BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型的建立与治疗

目的:通过建立BALB/c小鼠原位瘤模型,模拟临床肿瘤环境,为观察PTD4-apoptin融合蛋白的抗肿瘤效应提供实验基础。方法:采用两种方法建立BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型,以PTD4-apoptin融合蛋白进行21天的短期治疗。TUNEL检测PTD4-apoptin融合蛋白的促凋亡效应,HE染色评估肿瘤的形态学变化。结果:与异体异位宫颈癌组织移植法相比,宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液的成瘤效果更好。原位瘤给予PTD4-apoptin融合蛋白可显著抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞的凋亡。结论:小鼠宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液可建立宫颈癌原位瘤模型,PTD4-apoptin融合蛋白可抑制该原位癌。

人胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及其生物学特性的研究

为探讨胃恶性淋巴瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。将 11例胃恶性淋巴瘤新鲜组织移植裸鼠胃粘膜下层 ,观察原位移植成瘤率 ,移植瘤的侵袭和转移 ,及其形态学特征 (光镜 ,电镜 ,免疫组化)。从 11例胃恶性淋巴瘤标本中筛选出 1株人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型和 1株人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型 ,分别传至 36代和 2 7代 ,共移植裸鼠 32 9只。自第 3代起移植成瘤率及液氮冻存复苏成活率均为 10 0 %。出现淋巴道、血道及种植转移。原位移植瘤的病理组织学、超微结构、DNA含量测定及染色体核型分析结果均与来源人胃恶性淋巴瘤相似。人胃恶性淋巴瘤在裸鼠胃内自主生长 ,浸润破坏胃壁各层组织结构。表明此模型可用于胃恶性淋巴瘤的发病机制、侵袭。

荷人膀胱癌原位移植瘤Balb/c裸小鼠动物模型的建立

目的建立一种简便、可靠的荷人膀胱癌原位移植瘤动物模型,核磁共振成像(MRI)评价成瘤过程。方法常规培养人膀胱癌E-J细胞株细胞,Balbc裸小鼠膀胱穿刺后腔炮灌注E-J细胞悬液,建立荷人膀胱癌原位移植瘤动物模型,核磁共振成像(MRI)监测肿瘤的生长,45～50天处死动物,标本常规行HE染色,并使用抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1通过免疫组化鉴定移植瘤。结果20只动物有19只荷瘤,成瘤率为95%;接种后10～14天MRI检查可发现明显的充盈缺损。肿瘤病理分级为Ⅰ～Ⅱ级,T1期65%(13只),T2期20%(4只),T3期10%(2只),T4期5%(1只),所有动物无远处转移。HE染色示移行细胞癌,免疫组化(S-P法)染色检测瘤细胞表面抗原的表达呈阳性,与体外培养的E-J细胞免疫组化染色结果一致。结论膀胱穿刺腔内灌注法建立荷人膀胱癌原位移植瘤裸小鼠动物模型十分简便,成瘤率高,有助于研究膀胱癌的生物学行为和腔内灌注治疗。

金龙胶囊及其多糖、蛋白组分对人类脑胶质瘤小鼠原位模型的干预作用

目的复方中药金龙胶囊(JLC)提取物及其制备的粗多糖、粗蛋白的抗脑肿瘤效果及安全性评价。方法运用外科原位接种(surgical orthotopic implantation)技术,将肿瘤块种植到裸小鼠颅内,建立小鼠原位模型。用FluorVivo Model 100荧光成像仪对所有小鼠的脑肿瘤进行非侵袭性的实时成像观察。通过对空白对照组(无肿瘤且溶剂为溶媒)、阴性对照组(溶媒)、阳性对照组(替莫唑胺32 mg/kg)、JLC提取物低(750 mg/kg)、中(1200 mg/kg)、高剂量组(1500 mg/kg)及粗多糖(100 mg/kg)、粗蛋白组(100 mg/kg)的肿瘤抑制率进行比较,评价经灌胃给予金龙胶囊提取物对小鼠原位模型肿瘤生长的影响。结果给药25 d后,JLC低、中剂量组肿瘤抑制率均为34.63%,与阴性对照组相比差异无显著性;粗多糖组和粗蛋白组肿瘤抑制率分别为22.26%、29.01%,肿瘤重量分别为(0.178±0.048)g、(0.144±0.047)g,与阴性对照组相比差异无显著性;阳性对照组和高剂量组,抑制率分别为99.57%、61.90%,肿瘤重量分别为(0.001±0.001)g、(0.088±0.045)g,差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论本文研究结果表明,JLC粗多糖及粗蛋白有一定的脑胶质瘤抑制作用。肿瘤负荷和药物治疗可能为影响小鼠体重正常增长的因素;在现有剂量下,未发现明显的急性毒性反应(P>0.05)。

小鼠移植瘤模型对SPIO增强MRI信号变化原因的初步研究

目的建立小白鼠肝脏原位移植瘤模型,初步探讨临床上影响肝癌超顺磁性氧化铁(SPIO)增强MRI信号变化的因素。资料与方法(1)对25例肝病患者行SPIO增强MRI扫描的临床、影像及病理学相关资料进行分析;(2)给小白鼠注射H22肝癌细胞建立肝脏原位移植瘤模型40只;(3)成瘤后给小鼠进行MRI平扫及SPIO增强扫描;(4)所有的瘤鼠做HE及普鲁士蓝铁染色并进行相关病理学分析。结果(1)25例患者中经病理证实为原发性肝癌2例、海绵状血管瘤1例及肝硬化结节1例,DSA及介入治疗有典型肝癌表现者2例。(2)肝脏移植瘤组在SPIO增强后的T2WI上有10个移植瘤的信号未见下降;普鲁士蓝铁染色3只瘤鼠的瘤灶呈阳性,内见枯否细胞;7个瘤灶与肝组织明显呈浸润生长。结论SPIO能提高肝脏占位性病变定性诊断率,但存在SPIO增强MRI信号变化与病理机制不相符的现象;在少数纯瘤株移植瘤结节内及周边可见枯否细胞,成为影响肝癌的SPIO增强MRI信号变化的重要原因;移植瘤的生长方式成为影响肿瘤的SPIO增强后信号变化的相关因素。

人胰腺癌裸小鼠胰腺内原位移值模型的超微结构研究

人胰腺癌裸小鼠胰腺内原位移值模型的建立对胰腺癌的基础理论研究及实验治疗均有重要意义。我院自1990年5月至11月分别将人胰腺癌成功地植到裸小鼠胰腺内。建立了我国第一株人胰腺癌裸小鼠胰腺内移植模型。命名为:PTNMP-1(人胰腺鳞癌裸小鼠胰腺内原位移植);PTNMP-2(人胰腺腺癌裸小鼠胰腺内原位移植)。本文报告对其超微结构系统观察的结果。

裸小鼠人胃癌原位移植模型的浸润转移特征

目的;建立裸小鼠人胃癌原位移植模型并观察其浸润转移特征。方法:BALB/C—nu/nu裸小鼠12只,以SGC-7901人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤为材料,通过手术将瘤组织块移植到裸小鼠胃壁,待动物自然濒临死亡时进行系统解剖。结果:原位移植瘤全部成功,且所有动物均出现局部浸润及淋巴结转移,肝脏转移率为66.7％,50％的荷瘤鼠发生腹水,肿瘤晚期与周围脏器发生粘连,荷瘤鼠死于全身衰竭,中位数生存期为18周。结论:裸小鼠人胃癌原位模型的浸润转移特性接近临床病人,是研究人胃癌浸润转移的理想手段。

可移植性人脑胶质瘤组织裸小鼠脑内移植及其MR显像研究

背景与目的:文献报道的胶质瘤动物原位移植模型,大多数是将细胞悬液立体定向接种于鼠脑内,操作繁杂,耗时长,难以在短时间内完成批量实验。本研究接种可移植性人脑胶质瘤组织于裸小鼠脑内,探讨建立人脑胶质瘤裸小鼠原位移植模型及其MR活体成像的可行性。方法:在套管针内,置入位于裸小鼠皮下生长的可移植性人脑胶质瘤组织2mm3,经微型颅钻钻颅孔后经套管针推入裸小鼠右尾状核内,第30天在配有小鼠专用micro-23微线圈的1.5TMR机上进行头颅扫描和专用软件测量显像的肿瘤体积。继而取全脑作连续冰冻切片,HE染色,在光学显微镜下观察肿瘤病理特征,在体视显微镜目镜下用测微尺测量肿瘤。然后将上述两种方法测得的数据进行统计学分析,评价荷瘤鼠活体MR显像计算肿瘤体积的可行性。结果:经MR扫描的15只颅内接种肿瘤的小鼠,有14只的尾状核区域见到肿瘤显像;在脑切片上,与MR像相同部位见到了肿瘤组织。经脑切片测得的肿瘤体积[(23.19±10.18)mm3]和经MRI测得的肿瘤体积[(23.45±11.64)mm3]比较差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤模型制作成功率为93%(14/15),肿瘤模型MR显像成功率为100%(14/14)。结论:经套管针定量植入胶质瘤组织于裸小鼠尾状核,制作可移植性裸小鼠人脑胶质瘤原位模型,具有操作便捷、省时、便于批量制作、致瘤率高等优点。配有小鼠专用微型线圈的1.5TMR机可用于荷瘤裸小鼠的头颅成像、在活体上对移植瘤进行定位和体积测量等研究。

人原发性肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立

目的建立人肝原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型，为探讨肝恶性淋巴瘤发病机制和实验治疗提供工具。方法采用人肝原发性恶性淋巴瘤术中新鲜瘤组织块植入裸小鼠肝实质内，观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移，并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、血清学、染色体核型和流式细胞分析。结果在裸小鼠体内建成了一株人肝原发性恶性淋巴瘤原位移植模型（HLBL-0102）。移植瘤的组织病理学为原发性肝恶性淋巴瘤（非霍奇金B细胞性），免疫组织化学显示，CD19、CD20、CD45和CD79a阳性，CD3、CD7阴性，甲胎蛋白（AFP）阴性，乙型肝炎病毒表面抗原（HbsAg）阳性，乳酸脱氢酶（LDH）1267．5U／L。染色体众数范嗣55—59条；移植瘤细胞DNA指数值1．57～1．61，均为异倍体。HLBL-0102住裸鼠体内生长3年，已经传至37代，共移植裸鼠283只，其肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活牢均为100％。人原发性肝恶性淋巴瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长，瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉，无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结累及。结论HLBL-0102是首次建苞成功的人原发性肝恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型，完整地模拟了人原发性肝恶性淋巴瘤患者的自然临眯病理过程，为研究原发性肝恶件淋巴瘤生物学和实验治疗提供了理想的动物模型。

C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型的建立

的 建立C5 7BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型并探讨其应用价值。方法用微量注射器在C5 7BL6近交系小鼠的前列腺左右背外侧叶包膜下接种小鼠前列腺癌RM 1细胞2× 10 6个建立原位移植瘤模型 ,以皮下移植瘤模型作为对照比较两者的肿瘤转移发生情况及生存期。结果 原位模型小鼠全部发生肿瘤转移 ,其中盆腔淋巴结和肺的转移发生率分别为 ( 10 / 10 )、( 8/ 10 ) ,对照组仅有肿瘤的局部生长和浸润 ,无转移发生 ;原位模型的小鼠平均生存期为 ( 11.0±2 .4)d较对照组 ( 2 3.0± 4.7)d明显缩短 ,差异有非常显著性 ( P <0 .0 1)。结论 小鼠的前列腺癌原位移植瘤模型较好地模拟了人癌体内的自然生长状况 ,是观察转移性前列腺癌较为适宜的模型。

人脾原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及生物学特性的研究

目的 建立人脾原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型 ,为探讨其发病机理和实验治疗提供工具。方法 将 11例人脾原发性恶性淋巴瘤新鲜组织植入裸鼠脾实质内 ,观察原位移植的成瘤、移植瘤的侵袭和转移及其形态学特征 (光镜、电镜、免疫组织化学 )。结果 筛选出 1株人脾原发性 (非霍奇金B细胞性裂核细胞型 )恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型 (BFNHL HMN 1) ,已传至 41代 ;1株人脾原发性 (非霍奇金B细胞性裂核细胞型 )恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型 (LM BFNHL HMN 2 ) ,已传至 47代 ;1株人脾原发性 (非霍奇金T免疫母细胞 )恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型 (TINHL HMN 3) ,已传至 37代。共移植裸鼠 6 11只 ,其肿瘤移植生长率、肝转移率和液氮冻存复苏成活率均为10 0 %。BFNHL HMN 1和TINHL HMN 3肿瘤完全限于脾内 ,呈结节状生长 ,或伴有脾门淋巴结累及 ,无腹腔淋巴结和器官转移。LM BFNHL HMN 2肿瘤不仅限于脾脏 ,并有脾门淋巴结及肝转移。原位移植瘤组织经病理学、超微结构观察、流式细胞仪DNA含量测定及染色体核型的分析 ,表明与人脾原发性恶性淋巴瘤细胞相一致。结论 所建立的 3株人脾原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型 ,完整地模拟了人脾原发性恶性淋巴瘤患者的临床过程 。

荧光裸小鼠源的人脑胶质母细胞瘤原位移植模型的建立

目的在表达绿色荧光蛋白（GFP）裸小鼠脑内建立人脑多形性胶质母细胞瘤（GBM）原位移植模型。方法将表达GFP的C57／B6鼠与BALB／c nu／nu系裸小鼠杂交筛选出表达GFP的裸小鼠。把人脑GBM组织原位移植于GFP裸小鼠脑内，荧光显微镜下观察移植瘤的生长特性、血管生成及表皮生长因子受体（EGFR）表达。结果成功培育出表达GFP的荧光裸小鼠；移植瘤中EGFR阳性表达率（78．6±5．2）％，肿瘤侵袭性生长并血管丰富。结论人脑GBM荧光裸小鼠原位移植模型能模拟人脑原发恶性胶质瘤高侵袭及EGFR高表达的生物学特性。

九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用

目的:研究九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用。方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25d,计算肺转移集落数和转移抑制率;BALB/c/nu裸鼠背部皮下接种肝癌SMMC-7721细胞5×106个/ml复制人肝癌实体瘤模型,连续给药16d,动态测量肿瘤体积、体重,画肿瘤生长曲线,实验结束后,剥离瘤块,计算抑瘤率。结果:九节龙皂苷I25mg/kg^100mg/kg对小鼠Lewis肺癌原位癌抑制率和肺转移均分别在40.5%~54.0%和45.4%~69.1%之间,对裸鼠肝癌SMMC-7721实体瘤的抑制率在45.6%~56.3%之间。结论:九节龙皂苷I对Lewis肺癌转移瘤和裸鼠肝癌SMMC-7721均有抑制作用。

小鼠GL261脑胶质瘤原位模型的介绍和GL261细胞免疫原性的初步探讨

胶质母细胞瘤是成人最常见的原发性脑恶性肿瘤，近年来尽管手术、放疗、化疗都取得了一定的进展，但患者预后仍很差。免疫治疗研究是胶质母细胞瘤治疗研究的热点之一，需要有能够复制人胶质母细胞瘤特征、重复性好的胶质瘤动物模型，并且需要了解成瘤细胞的免疫原性。本文介绍一种目前应用较广泛的小鼠GL261脑胶质瘤原位模型，并初步探讨GL261细胞的免疫原性。

荧光裸小鼠源的人脑胶质母细胞瘤原位移植模型的建立

目的在表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)裸小鼠脑内建立人脑多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)原位移植模型。方法将表达GFP的C57/B6鼠与Balb/c nu/nu系裸小鼠杂交筛选出表达GFP的裸小鼠。把人脑GBM组织原位移植于GFP裸小鼠脑内,荧光显微镜下观察移植瘤的生长特性、血管生成及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达。结果成功培育出表达GFP的荧光裸小鼠;移植瘤中EGFR阳性表达率(78.6±5.2)%,肿瘤侵袭性生长并血管丰富。结论人脑GBM荧光裸小鼠原位移植模型能模拟人脑原发恶性胶质瘤高侵袭及EGFR高表达的生物学特性。

人小肠原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植高转移模型的建立

目的为探讨小肠恶性淋巴瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。方法将人小肠恶性淋巴瘤术中原发灶新鲜组织块和肝转移灶瘤组织分别移植于裸小鼠的小肠黏膜层内和肩胛间皮下,观察原位移植和皮下移植的成瘤率、移植瘤的侵袭和转移率;进行形态学、染色体核型和流式细胞分析。结果5例人小肠恶性淋巴瘤标本3例移植成功。从中筛选出1株同一人体瘤源人小肠原发性(非霍奇金B细胞性)恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型(HSIL-0101)和皮下移植高转移模型(HSIL-0102)。移植瘤病理组织学为非霍奇金(大B细胞性)高度恶性淋巴瘤;免疫组织化学示CD19、CD20、CD22、CD45阳性,CD3、CD7阴性。染色体众数范围55～59条;流式细胞分析示DI值1.47～1.61,均为异倍体。HSIL-0101和HSIL-0102分别传至32和38代;共移植裸鼠357只;肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%。HSIL-0101肝和淋巴结转移率为100%;HSIL-0102肝转移率为63.5%,淋巴结转移率为62.7%。移植瘤在裸鼠的小肠内和皮下侵袭性生长,发生血液(肝、脾)转移、淋巴转移和腹腔内种植性转移。结论HSIL-0101和HSIL-0102是首次建立成功的人小肠恶性淋巴瘤裸鼠原位移植和皮下移植均出现自发性高转移模型,可用于小肠恶性淋巴瘤的发病机制、侵袭和转移及实验治疗的研究。

结直肠癌原位移植造模技术研究进展

近年来,针对结直肠癌(CRC)的动物模型受到了研究者们的广泛关注。实验室小鼠成为肿瘤学研究中最具吸引力的实体之一。目前常规使用的CRC动物模型分为自发性模型、诱发性模型、移植性模型以及转基因模型。CRC原位移植造模相较于异位移植造模有其显著的优势,因此应用日趋普及。新的造模方式不断取代传统的造模方式,在肿瘤成瘤率、小鼠存活率以及肿瘤细胞转移率上都有明显的提高。现对开放手术造模、灌肠造模、经肛门低剂量电凝造模以及内镜微创造模四类方法及其优缺点进行阐述。

细胞力学调控肿瘤细胞恶性

目的肿瘤细胞硬度比正常细胞低,且与其恶性反相关。探索肿瘤细胞硬度对自我更新及成瘤能力的影响及分子机理。方法采用基因及药物手段改变细胞硬度,利用原子力显微镜测量细胞硬度,通过3D fibrin、soft agar等检测肿瘤细胞的自我更新,利用皮下及原位注射小鼠模型检测成瘤能力。结果降低/升高细胞硬度提高/抑制肝癌细胞在soft fibrin中肿瘤克隆的大小及在soft agar中克隆数目。

肠系膜种植法裸小鼠移植瘤模型的建立

原位移植瘤模型可提供给被移植物类似于人体的微环境，近年应用广泛。我们针对结肠癌原位移植瘤模型的一些缺点进行改良。现将改良后的动物模型报道如下。

胰脾

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