小鼠支气管肺泡干细胞的分离、鉴定与三维培养体系的构建

目的:探讨C57BL6小鼠支气管肺泡干细胞(BASCSs)体外分离、鉴定及其三维培养体系的构建方法,为进一步研究BASCSs的相关特性奠定实验基础。方法:选用C57BL6成年雄鼠,完整分离肺组织,1×PBS灌洗后,经支气管分次灌注Elastase酶进行消化,以锐器切碎肺组织,加入DNA酶使细胞更好地分散开。用75μm细胞筛去除未消化的组织块,所得细胞悬液以荧光标记的CD31、CD34、CD45、SCA-1、EpCAM抗体染色,流式细胞仪分选CD31-CD34-CD45-SCA-1+EpCAM+细胞,细胞与Mlg2908细胞(小鼠肺成纤维细胞株)按(1×103)∶(1×106)的比例混合,以Matrigel为基质构建三维培养体系。结果:通过Elastase酶消化肺组织,每只成年小鼠可得到有核细胞总数(1.6~1.8)×107个,流式细胞技术结果显示,CD34^-CD45^-SCA-1^+EpCAM+细胞约占EpCAM+细胞的22%;将支气管肺泡干细胞、Mlg2908细胞和Matrigel混合培养,4 d后可见克隆形成。随着培养时间延长,克隆数量逐渐减少。8 d后大部分克隆直径达50μm,形态出现分化,克隆可维持至15 d。结论:建立了一种简单、高效的分离、鉴定及三维培养小鼠BASCSs的方法。

支气管肺泡灌洗液及其mNGS对血液系统疾病造血干细胞移植后肺部感染的临床应用

白血病是起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病,白血病细胞大量的增值后抑制了骨髓中正常的白细胞、血小板和红细胞的生成。粒细胞缺乏所致的感染常见感染部位有上呼吸道、肺部、口腔、肛周及全身(败血症)。最常见的致病菌为革兰氏阴性杆菌,其次为革兰氏阳性球菌,还可能出现病毒、真菌(含卡氏肺孢子菌)感染等。造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation, HSCT)是指对患者进行放疗、化疗及免疫抑制预处理,消除异常造血与免疫系统后,将供者或自身造血干细胞(HSC)经血管输注到患者体内,使之重建正常造血和免疫系统的一种治疗方法。自1959年美国E. D. Thomas医师实行全球首例同卵孪生提供造血干细胞进行HSCT后,HSCT已成为治疗多种血液系统恶性疾病有效乃至唯一的耿直方法。骨髓移植后由于全血细胞减少、粒细胞缺乏、留置导管、粘膜屏障受损及免疫功能低下等,感染相当常见。由于HSCT患者的特殊性导致抗生素的滥用以及感染病原体的不断产生、进化和编译,导致其脓毒血症、呼吸衰竭死亡的患者病死率高。临床常用检测方法为分离、生化、核酸等操作相对简单,成本较低的方式方法,然而这些传统方法检测耗时较长,且仅能对常见病原体检测,并且所送项目及标本更依赖临床医师执业水准和判断,因此对像HSCT这种免疫力低下的患者可能感染到的未知及罕见病原体识别困难。宏基因二代测序技术(metagenomics next generation sequencing, mNGS)比较上一代测序方法通量更高,测序速度更快,理论上能无偏倚地检测出细菌、真菌、病毒以及罕见致病微生物,因此,mNGS对疑难甚至复合感染的早期诊断,指导临床抗生素的合理使用和精准治疗提供了重大参考意见。

双调蛋白对支气管肺发育不良模型小鼠肺泡分化的影响

目的:通过构建高氧暴露所致小鼠支气管肺发育不良(BPD)模型,探讨双调蛋白(AREG)表达变化对肺泡分化的影响,为研究BPD肺泡化障碍的发病机制提供实验依据。方法:采用85%的氧浓度构建高氧暴露所致C57BL/6小鼠BPD模型,以小鼠置于同一室内空气中为对照,将小鼠随机分为7 d空气(N7)组、7 d高氧(H7)组、14 d空气(N14)组和14 d高氧(H14)组;在高氧状态下,通过腹腔注射重组小鼠AREG蛋白(rmAREG)构建AREG过表达模型,以腹腔注射PBS为对照,分为PBS组和rmAREG组,每组各5只;通过小鼠鼻内滴注AREG小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体溶液构建AREG敲低模型,以滴注阴性对照慢病毒表达载体溶液为对照,分为病毒空载(NC)组和AREG敲低(KD)组,每组各5只。应用Western blot技术检测各组小鼠肺组织中AREG、表皮生长因子受体(EGFR)、Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECII)标志物肺泡表面活性蛋白C(SP-C)及Ⅰ型肺泡上皮细胞(AECI)标志物平足蛋白(T1α)的表达情况;应用免疫荧光技术检测小鼠肺组织中SP-C/T1α的荧光共定位情况。结果:(1)Western blot结果显示,与空气组比较,高氧组小鼠肺组织中AREG、EGFR和T1α蛋白表达水平升高(P<0.01),SP-C蛋白表达水平降低(P<0.05),免疫荧光双标显示高氧组中SP-C与T1α共定位细胞较空气组显著减少(P<0.05);(2)在高氧状态下过表达AREG后,Western blot结果显示,与PBS组相比,rmAREG组中AREG和EGFR蛋白表达升高(P<0.01),SP-C和T1α蛋白表达降低(P<0.01),免疫荧光双标显示rmAREG组SP-C与T1α共定位细胞较PBS组显著减少(P<0.01);(3)在高氧状态下敲低AREG后,Western blot结果显示,与NC组比较,KD组中AREG和EGFR蛋白表达降低(P<0.01),SP-C和T1α蛋白表达升高(P<0.01),免疫荧光双标显示KD组SP-C与T1α共定位细胞较NC组显著增多(P<0.01)。结论:AREG参与了BPD模型小鼠肺泡分化障碍的病理生理过程,其机制可能与AREG抑制AECII向AECI分化有关。

正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞相关指标的表达

目的检测人正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞（BASC）相关指标，明确BASC是否在人肺组织中存在及其组织定位。方法采用组织免疫荧光方法将经过脱蜡、抗原修复好的组织切片通过5％脱脂奶粉溶液封闭检测，再通过先后加入一抗、二抗以及染核、封片等在荧光显微镜下观察，判定结果时可见合成蛋白复合物（SPC）和八聚体结合转录因子4（OCT4）阳性表达细胞呈绿色，Clara细胞分泌蛋白（CCSP）阳性表达细胞呈红色，而SPC／CCSP或CCSP／OCT4双阳性细胞呈黄色，细胞核呈蓝色。结果在人正常肺组织中可检测到SPC、CCSP及OCT4。免疫荧光检测显示，正常肺组织中均可检测到SPC、CCSP双阳性表达细胞，呈现BASC的表型特征，且均表达OCT4，定位于细支气管一肺泡导管连接处。在人肺腺癌组织中亦可检测到BASC样癌干细胞，在30例肺腺癌组织中26例同时检测出SPC及CCSP，属检测出BASC病例。18例同时检测出OCT4表达。结论人正常肺组织中可检测到BASC，且在肺腺癌组织中可检测到具有BASC表型特征的癌干细胞，提示人肺腺癌可能源自BASC的恶性转化。

小鼠支气管肺泡灌洗术研究进展

支气管肺泡灌洗术是研究呼吸系统疾病的一项重要技术,已经在疾病研究中得到广泛运用。目前,临床患者的支气管肺泡灌洗操作流程已经逐步规范化,而小鼠作为研究肺部疾病重要的模型动物之一,尚缺乏针对小鼠的支气管肺泡灌洗液标准采集和检测流程,不规范的流程会导致该技术在研究中的推广和应用受阻,同时也会影响实验结果的准确性和可靠性。本文对国内外研究中小鼠支气管肺泡灌洗方法进行了系统总结,以期为今后运用并建立规范的灌洗流程提供参考和指导。

胎盘间充质干细胞预处理预防小鼠毛细支气管炎

背景:婴幼儿毛细支气管炎的反复发作是其住院的主要原因之一,而其反复发作与哮喘的形成密切相关。间充质干细胞近年来被广泛应用于相关疾病的研究。目的:探讨人胎盘间充质干细胞对呼吸道合胞病毒致小鼠毛细支气管炎的预防作用。方法:将40只Balb/c小鼠随机均分为间充质干细胞预处理组、生理盐水预处理组、模型组、正常组,每组10只。间充质干细胞预处理组小鼠预先尾静脉注射人胎盘间充质干细胞悬液1 mL(含细胞1×106个),生理盐水预处理组小鼠尾静脉注射等量生理盐水,模型组、正常组小鼠不做任何处理,各组小鼠常规饲养4周后除正常组外均用呼吸道合胞病毒滴鼻法建立毛细支气管炎模型,1次/d,连续滴2 d,末次滴鼻24 h观察各组小鼠咳喘、口周及四肢末梢发绀情况及肺组织病理改变,检测外周血中白细胞介素4水平及肺组织中GATA3蛋白的表达。结果与结论:①间充质干细胞预处理组较模型组症状明显减轻,肺组织炎症减轻;②间充质干细胞预处理组血清白细胞介素4水平及肺组织GATA3表达量明显低于模型组,差异有显著性意义(P<0.01);③生理盐水预处理组较模型组白细胞介素4水平、GATA3表达量无明显变化(P>0.05);④结果表明,人胎盘间充质干细胞预处理可显著降低短期内因呼吸道合胞病毒感染致毛细支气管炎小鼠外周血中白细胞介素4水平和肺组织中GATA3的表达,并降低毛细支气管炎炎症程度。

支气管肺泡灌洗术在哮喘小鼠模型中的应用

目的探讨哮喘小鼠模型支气管肺泡灌洗术标准化操作方法。方法构建哮喘小鼠模型,使用24G静脉留置针对小鼠全肺进行支气管肺泡灌洗术,共3次,每次0.8mL,反复抽注3次。支气管肺泡灌洗液(BALF)离心后取细胞沉淀进行涂片HE染色检查。结果每只小鼠可顺利回收1.8～2.1mL BALF,回收率75%～87.5%;哮喘小鼠BALF涂片可见大量嗜酸性粒细胞。结论采用该方法可成功收集哮喘小鼠模型BALF,可推广应用于其他疾病小鼠模型。

支气管肺泡灌洗术在小鼠肺纤维化模型中的应用

目的：通过改进实验方法来提高肺纤维化小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)回收率的可行性。方法：选取雄性BALB/C小鼠，6～8周龄共36只分成3组。肺纤维化造模28d后，对每只小鼠进行支气管肺泡灌洗术4次，0.8mL/次,反复抽注4次，灌洗液中的炎性细胞以巨噬细胞和淋巴细胞为主。结果：通过本文方法，每只小鼠可收集到的BALF2.6～2.8mL/3.2mL，组间差异无统计学意义(P＞0.05),回收率81.25%～87.5%,其中细胞计数达到实验要求。结论：本方法得到的肺泡灌洗液的回收率可满足医学科研的需要，具有可操作性强且实用的特点。

小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定

目的：建立一套可靠的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）分离、纯化和培养技术,为进一步研究小鼠支气管肺泡干细胞（BASC）的增殖、分化及其在肺腺癌发生中的作用奠定基础。方法：采用分散酶消化小鼠肺组织块,经免疫黏附法纯化小鼠AECⅡ,并进行原代培养。用SP-C和CCSP免疫荧光染色和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定。结果：该方法所获得细胞产量大、纯度高。AECⅡ比例约为（80±2.6）%（n=5）,Clara细胞约（6.7±1.2）%（n=5）,并能维持培养3～5 d。透射电镜观察AECⅡ,细胞内可见板层小体。结论：该方法是一种可靠的小鼠AECⅡ的分离、纯化和培养技术,可满足一般的实验要求。

骨髓间充质干细胞条件培养基对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制

目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高。当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM。将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组。对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养。培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率。将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENa C)相对表达量。结果无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P<0.05或<0.01)。对照组α-ENa C相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P<0.05。结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可能与促进肺泡Ⅱ型细胞α-ENa C表达有关。

小鼠支气管肺泡灌洗术的改进

目的改进制备小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)的方法。方法动物分为3组,第1组和第2组采用传统方法:使用静脉留置针对小鼠全肺进行支气管肺泡灌洗术;第3组采用改进方法:使用自制注射器对小鼠全肺进行支气管肺泡灌洗术。每只动物灌洗3次,每次0.5 m L,并计时。支气管肺泡灌洗液离心,分离上清液准确测量其体积。结果灌洗液收集时间比较,第1组和第2组每只小鼠用时约10 min,第3组每只小鼠用时约4 min,差异有显著性(P<0.05);小鼠支气管肺泡灌洗液体积测量比较,第3组分别多于第1组和第2组,差异有显著性(P<0.05)。结论改进后的方法可简便、经济、高效地收集支气管肺泡灌洗液,特别适合初学研究者使用。

支气管肺泡灌洗液宏基因组二代测序诊断异基因造血干细胞移植后肺部感染的价值

目的分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后肺部感染患者支气管肺泡灌洗液(BALF)宏基因组二代测序(mNGS)和传统病原微生物检测(CMT)结果,探讨BALFmNGS在allo-HSCT后肺部感染诊断中的价值。方法2019年10月—2022年3月河南省肿瘤医院诊治allo-HSCT后肺部感染患者49例,均行支气管镜检查及BALF mNGS、CMT,比较BALFmNGS和CMT病原学诊断结果及病原体检出率,随访观察治疗效果和预后。结果49例患者BALF mNGS检出病原体47例,其中病毒33例(巨细胞病毒16例,EB病毒4例,多瘤病毒3例,呼吸道合胞病毒3例,水痘-带状疱疹病毒2例,人类疱疹病毒7型2例,乙型流感病毒2例,副流感病毒1例),细菌21例(铜绿假单胞菌7例,阴沟肠杆菌5例,肺炎链球菌3例,大肠埃希氏菌2例,金黄色葡萄球菌2例,鲍曼不动杆菌1例,诺卡菌1例),真菌13例(耶氏肺孢子菌6例,霉菌5例,假丝酵母菌2例),结核分枝杆菌3例;混合感染21例(细菌-病毒混合感染9例,真菌-病毒混合感染5例,细菌-真菌混合感染3例,细菌-真菌-病毒混合感染2例,结核-病毒混合感染2例),单一感染26例。CMT检出病原体13例,其中病毒2例(巨细胞病毒1例,EB病毒1例),细菌8例(铜绿假单胞菌3例,阴沟肠杆菌2例,大肠埃希氏菌2例,金黄色葡萄球菌1例),真菌3例(毛霉菌2例,烟曲霉1例);未检出混合感染。BALFmNGS总病原体(95.92%)、细菌(42.86%)、病毒(67.35%)、真菌(26.53%)、混合感染(42.86%)检出率均高于CMT(26.53%、16.33%、4.08%、6.12%、0)(P<0.05)。依据病原学检测结果、药物敏感试验结果给予抗感染及对症支持治疗后,40例好转出院,9例死于肺部感染。结论与CMT比较,BALFmNGS对allo-HSCT后肺部感染患者的病原体检出率高,尤其在混合致病菌、非常见机会性致病菌和病毒方面有明显优势,可指导临床治疗方案的制订。

骨髓间充质干细胞移植在哮喘小鼠肺组织中的作用

目的:探讨外源性骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后在哮喘小鼠肺组织中的分布及对气道炎症的影响,为以MSCs为基础的哮喘疾病的防治提供实验依据。方法:取30只雌性BALB/c小鼠随机分成空白对照组、哮喘组和MSCs处理组。在无菌条件下取绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓MSCs,体外扩增并鉴定。哮喘组和MSCs处理组应用卵白蛋白(OVA)腹腔注射(第0、7、14天)和雾化吸入(第15～21天)制备慢性哮喘模型。第14天通过尾静脉注射将表达GFP的MSCs移植入MSCs处理组小鼠。于末次激发哮喘后24 h,取3组动物支气管肺泡灌洗液(BALF)和外周血,计数细胞总数和嗜酸粒细胞数,取肺组织行病理切片,HE染色观察肺部气道炎症情况,并通过荧光显微镜观察MSCs在哮喘小鼠肺组织中的分布,Image-pro plus图像分析软件测量支气管壁厚度和平滑肌厚度。结果:GFP转基因小鼠骨髓中分离的MSCs表达MSC特异性标志物并表达GFP。MSCs处理组和哮喘组小鼠BALF中细胞总数以及外周血和BALF嗜酸粒细胞百分比均高于空白对照组,但MSCs处理组上述指标明显低于哮喘组,差异有统计学意义(P<0.05)。与哮喘组比较,MSCs处理组小鼠肺组织病理学变化改善,支气管壁厚度和平滑肌厚度均显著降低(P<0.05)。结论:外源性MSCs体内移植能集中分布于哮喘小鼠肺组织并通过减少哮喘气道嗜酸粒细胞侵润等方式抑制哮喘小鼠的气道炎症。

间充质干细胞条件培养基对肺泡上皮液体清除能力的影响

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)条件培养基对小鼠肺泡液体清除的影响和对人肺泡上皮细胞生存能力的作用,并明确小鼠BMSCs条件培养基在肺脏液体清除中的作用机制。方法细胞贴壁法分离培养小鼠BMSCs,应用流式细胞术对小鼠BMSCs的表面标记物进行鉴定;运用酶标仪测定小牛血清白蛋白浓度的方法测定小鼠在体肺泡液体清除率;利用活细胞计数盒(CCK-8)试剂研究小鼠BMSCs条件培养基对人H441肺泡上皮细胞生存能力的影响;采用蛋白质印迹法研究小鼠BMSCs条件培养基对人肺泡上皮细胞钠通道蛋白水平的影响。结果小鼠BMSCs稳定表达CD44,阴性表达CD34;小鼠BMSCs条件培养基能够提升在体小鼠肺泡液体清除率;小鼠BMSCs的条件培养基能够提高人肺泡上皮细胞的生存能力;蛋白质印迹法结果显示小鼠BMSCs条件培养基能够增加人肺泡上皮细胞钠通道的蛋白水平表达。结论小鼠BMSCs条件培养基能够增强肺泡上皮细胞的液体清除并能改善其生存能力,机制可能与肺泡上皮细胞钠通道蛋白表达的增加有关。

白僵菌素对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的影响及其机理研究

目的:观察白僵菌素对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用并探索其机制。方法:以卵蛋白致敏建立支气管哮喘小鼠模型,随机分为模型组、地塞米松组和白僵菌素低、中、高剂量组,另取正常小鼠作为正常组。在小鼠致敏21d后,进行激发,诱发哮喘,并予相应药物治疗5d,正常组与模型组予生理盐水。治疗后所有小鼠取血留存,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)。每组小鼠行左肺灌洗,收集灌洗液行细胞计数。取右肺,行病理学和Western Blot检测Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果:模型组病理学检查发现气道和肺泡炎细胞浸润,肺组织内成纤维细胞浸润,肺泡灌洗液多种炎症细胞计数增加。白僵菌素能显著降低支气管哮喘模型小鼠肺泡灌洗液中的炎症细胞计数,显著降低血清TNF-α和IL-12含量,且表现出剂量依赖性。同时白僵菌素能明显减轻支气管哮喘模型小鼠肺组织的炎性细胞浸润和肺气肿。Western Blot检测发现白僵菌素各剂量组小鼠肺组织中促凋亡因子Bax和Caspase-3表达增加,而抑制凋亡的Bcl-2表达减少。结论:白僵菌素对支气管哮喘模型小鼠的气道炎症有抑制作用,能减少炎症因子的表达,并可能促进炎症细胞凋亡。

能活化肺泡干细胞的生化路径

据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2008／7／4）报道，美国宾州大学医学院（the University of Pennsylvania School of Medicine）的研究人员发现，当Wnt信息路径（Wnt signaling pathway）被活化时会促进肺部细支气管肺泡干细胞（bronchioalveolar stem cells）的细胞数目增加，对于肺部损伤的组织修复有很重要的意义，此研究发表于近期的《自然遗传学》（Nature Genetics）期刊，由Edward Morrisey教授主导研究进行。

肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析

目的：从人肺腺癌细胞株SPC—A1中诱导球体形成，对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法：无血清条件下培养肺癌细胞，采用表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、重组人胰岛素样生长因子-1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）和重组人成纤维细胞生长因子-10（fibroblast growth factor—10，FGF-10）等细胞生长因子诱导球体形成，球体细胞采用RT—PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达，并通过NOD—SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：SPC—A1肺腺癌细胞经培养5—10d后，即可形成悬浮生长的细胞球体（肺球体）。RT—PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221．细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C，胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1，以及肺干细咆主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达，证实80％以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性，在NOD—SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论：肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。

骨髓间充质干细胞在肺损伤大鼠肺组织的分化

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞的可能性。方法将SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体大鼠体内。75只受体大鼠随机分为5组(n=15):肺损伤组、MSCs治疗组、MSCs对照组、单个核细胞对照组和正常对照组。分别于MSCs、单个核细胞注入受体大鼠体内1、2、4周后观察肺组织结构变化,检测肺组织中植入细胞情况及广谱细胞角蛋白的表达水平。结果MSCs治疗组大鼠肺组织在各时间点均有少量植入的细胞,并且部分植入的细胞表达广谱细胞角蛋白。MSCs植入后2周大鼠细支气管壁有少量植入的细胞同时表达广谱细胞角蛋白。其余各组未发现植入细胞的标记。结论MSCs可在损伤的大鼠肺组织中分化为肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞。

气管滴注纳米氧化锌对小鼠的急性毒性作用

[目的]初步探讨气管滴注纳米氧化锌(N-ZnO)的急性毒性。[方法]50只雄性ICR小鼠随机分为5组,高、中、低剂量组(HG、MG、LG)用N-ZnO悬浮液进行单次气管滴注染毒,剂量分别为每只20、10、5μg。空白对照组(BG)不作处理,阴性对照组(NG)采用磷酸缓冲盐溶液(PBS)气管滴注。染毒后第7天对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)、血常规以及主要脏器病理进行分析。[结果]观察终点HG小鼠仅存1只,故未纳入统计。HG和MG一般情况差,染毒后1、3、5天体重降幅高于BG及NG(P<0.05);MG、LG的BALF中总蛋白、羟脯氨酸、碱性磷酸酶(AKP)活性,全血红细胞平均容量(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血小板平均体积(MPV)高于BG及NG (P<0.05);而全血红细胞计数(RBC)低于BG及NG(P<0.05)。MG单核细胞百分比(MOD%)高于BG、NG及LG,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)低于BG及NG(P<0.05);同时,染毒后3天和5天的体重降幅、RDW、MPV、MOD%及肺灌洗液AKP在染毒组问也存在差异(P<0.05)。病理发现各染毒组小鼠肺内有明显的炎症反应,肺泡壁细胞增生和肺泡壁增厚现象,且随染毒剂量增加而加重。[结论]气管滴注N-ZnO诱发了比较明显的肺部炎症,并引起小鼠体重明显降低并发贫血。

间充质干细胞治疗放射性肺损伤的进展

肺作为对放射线敏感的器官之一,在受到一定剂量的放射线照射后,会出现肺组织的放射损伤。它是放射治疗中导致的最为常见并发症之一,制约放射治疗的开展。目前临床上仍然缺少对于治疗放射后肺纤维化有效的药物及手段。放射性肺损伤的病理变化,是以肺泡为主要受损部位的渐进的动态过程,肺泡上皮细胞一直被认为是重要的效应细胞。