miR-150过表达对小鼠垂体瘤细胞株GT1-1增殖的调控作用及机制

目的探讨微小RNA-150(miR-150)过表达对小鼠垂体瘤细胞株GT1-1增殖的调控作用及机制。方法将培养好的小鼠垂体瘤细胞株GT1-1随机分为过表达组与阴性对照组,分别转染miR-150 mimics和miR-150mimics NC。转染48 h,用MTT法测算细胞增殖率,用Western blotting技术检测GT1-1细胞中凝血酶敏感蛋白1(TSP1)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)蛋白表达,用ELISA法检测细胞上清液中非活性状态与活性状态TGF-β_1水平,用双荧光素酶实验验证miR-150的靶基因。结果转染48 h,过表达组细胞增殖率与阴性对照组比较差异有统计学意义,P<0.05。过表达组TSP1、TGF-β_1蛋白相对表达量与阴性对照组比较,P均<0.05。过表达组细胞上清液中非活性状态与活性状态TGF-β_1水平与阴性对照组比较,P均<0.05。miR-150可与TSP1 mRNA的3'-UTR结合,TSP1为miR-150的靶基因。结论 miR-150过表达可通过介导TSP1/TGF-β_1信号通路抑制小鼠垂体瘤细胞株GT1-1增殖。

低表达miR-210-3p调控大鼠垂体瘤GH3与MMQ细胞株增殖与迁移

目的:探讨低表达miR-210-3p对大鼠垂体瘤GH3和MMQ细胞株的增殖与迁移的作用。方法:将培养好的大鼠垂体瘤MMQ与GH3细胞株随机分为低表达miR-210-3p组和阴性对照组,分别转染miR-210-3p inhibitor和miR-210-3p NC,荧光定量PCR检测实验组与对照组的miR-210-3p的表达;转染后24 h、48 h、72 h分别进行CCK8检测增殖能力;用Transwell来检测大鼠垂体瘤细胞的迁移能力;用Western- boltting技术分别检测低表达miR-210-3p组和阴性对照组的FGFRL-1的蛋白表达;用双荧光素酶实验验证miR-210-3p的靶基因。结果:转染低表达病毒后MMQ与GH3垂体瘤细胞株的细胞增殖能力下降较阴性对照组比较差异,P 【0.05,有统计学意义;低表达miR-210-3p组MMQ与GH3垂体瘤细胞系与阴性对照组相比细胞迁移能力下降,P 【0.05,有统计学意义;转染低表达病毒组的细胞株与对照组相比,靶基因蛋白表达有差异,P 【0.05;miR-210-3p可与FGFRL-1 mRNA的3’-UTR结合,FGFRL-1为miR-210-3p的靶基因。结论:miR-210-3p低表达抑制大鼠垂体瘤细胞的增殖与迁移。