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小鼠卵巢颗粒细胞氧化应激损伤及对沉默信息调节因子2相关酶1信号通路的影响 被引量:1
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作者 弓浩杰 丁雪梅 +3 位作者 白世平 曾秋凤 张克英 王建萍 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1942-1954,共13页
本试验旨在通过探究不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))对小鼠卵巢颗粒细胞(MOGC)氧化应激损伤的影响,以构建MOGC氧化应激模型,并探究氧化应激损伤对沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)信号通路的影响。试验选用MOGC,采用单因素试验设计,分别... 本试验旨在通过探究不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))对小鼠卵巢颗粒细胞(MOGC)氧化应激损伤的影响,以构建MOGC氧化应激模型,并探究氧化应激损伤对沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)信号通路的影响。试验选用MOGC,采用单因素试验设计,分别用0(对照组)、100、200、400和800μmol/L H_(2)O_(2)处理24 h,测定细胞凋亡、细胞内活性氧(ROS)生成量、相关抗氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量以及凋亡相关基因表达。结果表明:1)与对照组相比,不同浓度H_(2)O_(2)组细胞活力均显著降低(P<0.05),当H_(2)O_(2)浓度大于200μmol/L并且作用时间超过24 h时,细胞活力低于50%。2)与对照组相比,不同浓度H_(2)O_(2)组细胞凋亡率显著提高(P<0.05)。3)与对照组相比,200、400和800μmol/L H_(2)O_(2)组细胞内ROS生成量显著提高(P<0.05)。4)与对照组相比,400μmol/L H_(2)O_(2)组细胞内超氧化物歧化酶活性显著降低(P<0.05);400、800μmol/L H_(2)O_(2)组细胞内过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和还原型谷胱甘肽含量显著降低(P<0.05),细胞内MDA含量显著提高(P<0.05);200μmol/L H_(2)O_(2)组细胞内GSH-Px活性显著降低(P<0.05),细胞内MDA含量显著提高(P<0.05)。5)与对照组相比,800μmol/L H_(2)O_(2)组细胞中B细胞淋巴瘤-2相互作用的细胞死亡中介物(Bim)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),细胞中B细胞淋巴瘤-xL(Bcl-xL)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);400μmol/L H_(2)O_(2)组细胞中Caspase-3 mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),细胞中Bcl-xL mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);此外,200、400和800μmol/L H_(2)O_(2)组细胞中SIRT1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),而细胞中叉头盒蛋白O1(FoxO1)、p53 mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。结果提示,200μmol/L H_(2)O_(2)处理24 h为建立MOGC氧化应激模型的理想条件,并且SIRT1-FoxO1/p53通路参与了H_(2)O_(2)诱导的MOGC凋亡。 展开更多
关键词 过氧化氢 小鼠卵巢颗粒细胞 凋亡 SIRT1
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MiR-145靶向作用激活素受体ⅠB抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖 被引量:1
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作者 张连筱 郑筱娇 +2 位作者 徐科君 张富斌 崔李宁 《现代实用医学》 2017年第9期1129-1132,F0002,共5页
目的探讨miR-145对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的调控作用。方法制备Ad-miR-145重组腺病毒,分离培养3周龄的SPF级ICR雌性小鼠卵巢颗粒细胞(mGC),以不同浓度的Ad-miR-145(0 mol、50 mol、100 mol)感染m GC,48 h后通过CCK-8增殖实验检测细胞的... 目的探讨miR-145对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的调控作用。方法制备Ad-miR-145重组腺病毒,分离培养3周龄的SPF级ICR雌性小鼠卵巢颗粒细胞(mGC),以不同浓度的Ad-miR-145(0 mol、50 mol、100 mol)感染m GC,48 h后通过CCK-8增殖实验检测细胞的增殖活力;收集细胞通过TRIZOL法提取细胞总RNA,反转录后进行实时定量PCR检测细胞增殖相关基因细胞周期蛋白cyclin D2 mRNA的表达情况;提取细胞蛋白,通过Western blot检测其中cyclin D2的蛋白水平;同时采用双荧光素酶报告基因调查miR-145对其预测靶基因激活素受体ⅠB(ACVRⅠB)的调控作用。结果成功获得滴度为8.91×10^(10) ifu/mL的高表达miR-145腺病毒,该腺病毒可在mGC中高表达miR-145;腺病毒介导的miR-145高表达可抑制m GC的增殖活力,并可抑制m GC中cyclin D2的m RNA和蛋白的表达;miR-145可抑制ACVRⅠB 3’-UTR的荧光素酶活性。结论 miR-145通过靶向作用ACVRⅠB抑制小鼠m GC增殖。 展开更多
关键词 MIR-145 激活素受体ⅠB 增殖 细胞周期蛋白 小鼠卵巢颗粒细胞
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FSH对缺血缺氧诱导的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用 被引量:1
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作者 王菲 田媛 +6 位作者 郝耀 刘心蕊 张淑雅 杨延周 裴承斌 王燕蓉 裴秀英 《宁夏医科大学学报》 2022年第6期590-596,共7页
目的探究促卵泡刺激素(FSH)对缺血缺氧损伤的小鼠原代卵巢颗粒细胞的保护作用。方法21日龄雌性ICR小鼠注射孕马血清(PMSG)42 h后,体外分离并培养小鼠原代卵巢颗粒细胞,分为对照组、单纯缺血缺氧组、缺血缺氧FSH干预组(0.1、0.2、0.4、0.... 目的探究促卵泡刺激素(FSH)对缺血缺氧损伤的小鼠原代卵巢颗粒细胞的保护作用。方法21日龄雌性ICR小鼠注射孕马血清(PMSG)42 h后,体外分离并培养小鼠原代卵巢颗粒细胞,分为对照组、单纯缺血缺氧组、缺血缺氧FSH干预组(0.1、0.2、0.4、0.6 IU·mL^(-1) FSH)。对单纯缺血缺氧组及缺血缺氧FSH干预组的细胞分别进行缺血缺氧处理及不同浓度FSH干预,通过TUNEL染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2、凋亡蛋白Bax的表达情况。结果TUNEL检测细胞结果显示:单纯缺血缺氧组TUNEL阳性细胞数最多、细胞凋亡率最高,FSH干预能够减少细胞凋亡,其中0.4、0.6 IU·mL^(-1) FSH干预组TUNEL阳性细胞较其他干预组减少,细胞凋亡率降低(P均<0.01);流式细胞术结果显示:除对照组外,其余各组凋亡率均有所增加(P均<0.01),在添加不同浓度FSH干预后,细胞凋亡被抑制,其中0.4 IU·mL^(-1) FSH干预组细胞凋亡率低于单纯缺血缺氧组和0.1 IU·mL^(-1) FSH干预组(P均<0.05);Western blot检测凋亡相关蛋白结果显示:与对照组相比,其余各组Bax蛋白表达均上调,Bcl-2蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值均降低,0.4 IU·mL^(-1) FSH干预组的Bcl-2蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值均高于单纯缺血缺氧组和其他干预组(P均<0.01)。结论添加FSH能抑制缺血缺氧诱导的小鼠颗粒细胞凋亡,降低细胞凋亡率,增强细胞的抗凋亡能力。 展开更多
关键词 小鼠原代卵巢颗粒细胞 缺血缺氧 促卵泡刺激素 细胞凋亡
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纳米银对小鼠卵巢颗粒细胞GRM02毒性作用研究 被引量:1
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作者 木魁 李登坤 +4 位作者 李艳玲 邱姗 葛文武 田杨杨 丁之恩 《山东化工》 CAS 2021年第13期30-32,共3页
纳米银(nAg)的使用增加了人类健康潜在风险,这迫切需要对nAg做出安全评估。本研究方法:选取20,50,80 nm粒径nAg,2,4,8,16,32,64,128和256μg/mL不同浓度,对小鼠卵巢颗粒细胞(GRM02)处理24 h,MTT法检测计算细胞存活率,并筛选出不引起细... 纳米银(nAg)的使用增加了人类健康潜在风险,这迫切需要对nAg做出安全评估。本研究方法:选取20,50,80 nm粒径nAg,2,4,8,16,32,64,128和256μg/mL不同浓度,对小鼠卵巢颗粒细胞(GRM02)处理24 h,MTT法检测计算细胞存活率,并筛选出不引起细胞大量凋亡或死亡的20 nm nAg,在20μg/mL浓度下处理GRM02细胞24 h,通过对培养细胞膜关键损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)活力,抗氧化酶系统活性以及关键凋亡因子检测分析。结果表明:处理组相较实验组细胞膜损伤关键指标LDH含量升高约3.2倍(p<0.01),CAT降低约86%(p<0.01),caspase-3含量提高了32.72%。结论:nAg会诱导GRM02细胞产生氧化应激,降低抗氧化酶活性,破坏细胞膜结构,激活了凋亡因子Caspase-3相关途径,介导细胞凋亡或死亡。 展开更多
关键词 纳米银 小鼠卵巢颗粒细胞GRM02 毒性作用
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