视神经病变、青光眼等。临床治疗RIR损伤主要是以恢复视网膜血液再灌注为主,大量研究证实及早恢复视网膜血液供给状况可明显改善病情[1]。随着不断的深入研究,研究专家注意到一段时间的缺血状况并未给视网膜功能造成损伤,而再灌注后,出现了功能性障,其结构及功能也可能会出现不可逆的损伤.

促红细胞生成素对单侧输尿管梗阻小鼠肾组织中基质金属蛋白酶-3及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2的影响

[目的]通过分析促红细胞生成素(EPO)对基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的作用,探讨了EPO对肾间质纤维化进展过程的影响.[方法]选取2~4周龄雄性昆明种幼鼠,随机分为假手术组、肾间质纤维化模型组(UUO组)和EPO治疗组(EPO组).UUO组和EPO组采用结扎单侧输尿管的方法制作肾间质纤维化小鼠模型,EPO组于术后1 d开始腹腔注射给予EPO溶剂1000 U/(kg·d),共14 d,假手术组和UUO组腹腔注射给予等量生理盐水.于术后第3、7、14天取材,采用脲酶法检测眼球血清中BUN含量、肌氨酸氧化酶法检测SCr含量;采用HE和Masson染色技术观察肾组织病理变化,利用Banff分级法对肾间质损伤进行半定量评分,并采用Image-Pro Plus图像分析软件定量分析肾间质纤维化程度;采用免疫组织化学染色技术检测肾组织中MMP-3、TIMP-2蛋白表达,并使用Image-Pro Plus图像分析系统选取积分光密值为参数进行半定量分析.[结果]生物化学观察结果显示,各时间点UUO组SCr、BUN含量均明显高于假手术组(P<0.05)及EPO组(P<0.05).病理观察结果显示,随时间推移UUO组肾小球数量逐渐减少,肾单位大量消失,肾小管管腔塌陷,结构破坏严重,肾皮质变薄;EPO组各时间点肾组织病理改变明显减轻,肾小管间质损伤评分和肾间质纤维化相对面积均明显低于UUO组(P<0.05),但均明显高于假手术组(P<0.05).免疫组织化学观察结果显示,各时间点UUO组中MMP-3和TIMP-2表达均明显高于同时间点的假手术组(P<0.05),EPO组中MMP-3表达均明显高于UUO组(P<0.05);EPO组各时间点TIMP-2蛋白表达均明显高于同时间点的假手术组、而低于同时间点的UUO组(P<0.05).[结论]EPO可能通过调节肾组织中MMP-3、TIMP-2蛋白表达抑制肾间质纤维化,从而起到保护肾组织的作用.

金丝桃苷联合核因子-κB抑制剂对肺炎小鼠肺指数及sB7-H3水平的影响

目的探讨金丝桃苷(Hyp)联合核因子-κB(NF-κB)抑制剂对肺炎小鼠肺指数及sB7-H3水平的影响。方法60只4~6周龄SPF级BALB/c小鼠按照随机数字表法分为4组,每组各15只,选取其中45只采用脂多糖口咽吸入法建立肺炎模型,Hyp干预组进行50 mg/kg Hyp灌胃和0.9%氯化钠溶液皮下注射;联合干预组进行50 mg/kg Hyp灌胃和5μmol/LNF-κB抑制剂BAY11-7082皮下注射;对照组和肺炎模型组进行等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃和皮下注射,均连续干预8周。分别于干预2、5和8周,称重并计算小鼠肺指数;干预8周,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测4组BALF和肺组织匀浆sB7-H3、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)水平,蛋白质印迹法检测肺组织Akt和NF-κB蛋白磷酸化水平,并计算p-Akt/Akt和p-NF-κB/NF-κB比值。结果HYP干预组和联合干预组肺指数均随干预时间显著降低(P<0.05)。干预2周,与对照组相比,肺炎模型组、Hyp干预组和联合干预组小鼠肺指数均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05),而后3组差异无统计学意义(P>0.05);而干预5周,联合干预组肺指数较肺炎模型组显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),但2个治疗组相比差异无统计学意义(P>0.05);干预8周后,4组间两两相比差异均有统计学意义,且联合干预组肺指数也显著低于HYP干预组(P<0.05),即将该时间点作为后续指标检测最佳时间点。干预8周,与对照组相比,肺炎模型组、Hyp干预组和联合干预组BALF及肺组织sB7-H3、TNF-α和IL-8水平、肺组织Akt和NF-κB蛋白磷酸化水平均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与肺炎模型组相比,Hyp干预组和联合干预组BALF及肺组织sB7-H3、TNF-α和IL-8水平、肺组织Akt和NF-κB蛋白磷酸化水平均显著降低,且联合干预组以上指标也较Hyp组显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论经金丝桃苷联合NF-κB抑制剂联合干预后,肺炎小鼠肺指数、BALF和肺组织sB7-H3水平均显著下降,其作用机制可能与抑制Akt和NF-κB蛋白磷酸化水平,并进一步降低炎症反应有关。

质子泵抑制剂对SGC-7901胃腺癌裸小鼠癌性恶病质的作用

背景:癌性恶病质是癌症晚期最重要的并发症之一。质子泵抑制剂(PPIs)目前广泛用于治疗酸相关疾病,有研究显示其对恶性肿瘤细胞具有化疗增敏和诱导凋亡作用。目的:探讨PPIs对裸小鼠癌性恶病质的改善作用及其可能机制。方法:予BALB/c nu/nu裸小鼠皮下注射人胃腺癌细胞株SGC-7901建立癌性恶病质模型并予PPIs干预(奥美拉唑治疗组和泮托拉唑治疗组),同时设立不予干预的癌性恶病质组和非荷瘤空白对照组,每组11只裸小鼠。观察各组裸小鼠的一般情况、肿瘤体积以及与癌性恶病质的发生、发展密切相关的血清细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:两组PPI治疗组裸小鼠体质量下降受抑,摄食、饮水量明显高于癌性恶病质组,血清TNF-α、IL-6水平明显低于癌性恶病质组,差异均有统计学意义(P<0.05),肿瘤体积则与癌性恶病质组无明显差异。结论:PPIs对裸小鼠的癌性恶病质有明显改善作用,其机制可能与改变体内细胞因子水平有关。

冠心病患者血清脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂与炎性因子的相关性

目的探讨冠心病(CHD)患者血清脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)与炎性因子的关系。方法选择CHD患者139例,健康对照者52例,依据相关诊断标准将CHD患者分为稳定性心绞痛(SAP)组54例、不稳定性心绞痛(UAP)组48例、急性心肌梗死(AMI)组37例,同时根据冠状动脉病变支数将CHD患者分为1支病变组60例、2支病变组46例、≥3支病变组33例。采用ELISA法测定血清中vaspin、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-10、1,25二羟维生素D3〔1,25(OH)_2D_3〕,并做统计学处理。结果 CHD组vaspin、1,25(OH)_2D_3低于健康对照组,TNF-α、IL-6、IL-10高于健康对照组(P<0.05)。按临床类型分组:AMI组vaspin、1,25(OH)_2D_3低于SAP组、UAP组,TNF-α、IL-6、IL-10高于SAP组、UAP组(P<0.05);UAP组vaspin、1,25(OH)_2D_3低于SAP组,TNF-α、IL-10高于SAP组,(P<0.05)。将CHD患者按照血管病变的情况分组:≥3支病变组vaspin、1,25(OH)_2D_3低于1支病变组和2支病变组,TNF-α、IL-6、IL-10、Gensini积分高于1支病变和2支病变组(P<0.05)。2支病变组vaspin、1,25(OH)_2D_3低于1支病变组,(TNF)-α、(IL)-10、Gensini积分高于1支病变组,(P<0.05)。Spearman相关分析显示,在CHD组血清vaspin与BMI、1,25(OH)_2D_3呈正相关(r值分别为0.462、0.214,P<0.05),与TNF-α、IL-6、IL-10呈负相关(r值分别为-0.320、-0.238、-0.321,P<0.05)。根据血管病变支数分组:Gensini积分与vaspin、1,25(OH)_2D_3呈负相关(r值分别为-0.538、-0.242,P<0.05),与TNF-α、IL-6、IL-10呈正相关(r值分别为0.385、0.265、0.341,P<0.05)。结论 CHD患者具有较低浓度的vaspin,vaspin含量与炎性因子相关,与CHD的血管病变严重程度有关。

PS-341对小鼠重症急性胰腺炎核因子-κB活化的影响

目的观察PS-341对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)活化的影响,阐明PS-341对SAP的作用机制。方法采用连续7次腹内注射雨蛙素(每次间隔1h)及脂多糖制作小鼠SAP模型,将60只ICR雌性小鼠随机分为PS-341治疗组(注射脂多糖前0.5h腹内注射0.5mg/kgPS-341),模型对照组(注射脂多糖前0.5h腹内注射50%DMSO),空白对照组(生理盐水制模)。最后一次注射雨蛙素后2h麻醉小鼠,取血检测血淀粉酶,光镜下观察小鼠胰腺和肺脏的病理形态,测定胰腺组织中髓过氧化物酶水平,实时荧光定量PCR测定胰腺组织中黏附分子(ICAM-1)的含量,免疫印迹法(Westernblotting)检测胰腺组织中IκBα的表达,电泳迁移率实验(EMSA)测定NF-κB活性。结果 PS-341治疗组和模型对照组比较,胰腺组织中I-κB降解减少,NF-κB活性显著下降,血清淀粉酶、MPO、胰腺组织中细胞黏附分子ICAM-1的表达都明显降低(P<0.05)。胰腺和肺脏组织病理学有明显的改善(P<0.05)。结论 PS-341通过抑制胰腺内NF-κB活化而抑制炎症反应。PS-341可能是治疗SAP的一个新措施。