四硝酸戊赤藓醇和小鼠核因子κB亚基p65亲和肽在上皮性卵巢癌中的表达及与顺铂耐药性的研究

目的探讨四硝酸戊赤藓醇(PTEN)和小鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NFκB p65)在上皮性卵巢癌中的表达以及与患者顺铂耐药性及预后的关系。方法选取2009年1月-2015年12月在河北医科大学第四医院妇产科治疗的161例上皮性卵巢癌患者,并根据患者对顺铂化疗的敏感性分为敏感组82例和耐药组79例。免疫组化检测患者肿瘤组织中PTEN和NFκB p65蛋白的表达,分析PTEN和NFκB p65蛋白表达与上皮性卵巢癌患者顺铂耐药的关系。Cox回归模型分析上皮性卵巢癌患者预后的独立危险因素。结果 68.29%的敏感组患者肿瘤组织中表达NFκB p65蛋白,明显低于耐药组患者(94.94%);50.0%的敏感组患者肿瘤组织中表达PTEN蛋白,明显高于耐药组患者(17.72%)。上皮性卵巢癌患者卵巢组织中NFκB p65蛋白表达与PTEN蛋白呈显著负相关(r_s=-0.246,P=0.002)。NFκB p65和PTEN蛋白以及手术分期是卵巢癌患者发生耐药的独立危险因素(P<0.05)。结论 PTEN蛋白低表达或NFκB p65蛋白高表达是上皮性卵巢癌患者发生耐药性的独立危险因素。

血管活性肠肽抑制帕金森病MPTP模型小鼠纹状体中核因子-κB p65、肿瘤坏死因子α和单核细胞趋化蛋白-1的上调

目的:研究血管活性肠肽(VIP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠纹状体神经炎症及核因子-κB p65(NF-κB p65)水平的影响。方法:C57BL/6J雄性小鼠30只随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组、MPTP+VIP组。免疫组织化学法观察纹状体酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合蛋白(Iba-1)的水平变化;ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;免疫印迹检测NF-κB p65的水平变化。结果:与NS组相比,MPTP组小鼠纹状体TH水平显著减少,GFAP和Iba-1水平显著上升,TNFα和MCP-1的含量及NF-κB p65的水平显著升高。给予VIP后,纹状体TH水平明显增加,GFAP和Iba-1水平显著下降,TNF-和MCP-1的含量及NF-κB p65的水平明显降低。结论:VIP可能通过降低NF-κB p65的水平从而抑制MPTP诱导的PD小鼠纹状体的神经炎症反应。

IL-17/NF-κB p65通路促进COPD小鼠气道发生上皮间质转化

目的探究白细胞介素17(IL-17)/核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道发生上皮间质转化中的作用。方法将小鼠随机分为对照组和COPD组,每组8只。采用香烟诱导的方法建立小鼠COPD模型。取小鼠支气管肺组织制作石蜡切片,通过苏木素-伊红(HE)染色后观察支气管肺组织的病理改变,并分析肺泡破坏指数和肺平均内衬间隔。采用免疫荧光染色法观察E-cadherin和Vimentin的表达情况。采用免疫组织化学染色法观察IL-17和NF-κB p65的表达情况。结果COPD组小鼠肺泡破坏指数和肺平均内衬间隔均较对照组明显增大,差异有统计学意义(P<0.05),提示病理组织学符合COPD的改变。与对照组相比,COPD组小鼠支气管肺组织中E-cadherin表达明显减少,而Vimentin表达明显增强(P<0.05),提示COPD组小鼠支气管肺组织存在上皮间质转化增强的现象。COPD组小鼠支气管肺组织中IL-17和NF-κB p65的表达均增强(P<0.05),并且分别与E-cadherin的表达水平呈负相关,与Vimentin的表达水平呈正相关。结论COPD小鼠气道IL-17/NF-κB p65通路促进气道上皮发生上皮间质转化。本研究结果有助于进一步认识COPD气道重构的机制,为改善COPD炎症治疗的困境以及预防COPD患者合并发生肺癌,均可提供新的思路。

重组人脑利钠肽干预对急性心肌梗死合并心力衰竭患者 hs-CRP/Alb、NF-κB/p65水平的影响

目的:分析重组人脑利钠肽(rhBNP)干预对急性心肌梗死合并心力衰竭患者超敏C反应蛋白(hs-CRP)/白蛋白(Alb)、核因子κB/P65亲和肽(NF-κB/p65)水平的影响。方法:选取2020年7月—2022年1月我院急性心肌梗死合并心力衰竭患者129例,均采用rhBNP治疗,比较治疗前后相关指标变化情况,包括收缩压、舒张压、心率、呼吸、呼吸困难评分、24h尿量、血常规、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血尿酸、血尿素氮、hs-CRP、hs-CRP/Alb、NF-κB/p65阳性率,分析hs-CRP/Alb、NF-κB/p65水平与其他指标的相关性,随访6个月,统计患者因心肌梗死/心力衰竭再入院情况,并分析影响因素。结果:治疗后患者收缩压、舒张压、心率、呼吸、呼吸困难评分、ALT、AST、血尿酸、血尿素氮、hs-CRP、hs-CRP/Alb、NF-κB/p65阳性率均低于治疗前,24h尿量、Alb水平高于治疗前(P<0.05);治疗后hs-CRP/Alb、NF-κB/p65均与血尿素氮、hs-CRP呈正相关关系,与Alb呈负相关关系,且二者之间互为正相关关系(P<0.05);随访6个月,患者因心肌梗死或心力衰竭再入院率为28.68%;治疗后收缩压、血尿素氮、hs-CRP、hs-CRP/Alb高表达、NF-κB/p65阳性是经rhBNP治疗的急性心肌梗死合并心力衰竭患者再入院的独立危险因素,Alb高表达是其保护因素(P<0.05)。结论:急性心肌梗死合并心力衰竭患者hs-CRP/Alb、NF-κB/p65水平异常升高,经rhBNP治疗后显著降低,二者高水平表达会提高患者再入院风险。

低压冷停搏液灌注对大鼠心肌NF-κB p65表达水平的影响

目的:研究观察不同压力心脏停搏液灌注对离体大鼠心脏核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)表达的影响,为体外循环术中心肌保护提供新的方法和思路。方法:选择健康SD大鼠30只,随机分为对照组、低压灌注组和高压灌注组,每组10只。对照组于麻醉后切开胸腔取正常心肌备检;低压灌注组麻醉后切开胸腔取出心脏,建立离体Langendorff灌注模型,以50mmHg的压力灌注4℃的St.Thomas心脏停搏液5min,然后取出心肌标本备检;高压灌注组麻醉后切开胸腔取出心脏,建立离体Langendorff灌注模型,以100mmHg的压力灌注4℃的St.Thomas心脏停搏液5min,然后取出心肌标本备检。运用Westernblot免疫组化的方法从蛋白水平观察大鼠心肌NF-κBp65在不同实验组中的表达规律。结果:免疫组化提示,与正常对照组(80.1±9.10)相比,不同压力停搏液灌注后大鼠心肌NF-κBp65表达均升高,但低压灌注组心肌的NF-κBp65表达水平(117.5±15.5)明显低于高压灌注组(226.7±12.5)(P<0.05);同样,Westernblot方法检测出的NF-κBp65蛋白相对光密度值也有相同的结果,高压灌注组NF-κBp65相对光密度值(1.58±0.13)明显高于对照组(0.44±0.05)和低压灌注组(0.95±0.05)(P<0.05)。结论:不同压力心脏停搏液灌注下,大鼠心肌的NF-κBp65均有不同程度的表达,但低压灌注组的NF-κBp65的表达水平明显低于高压灌注组,可能对心肌会有更好的保护作用。

探究芩柏加减方通过NF-κB/TNF-α信号通路对溃疡性结肠炎的保护机制

目的通过网络药理学和动物实验探讨芩柏加减方通过核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)/肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)信号通路对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的保护机制。方法将48只SPF级SD大鼠利用2,4,6-三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)建立UC模型,造模成功后随机分为模型组(以生理盐水灌肠)、奥沙拉嗪组(以200 mg/kg奥沙拉嗪灌肠)、芩柏加减方低剂量组(以1.43 g/kg芩柏加减方灌肠)和芩柏加减方高剂量组(以2.86 g/kg芩柏加减方灌肠),每组12只,每天灌肠2次,连续14 d,另取12只正常饲养的SD大鼠作为正常对照组。于给药第1、7、14天每组随机取4只大鼠进行麻醉采血并取结肠组织。采用免疫组织化学法检测结肠组织中核因子κB亚基p65亲和肽(nuclear factorκB p65,NF-κB p65)、TNF-α、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达来评价芩柏加减方对UC大鼠的影响,同时采用TUNEL荧光法检测评价大鼠结肠组织细胞调亡情况;利用ELISA法评价血清中细胞因子NF-κB p65、TNF-α、IL-10、Caspase-3的水平差异变化情况。结果通过网络药理学富集分析发现芩柏加减方中5种主要活性成分与UC成明显相关性且与NF-κB p65/TNF-α信号通路密切相关。经UC造模发现:与正常对照组比较,模型组大鼠结肠组织中TNF-α、Caspase-3和NF-κB p65水平均升高(P<0.05),IL-10水平显著降低(P<0.05)。HE染色结果显示,正常对照组大鼠结肠腺体排列整齐,未见炎性浸润;模型组的结肠腺体排列紊乱,肌底膜断裂且伴有明显的炎性浸润,凋亡指数相比正常对照组均升高(P<0.05);奥沙拉嗪组及芩柏加减方低、高剂量组随着给药时间的延长,结肠病理损伤均得到不同程度的缓解。经检测给药14 d后,血清中TNF-α、Caspase-3、IL-10和NF-κB p65水平结果与组织病理检测结果高度一致性。相比模型组,奥沙拉嗪组、芩柏加减方高剂量组大鼠血清中TNF-α、Caspase-3和NF-κB p65含量明显降低(P<0.05),IL-10水平显著升高(P<0.05)。结论芩柏加减方对TNBS诱导的UC模型具有一定保护作用,能降低细胞凋亡指数,可能是通过调节NF-κB/TNF-α信号通路来降低炎症因子分泌、减轻机体炎症反应、提高抗炎因子表达、促进黏膜愈合来实现。

重组人促红细胞生成素后处理对肢体缺血再灌注诱发大鼠肾损伤的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(rHu-EPO)后处理对肢体缺血再灌注(IR)诱发大鼠肾损伤的影响,以及核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)、TNF-α在其中的作用。方法选择健康成年雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、肢体IR组、rHu-EPO后处理组(rHu-EPO组)各10只。3组均于再灌注2 h后检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),检测肾组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、TNF-α及NF-κB p65表达。结果与假手术组比较,肢体IR组、rHu-EPO组的血清BUN与Cr、肾组织中的MDA与TNF-α升高,SOD活性降低(P均<0.05);与肢体IR组比较,rHu-EPO组BUN、Cr降低,肾组织中的MDA、TNF-α降低,SOD活性升高(P均<0.05)。肢体IR组肾组织中的NF-κB p65阳性表达明显,rHu-EPO组的NF-κB p65阳性表达高于假手术组、但低于肢体IR组(P均<0.05)。结论 rHu-EPO可减少氧自由基、TNF-α生成,抑制NF-κB p65表达,对大鼠肢体IR诱发的肾损伤有保护作用。

盐酸戊乙奎醚对内毒素血症大鼠全身炎性反应的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚对内毒素血症大鼠血清TNF-α、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS），肺组织NF-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）含量的影响。方法健康SD大鼠60只，采用随机数字表法分为5组（每组12只）：对照组（C组）、内毒素组（LPS组）、LPS＋低剂量盐酸戊乙奎醚组（P1组）、LPS＋中剂量盐酸戊乙奎醚组（P2组）、LPS＋高剂量盐酸戊乙奎醚组（P3组）。LPS组腹腔注射内毒素8mg／kg制备内毒素血症模型，C组给予等量生理盐水，P1组．P3组给予相应剂量的盐酸戊乙奎醚5min后注射LPS，给药6h后处死动物取标本。采用ELISA检测血清TNF-α含量，采用比色法测血清iNOS活力，Westernblot检测肺组织NF—κBp65含量，并观察肺组织病理学改变。结果与C组比较，LPS组、P1组、P2组、P3组血清TNF啾含量显著升高（P〈0．05），iNOS活力水平明显升高（P〈0．05），肺组织NF-κBp65表达明显增高（P〈0．05）；与LPS组比较，P2组、P3组血清TNF诎、iNOS活力水平和肺组织NF-κBp65含量均下降（P〈0．05），而P1组TNF-α、iNOS活力和NF—κBp65表达水平，差异无统计学意义（P〉0．05）；P2组、P3组间各指标表达水平比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；P2组、P3组肺组织病理学损伤程度明显轻于LPS组（P〈0．05）。结论盐酸戊乙奎醚可能通过下调TNF-α、NF-κBp65的表达，减少iNOS活化来抑制内毒素休克大鼠全身炎症反应。

复方黄柏液涂剂对深Ⅱ°烧伤创面炎症反应的影响及量效关系

目的:观察复方黄柏液涂剂不同剂量外用对深Ⅱ°烧伤创面愈合过程中炎症反应的影响。方法:将2019年6月至2020年3月承德医学院附属医院烧伤整形科确诊的深Ⅱ°烧伤火毒伤津证患者120例,采用随机数字表法分为对照组(1%体表面积创面外用碘伏溶液35 mL),低剂量治疗组(1%体表面积创面外用复方黄柏液涂剂17.5 mL)和高剂量治疗组(1%体表面积创面外用复方黄柏液涂剂35 mL),每组各40例,每日换药1次。观察各组患者入院时及治疗后创面炎症反应;各组治疗后4 d,观察创面病理学变化,免疫组织化学法测定创面组织核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)的表达情况;治疗后第4,10,21天各组细菌培养并计数,分别按照酶联免疫吸附法测定创面组织中白细胞介素(IL)-2,IL-8水平及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:入院时各组创面炎症反应程度重且无明显差别,治疗后减轻程度与治疗时间呈正相关,同时相点创面炎症反应对照组>低剂量治疗组>高剂量治疗组。对照组于第4天出现细菌生长,低剂量及高剂量治疗组于第10天出现细菌生长,以金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌检出率最高。与对照组比较,低剂量及高剂量治疗组在治疗后4 d创面组织NF-κB p65吸光度明显降低(P<0.05),在治疗后10,21 d细菌计数明显减少(P<0.05),在治疗后4,10,21 d创面组织中IL-2,IL-8及TNF-α水平明显降低(P<0.05),且上述指标低剂量与高剂量组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。光镜下低剂量及高剂量治疗组均较对照组组织水肿减轻,炎症细胞浸润减少,且高剂量组表现更显著。结论:复方黄柏液涂剂外用能减少深Ⅱ°烧伤创面细菌生长,可能通过抑制炎症介质的产生及释放减轻创面炎症反应,且存在一定的量效关系,值得临床推广应用。