小鼠双微体2基因在肿瘤中作用的研究进展

小鼠双微体2基因(MDM2)是近几年发现的一种癌基因,对细胞生长有调节作用。其生物学作用是增强细胞的生存活力,使细胞生存期延长,促进细胞增生及肿瘤的生长。近年来,许多研究显示MDM2参与了许多肿瘤的发生发展,且该基因与恶性肿瘤的浸润、转移和不良预后有关,尤其与食管癌、胃癌、结肠癌和肝癌等消化系肿瘤关系密切。

小鼠双微体2和基质金属蛋白酶-7在肝癌中的表达及其意义

小鼠双微体（MDM）2是最近发现的一种凋亡抑制蛋白基因，为凋亡抑制家族（IAP）的新成员，是迄今发现最强的凋亡抑制因子，在人类大多数肿瘤组织中都有表达。在多种肿瘤中已经证明恶性肿瘤细胞通过金属蛋白酶降解细胞外基质以突破组织屏障而发生转移，基质金属蛋白酶（MMP）7是该家族的主要成员之一。本研究旨在采用免疫组织化学法检测MDM2、MMP-7在肝癌组织中的表达情况，并探讨他们之间的关系及其临床意义。

GRIM-19、MDM2在肺腺癌组织中的表达变化及其意义

目的观察干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因(GRIM-19)、小鼠双微体2(MDM2)在肺腺癌组织中的表达变化,并探讨其与患者临床特征的关系。方法选择行手术治疗的肺腺癌患者60例,术中收集其肺腺癌组织和癌旁正常肺组织各60例份,采用免疫组化法检测GRIM-19、MDM2蛋白阳性表达情况。比较不同临床特征的肺腺癌患者癌组织GRIM-19、MDM2阳性表达率,分析肺腺癌组织GRIM-19、MDM2表达的相关性。结果肺腺癌组织和癌旁正常肺组织GRIM-19阳性表达率分别为55%(35/60)、78%(47/60),MDM2阳性表达率分别为43%(26/60)、23%(14/60),两者比较P均<0.05。有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期和低分化的肺腺癌患者癌组织GRIM-19阳性表达率分别低于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ期及Ⅱ期和高分化者,MDM2阳性表达率分别高于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ期及Ⅱ期和高分化者(P均<0.05)。肺腺癌组织GRIM-19与MDM2的表达呈负相关关系(r=-0.530,P<0.05)。结论肺腺癌组织中GRIM-19表达降低而MDM2表达升高,两者可能共同参与了肺腺癌的发生发展。

CDK4和MDM2在脂肪肉瘤诊断中的价值

脂肪肉瘤是最常见的软组织恶性肿瘤,其中去分化脂肪肉瘤与差分化肉瘤、非典型脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤与良性脂肪源性肿瘤常常难以鉴别。本文从免疫组化、分子病理学两个层面,对细胞周期素依赖性激酶4及小鼠双微体基因2在其诊断及鉴别诊断中的应用做一综合介绍。

C-MYC和MDM2在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的探讨C-MYC和小鼠双微体基因2(MDM2)在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测100例人脑胶质瘤和50例非肿瘤脑组织中C-MYC和MDM2的蛋白表达,并分析两者与人脑胶质瘤的临床病理参数之间的关系。结果人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的阳性表达率分别为64.0%(64/100)、67.0%(67/100),均高于非肿瘤脑组织的4.0%(2/50)、2.0%(1/50),差异均有统计学意义(χ2=48.701、56.828,P均<0.001)。人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的表达均与人脑胶质瘤的病理分级有关,随着分级的进展阳性表达率升高(χ2=21.998、21.513,P均<0.001)。人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的表达呈正相关(r=0.670,P<0.001)。结论人脑胶质瘤组织中C-MYC和MDM2的高表达与其发生、发展关系密切,高表达的C-MYC和MDM2对人脑胶质瘤的疾病进展具有促进作用,两者联合检测能够用于人脑胶质瘤的病情及预后评估。

Akt特异性抑制剂鱼藤素对前列腺癌PC-3细胞生长的影响

目的:观察Akt抑制剂鱼藤素对前列腺癌PC-3细胞株的抑制作用并探讨其可能的作用机制。方法:用MTT法检测鱼藤素对PC-3细胞的增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测鱼藤素对细胞周期的影响;RT-PCR检测细胞中小鼠双微体2(MDM2)、糖元合成酶激酶3β(GSK3β)mRNA表达的变化;Western印迹法检测MDM2、GSK3β蛋白表达的变化。结果:MTT法显示,10、100、500、1 000 nmol/L的鱼藤素作用于前列腺癌PC-3细胞24、48、72 h后,对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制率分别为(91.10±3.75)%、(86.39±1.16)%、(79.51±2.63)%;(82.46±3.65)%、(76.84±0.97)%、(69.69±2.30)%;(81.46±0.41)%、(75.56±1.12)%、(54.07±3.21)%;(66.77±2.82)%、(58.22±0.35)%、(39.34±2.40)%,均能显著抑制其增殖(P均<0.01);FCM检测显示各浓度的鱼藤素使前列腺癌PC-3细胞周期阻滞在G0/G1期比例增加[(53.4±2.3)%、(62.4±2.2)%、(63.6±1.1)%、(65.0±0.3)%、(66.5±1.9)%,P均<0.01],S期细胞比例减少[(26.9±1.7)%、(14.7±2.4)%、(11.1±5.2)%、(5.8±1.1)%、(7.0±0.6)%,P均<0.01];RT-PCR和Western印迹法结果显示鱼藤素上调了GSK3βmRNA和蛋白的表达水平,而下调了MDM2 mRNA和蛋白的表达水平。结论:Akt抑制剂鱼藤素能抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,其机制可能与影响Akt信号通路下游分子GSK3β、MDM2的表达相关。

^99Tc^m标记MDM2反义寡核苷酸对人前列腺癌细胞目的基因表达的影响

目的探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2（MDM2）mRNA的ASON和错义寡核苷酸（ASONM）对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响，为后续的前列腺癌基因显像奠定基础。方法人工合成一段针对MDM2mRNA的ASON和ASONM，以HYNIC为螯合剂，对ASON和ASONM进行99Tcm标记，检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性。用脂质体包裹驰TcTM-HYNIC．ASON（0、100和500nmol／L）和99Tcm-HYNIC-ASONM（500nmol／L），于LNCaP细胞中培养24h，再行RT-PCR和Westernblot实验，观察探针对MDM2、p53mRNA和相应蛋白质表达的影响。各组间计量资料比较采用单因素方差分析和g检验。结果ASON的标记率为（65．15±2．05）％（n=5），ASONM的标记率为（64．93±2．18）％（n=5），两者放化纯均达90％以上。99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好，保留了与互补链结合的能力。0、100、500nmo]／L99Tcm-HYNIC-ASON组和500nmol／LTcmHYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0．458±0．035、0．250±0．026、0．174±0．032、0．463±0．033。除0nmol／L99Tcm．HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=33．69，q=24．32-91．45，均P〈0．01）；各组MDM2蛋白的平均密度分别为90．712±3．042、71．2184-2．915、32．775±3．062、88．121±2．710，同样除0nmol／L99Tcm．HYNIC．ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=235．93，g：6．43～19．14，均P〈0．01）。4组p53mRNA含量分别为0．185±0．046、0．203±0．040、0．213±0．027、0．163±0．049，差异无统计学意义（F=2．18，P〉0．05）；各组p53蛋白平均密度分别为33．865±2．213、70．445±2．180、99．025±3．012、38．351±3．271，除0nmol／L99Tcm-HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=53．98，g=3．32-6．74，均P〈0．01）。结论MDM2反义探针能与MDM2mRNA链上的目的序列特异结合，并抑制目的基因的表达，具备活体内前列腺癌反义显像的实验条件，有望为在基因水平上诊断前列腺癌提供一种新方法。

腹膜后去分化脂肪肉瘤15例临床病理分析并文献复习

目的探讨腹膜后去分化脂肪肉瘤(DDL)的临床病理特征、诊治及预后。方法收集并分析2013年6月至2019年10月收治的15例腹膜后DDL临床病理及影像学资料,并复习相关文献。结果 15例患者中男性13例,女性2例,中位年龄54.3岁。肿瘤平均直径约15.8 cm。12例为原发性病例,3例为继发性病例。CT检查仅7例提示脂肪肉瘤。13例DDL肿瘤完整切除,2例无法完整切除。镜下所见:13例DDL内可见非典型脂肪瘤样肿瘤/高分化脂肪肉瘤(ALT/WDL)成分,2例肿瘤内仅见去分化成分。免疫组化:15例中,Vimentin阳性15例,P16阳性13例,小鼠双微体2(MDM2)阳性14例,CDK4阳性11例,SMA阳性3例,Desmin阳性1例;Ki-67阳性表达率约20%~60%。荧光原位杂交(FISH)法检测:15例DDL均存在MDM2基因扩增。12例获得随访,其中9例复发,复发患者中3例死亡。结论腹膜后DDL对放化疗不敏感,主要采取手术治疗,切除后较易复发,FISH检测MDM2基因扩增情况对诊断DDL具有重要价值。

扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响

目的探究扁蒴藤素对肝细胞癌细胞Hep3B增殖和凋亡的影响及机制。方法选取Hep3B细胞随机分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组。低浓度组、中浓度组和高浓度组分别用0.5,1和2μmol·L^(-1)的扁蒴藤素处理,高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组先分别转染anti-miR-NC和anti-miR^(-1)05-5p再用2μmol·L^(-1)的扁蒴藤素处理,对照组不转染也不用扁蒴藤素处理。用细胞计数法-8(CCK-8)实验检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR^(-1)05-5p的表达水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测小鼠双微体基因(MDM2)蛋白表达水平。结果对照组、高浓度组、高浓度+anti-miR-NC组和高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组的细胞存活率分别为(100.00±0.00)%,(46.44±7.23)%,(56.23±6.64)%,(85.82±7.55)%;凋亡率分别为(3.40±0.74)%,(35.94±3.39)%,(36.29±1.58)%,(8.55±1.37)%;miR^(-1)05-5p表达水平分别为1.00±0.00,3.36±0.30,3.18±0.19,1.57±0.12;MDM2蛋白表达水平分别为0.90±0.08,0.16±0.03,0.19±0.03,0.69±0.08。上述指标,高浓度组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高浓度+anti-miR^(-1)05-5p组与高浓度+anti-miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论扁蒴藤素可能通过miR^(-1)05-5p靶向MDM2抑制肝细胞癌细胞Hep3B增殖并诱导细胞凋亡。