小鼠双微体2基因在肿瘤中作用的研究进展

小鼠双微体2基因(MDM2)是近几年发现的一种癌基因,对细胞生长有调节作用。其生物学作用是增强细胞的生存活力,使细胞生存期延长,促进细胞增生及肿瘤的生长。近年来,许多研究显示MDM2参与了许多肿瘤的发生发展,且该基因与恶性肿瘤的浸润、转移和不良预后有关,尤其与食管癌、胃癌、结肠癌和肝癌等消化系肿瘤关系密切。

CDK4和MDM2在脂肪肉瘤诊断中的价值

脂肪肉瘤是最常见的软组织恶性肿瘤,其中去分化脂肪肉瘤与差分化肉瘤、非典型脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤与良性脂肪源性肿瘤常常难以鉴别。本文从免疫组化、分子病理学两个层面,对细胞周期素依赖性激酶4及小鼠双微体基因2在其诊断及鉴别诊断中的应用做一综合介绍。

C-MYC和MDM2在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的探讨C-MYC和小鼠双微体基因2(MDM2)在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测100例人脑胶质瘤和50例非肿瘤脑组织中C-MYC和MDM2的蛋白表达,并分析两者与人脑胶质瘤的临床病理参数之间的关系。结果人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的阳性表达率分别为64.0%(64/100)、67.0%(67/100),均高于非肿瘤脑组织的4.0%(2/50)、2.0%(1/50),差异均有统计学意义(χ2=48.701、56.828,P均<0.001)。人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的表达均与人脑胶质瘤的病理分级有关,随着分级的进展阳性表达率升高(χ2=21.998、21.513,P均<0.001)。人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的表达呈正相关(r=0.670,P<0.001)。结论人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的高表达与其发生、发展关系密切,高表达的C-MYC和MDM2对人脑胶质瘤的疾病进展具有促进作用,两者联合检测能够用于人脑胶质瘤的病情及预后评估。

^99Tc^m标记MDM2反义寡核苷酸对人前列腺癌细胞目的基因表达的影响

目的探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2（MDM2）mRNA的ASON和错义寡核苷酸（ASONM）对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响，为后续的前列腺癌基因显像奠定基础。方法人工合成一段针对MDM2mRNA的ASON和ASONM，以HYNIC为螯合剂，对ASON和ASONM进行99Tcm标记，检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性。用脂质体包裹驰TcTM-HYNIC．ASON（0、100和500nmol／L）和99Tcm-HYNIC-ASONM（500nmol／L），于LNCaP细胞中培养24h，再行RT-PCR和Westernblot实验，观察探针对MDM2、p53mRNA和相应蛋白质表达的影响。各组间计量资料比较采用单因素方差分析和g检验。结果ASON的标记率为（65．15±2．05）％（n=5），ASONM的标记率为（64．93±2．18）％（n=5），两者放化纯均达90％以上。99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好，保留了与互补链结合的能力。0、100、500nmo]／L99Tcm-HYNIC-ASON组和500nmol／LTcmHYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0．458±0．035、0．250±0．026、0．174±0．032、0．463±0．033。除0nmol／L99Tcm．HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=33．69，q=24．32-91．45，均P〈0．01）；各组MDM2蛋白的平均密度分别为90．712±3．042、71．2184-2．915、32．775±3．062、88．121±2．710，同样除0nmol／L99Tcm．HYNIC．ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=235．93，g：6．43～19．14，均P〈0．01）。4组p53mRNA含量分别为0．185±0．046、0．203±0．040、0．213±0．027、0．163±0．049，差异无统计学意义（F=2．18，P〉0．05）；各组p53蛋白平均密度分别为33．865±2．213、70．445±2．180、99．025±3．012、38．351±3．271，除0nmol／L99Tcm-HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=53．98，g=3．32-6．74，均P〈0．01）。结论MDM2反义探针能与MDM2mRNA链上的目的序列特异结合，并抑制目的基因的表达，具备活体内前列腺癌反义显像的实验条件，有望为在基因水平上诊断前列腺癌提供一种新方法。

扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响

目的探究扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响及机制。方法选取Hep3B细胞随机分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组。低浓度组、中浓度组和高浓度组分别用0.5,1和2μmol·L^(-1)的扁蒴藤素处理,高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组先分别转染anti-miR-NC和anti-miR^(-1)05-5p再用2μmol·L^(-1)的扁蒴藤素处理,对照组不转染也不用扁蒴藤素处理。用细胞计数法-8(CCK-8)实验检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR^(-1)05-5p的表达水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测小鼠双微体基因(MDM2)蛋白表达水平。结果对照组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组的细胞存活率分别为(100.00±0.00)%,(46.44±7.23)%,(56.23±6.64)%,(85.82±7.55)%;凋亡率分别为(3.40±0.74)%,(35.94±3.39)%,(36.29±1.58)%,(8.55±1.37)%;miR^(-1)05-5p表达水平分别为1.00±0.00,3.36±0.30,3.18±0.19,1.57±0.12;MDM2蛋白表达水平分别为0.90±0.08,0.16±0.03,0.19±0.03,0.69±0.08。上述指标,高浓度组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组与高浓度+anti-miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论扁蒴藤素可能通过miR^(-1)05-5p靶向MDM2抑制肝细胞癌细胞Hep3B增殖并诱导细胞凋亡。

腹膜后去分化脂肪肉瘤15例临床病理分析并文献复习

目的探讨腹膜后去分化脂肪肉瘤(DDL)的临床病理特征、诊治及预后。方法收集并分析2013年6月至2019年10月收治的15例腹膜后DDL临床病理及影像学资料,并复习相关文献。结果 15例患者中男性13例,女性2例,中位年龄54.3岁。肿瘤平均直径约15.8 cm。12例为原发性病例,3例为继发性病例。CT检查仅7例提示脂肪肉瘤。13例DDL肿瘤完整切除,2例无法完整切除。镜下所见:13例DDL内可见非典型脂肪瘤样肿瘤/高分化脂肪肉瘤(ALT/WDL)成分,2例肿瘤内仅见去分化成分。免疫组化:15例中,Vimentin阳性15例,P16阳性13例,小鼠双微体2(MDM2)阳性14例,CDK4阳性11例,SMA阳性3例,Desmin阳性1例;Ki-67阳性表达率约20%~60%。荧光原位杂交(FISH)法检测:15例DDL均存在MDM2基因扩增。12例获得随访,其中9例复发,复发患者中3例死亡。结论腹膜后DDL对放化疗不敏感,主要采取手术治疗,切除后较易复发,FISH检测MDM2基因扩增情况对诊断DDL具有重要价值。