幼龄小鼠小肠组织内参基因的选择

选择B2 M、ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和ARBP共6个内参基因,研究其在幼龄小鼠小肠组织内的表达情况.结果表明:6个内参基因均可获得特异性扩增产物;经geNorm程序和NormFinder分析,6个内参基因稳定度由高到低为SDHA=HRPT1>ARBP>ACTB>GAPDH>B2 M;基因表达的稳定值分别为0.006(SDHA)、0.006(HRPT1)、0.007(ARBP)、0.018(ACTB)、0.029(GAPDH)、0.111(B2 M),最终筛选出SDHA和HRPT1 2个内参基因适合用于校正目的基因的表达.

放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究

目的观察9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增敏作用。方法制做小鼠小肠组织切片,镜下观察不同剂量点单纯照射组和加药照射组小鼠小肠再生隐窝数。结果各剂量点的单纯照射组小鼠小肠再生隐窝数与加药照射组相比均无明显差异,经统计学处理P>0.05。9402号与60Coγ射线联合作用,对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增敏比为1.02。结论9402号对正常小肠粘膜隐窝上皮细胞无明显增敏作用。

黄芪三参饮对小鼠小肠隐窝上皮细胞放射效应的研究

目的:观察黄芪三参饮(Huangqi Sanshen Yin,HQSSY)在不同放疗剂量下对小鼠小肠隐窝上皮细胞的影响。方法:选择健康小鼠120只,随机分为两组,治疗组60只小鼠服用中药后接受不同放射剂量照射,对照组60只小鼠单纯接受不同放射剂量照射,两组小鼠雌雄各半。同时接受照射84h后处死,按Withers HR方法镜下计数每环再生的小肠隐窝作为疗效评价指标,分析两组在再生隐窝细胞数上的差异。结果:两组小鼠性别无差异(P>0.05)。剂量12Gy、13Gy对两组雄性小鼠照射均无统计学意义(P>0.05);剂量14Gy、16Gy对两组雄性小鼠照射均存在显著性差异(P<0.05);不同剂量对两组雌性小鼠照射均存在显著性差异(P<0.05);其中剂量15Gy对两组雄性、雌性小鼠照射均存在非常显著性差异(P<0.01)。两组小鼠不分性别在不同剂量下照射均存在非常显著性差异(P<0.01)。根据隐窝细胞数结果所示治疗组优于对照组。结论:HQSSY对每环再生小肠隐窝具有修复作用,在不同放疗剂量下对小鼠小肠上皮细胞放射损伤具有保护作用,益气养阴法对放疗有减毒增效功能,值得临床推广。

黄芪三参饮不同剂量及作用时限对小鼠小肠隐窝效应的研究

目的:观察黄芪三参饮(Huang Qi San Shen Yin,HQSSY)不同剂量及作用时限对小鼠小肠隐窝的效应。方法:选取健康昆明种小鼠100只,随机分为2组,50只连续给药2周,50只连续给药4周。两组又均分为空白组、低、中、高倍剂量组。实验组给予不同剂量的黄芪三参饮,而空白组予以等量的蒸馏水。在连续给药2周及4周后,检测各组小鼠血常规及小肠隐窝,分析最佳服药时间及剂量。结果:各组白细胞、红细胞、血红蛋白及血小板均无明显差异(P>0.05)。小肠隐窝数在2周给药组中,中倍剂量组与空白组存在统计学差异(P<0.05),其他各剂量浓度则无统计学差异(P>0.05);4周给药组中各剂量浓度组与空白组相比,均无统计学差异(P>0.05)。相同剂量浓度时,服2周中药组与服4周中药组间小鼠存在统计学差异(P<0.05),中倍剂量浓度组存在非常显著性差异(P<0.01)。说明服2周中药中倍剂量组对促进隐窝细胞增殖作用最明显。结论:HQSSY对小鼠小肠隐窝有促再生作用,对放射性肠炎可能具有保护作用,为后续研究的药物剂量和服药时限提供依据。

黑顺片总生物碱对番泻叶致小鼠腹泻及大鼠离体小肠平滑肌运动的影响

目的:考察黑顺片总生物碱对番泻叶致小鼠腹泻及大鼠离体小肠平滑肌运动的影响。方法:采用番泻叶致小鼠腹泻模型,以小肠推进率为考察指标,观察黑顺片总生物碱对小鼠腹泻的影响;采用大鼠离体小肠平滑肌实验,以小肠平滑肌收缩的振幅和张力为考察指标,观察黑顺片总生物碱对小肠平滑肌运动的影响及其作用机理;采用HPLC法,分析黑顺片总生物碱中的化学成分。结果:黑顺片总生物碱能显著减慢腹泻小鼠小肠推进运动(P<0.05),并能剂量依赖性降低正常大鼠离体小肠平滑肌收缩的振幅和张力,对氯化乙酰胆碱、甲硫酸新斯的明所兴奋的小肠平滑肌运动均具有一定的抑制作用,但对硫酸阿托品所抑制的小肠平滑肌运动无明显影响。经HPLC分析,苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱及苯甲酰次乌头碱均是黑顺片总生物碱的主要化学成分。结论:黑顺片总生物碱对腹泻小鼠具有一定的止泻作用,其作用机理可能与抑制M胆碱受体有关。

湿热安胶囊主要药效学研究

湿热安胶囊是由藿香、半夏、茯苓等组成的纯中药复方制剂,具有芳香化湿、清热和中之功效,临床用于湿热蕴脾证。本研究着重观察了该药对胃肠推进运动的影响、止泻作用、利尿作用及镇痛作用。结果表明,湿热安胶囊可调节小鼠胃肠运动,表现为9g/kg剂量组能明显促进小鼠小肠推进运动(P【0.05),甲基橙法和半固体糊法均表明湿热安胶囊4.5g/kg和2.25g/kg剂量能促进小鼠的胃排空运动(P【0.05),湿热安胶囊4.

双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎肠道黏膜Toll样受体表达的影响

目的:研究双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型中肠道组织Toll样受体(TLR)2、4、9表达的影响。方法:出生24 h内Sprague-Dewley新生鼠随机分为对照组、实验组、治疗组,每组12只。对照组由母鼠喂养,实验组采取人工喂养+缺氧冷刺激进行造模,治疗组采用人工喂养+缺氧冷刺激并添加喂养双歧杆菌处理(2次/日,1×108cfu/次)。每日定时称体重做记录,在实验第3天处死新生鼠。用HE染色病理切片观察新生鼠肠道病理变化,RT-PCR方法检测肠道黏膜TLR2、TLR4、TLR9的mRNA表达量。结果:3组小鼠体重比较均具有统计学意义,对照组体重增长高于实验组及治疗组,治疗组体重增长高于实验组(P<0.05);实验组病理评分高于对照组及治疗组,治疗组高于对照组(P<0.05);TLR4 mRNA相对表达量实验组高于对照组及治疗组(P<0.05),治疗组的TLR2 mRNA、TLR9 mRNA相对表达量均高于实验组,TLR4 mRNA相对表达量低于实验组,这两组的3种受体mRNA相对表达量比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论:双歧杆菌可减轻新生鼠坏死性小肠结肠炎肠道组织病理变化,作用机制可能与双歧杆菌能降低肠道黏膜的TLR4表达及增加TLR2、TLR9表达有关。