微小亚历山大藻麻痹性贝类毒素小鼠生物检测

应用小鼠生物检测法对培养的微小亚历山大藻(LJX02株系)麻痹性贝类毒素进行了检测。首先建立微小亚历山大藻培养技术,利用对数期藻细胞接种,可使藻细胞处于快速生长,并在7d内藻细胞密度最高达到30000ml-1。从培养株系中提取的藻毒素,经液相质谱分析主要为GTX1/4和GTX2/3,其含量分别为12.23μg/ml和9.742μg/ml,12L藻体培养液中可获得18.35μgGTX1/4和14.61μgGTX2/3毒素量。采用小鼠生物检测法建立了藻毒素剂量-小鼠死亡时间曲线,其曲线方程为Y=74.017X-1.5896,将死亡时间t变为时间倒数1/t,GTX毒性MU取对数为logMU,得直线回归方程为Y=3.7009X-0.0858(R2=0.9824),求得了昆明小鼠一个鼠单位所代表的GTX1/4和GTX2/3毒素剂量分别为0.026μg和0.021μg。

小鼠生物检测法测定热带性珊瑚礁鱼毒性的研究

目的：研究小鼠生物检测法测定热带性珊瑚礁鱼毒性的检测方法，以预防雪卡毒素引起的食物中毒。方法：鱼肉组织在70℃蒸煮后经丙酮、乙醚、甲醇、正已烷等有机溶剂提取净化得到脂溶性毒素粗提液，对18～22g雄性小白鼠进行腹腔注射，观察24h，采用公式log（MU）=2．3log（1＋1／T）计算毒性大小。结果：有毒检体使小鼠产生行动迟缓、腹泻、呼吸困难、甚至死亡等症状。在采集的7份样品中，检出1份中毒样品毒性为0．11MU／g。其余均未检出毒性。结论：小鼠生物检测法是目前检测珊瑚礁鱼中雪卡毒素的一种有效、简便、经济、实用的方法，适用于珊瑚礁鱼毒性大小的研究和可疑样品的快速初筛。

河豚毒素生物检测法与荧光光度法的比较研究

为了比较生物检测法和荧光光度法检测河豚毒素(TTX)的性能,使用昆明系小鼠与荧光光度法同时检测10份织纹螺(Nassarius semiplicatus)中河豚毒素的含量。结果表明,荧光光度法与生物检测法之间具有较好的相关性。小鼠死亡时间的倒数与TTX的注射量间的线性方程为y=0.006 97x+0.003 68,r=0.995,精密度为7.4%～10.9%,回收率为90.5%。荧光光度法中TTX的浓度与荧光强度间的线性方程为y=318.09x+8.60,r=0.999,精密度为3.1%～6.6%,回收率为98.7%。荧光光度法测定结果稳定,受外界因素影响小,且速度快,灵敏度高,在河豚毒素的定量检测及预防河豚毒素中毒方面有广泛的应用前景。

麻痹性贝类毒素检测技术研究

麻痹性贝类毒素是目前世界范围内分布最广、危害最大的生物毒素之一,对麻痹性贝类毒素的检测监控是保障食品安全的重要措施。本文介绍了麻痹性贝类毒素传统检测方法,主要有小鼠生物检测法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法和酶联免疫法等;简述了近年来开发的新型、快速的生物传感器技术,如免疫生物传感器、毛细管电泳免疫传感器和核酸适配体生物传感器等;梳理了麻痹性贝类毒素各类检测方法的特点,总结了其优缺点及应用领域,并对未来麻痹性贝类毒素检测技术的发展趋势进行了展望,以期为麻痹性贝类毒素的检测监管提供参考。

快速、可靠地定量分析生物毒素 UPLC／MS／MS法分析贝类中亲脂性海洋生物毒素

本文采用UPLC／MS／MS法对海洋中生物毒素进行定量分析。这是一种能够快速、可靠地分析贝类中管制和非管制亲脂性海洋生物毒素的方法。与传统的HPLC／MS／MS方法相比．其分析速度提高了4倍，单次分析时间为5min.可用于代替传统的小鼠生物检测法。

三种鲀的毒性及其与种的相关性研究

用小鼠生物检测法及薄层等电聚焦电泳法测定 3种河的毒性及其蛋白质组分的种属差异性 .结果表明 ,河的毒性强弱与其种属有密切关系 ,不同种河的毒性差异很大 ;同种河的不同个体以及同一个体的不同器官组织也有较大差异 .

特异性Tetrodotoxin亲和吸附微珠的制备及其提取性能

将横纹东方豚卵巢与醋酸乙醇溶液混合匀浆,经离心,加热,沉淀,脱脂等处理,制得粗提液,活性炭吸附粗提液得到粗毒液;以壳聚糖为载体合成亲和微珠分别来分离纯化粗提液和粗毒液,用传统的小鼠生物法检测TTX毒素量.潮湿活性炭对TTX的吸附量约为2μg/g,潮湿亲和微珠吸附量约为10μg/g;亲和微珠吸附提取粗毒液,回收率达51%,直接吸附粗提液,回收率达到80%,同时蛋白也得到有效的去除.

珠海河鲀的毒性研究

为了探讨珠海市的河鲀品种与毒性情况。在珠海范围内的各渔市场和养殖场中搜集不同河鲀种类,包括野生和人工养殖品种,经鉴定后再利用小鼠生物检测法分析不同种类河鲀体内所含毒性大小。结果表明:在此研究期间总共搜集到8个河鲀品种,分别隶属于2科3属,它们是四齿鲀科(真河鲀科)中的兔头鲀属和东方鲀属以及二齿鲀科(棘鲀科)中的刺鲀属。除了暗纹东方鲀是人工养殖品种外,其他所有品种都是在沿海或近海捕获的野生河鲀品种。通过小鼠生物检测实验结果得出韦氏兔鲀、暗纹东方鲀和六斑刺鲀全身含河鲀毒素均低于10鼠当量/g,可视为无毒并可供食用品种。弓斑东方鲀只有肝脏有弱毒(10～100鼠当量/g之间)。菊黄东方鲀肝脏含有100鼠当量/g以上的毒素,肠脏含毒介于10～100鼠当量/g之间,其余器官含毒均低于10鼠当量/g。横纹东方鲀的卵巢、肝脏和鱼皮均含有100鼠当量/g以上的毒素,肠脏含毒在10～100鼠当量/g之间,鱼肉则含毒低于10鼠当量/g。根据结果可以毒性分类韦氏兔鲀、暗纹东方鲀和六斑刺鲀为无毒河鲀,弓斑东方鲀为弱毒河鲀,而菊黄东方鲀和横纹东方鲀均为强毒河鲀,前者毒素主要集中在肝脏,后者在肝脏、鱼皮和卵巢。

河豚毒素(TTX)产生菌株CZ-312的研究

从野生河豚鱼卵巢中分离产TTX的细菌,采用小鼠生物检测法选择出毒性相对较强的CZ-312菌株,通过形态观察和生理生化试验,以及16S rRNA基因序列分析,初步鉴定为沙雷氏属(Serra-tiasp)。条件试验表明,CZ-312菌株最适pH为7.0,最适NaCl浓度为2%,最适生长温度为26℃。

产河豚毒素(TTX)菌株ZY-23的分离与鉴定

从河豚卵巢中分离得到35株细菌,利用小鼠生物法检测获11株产河豚毒素(TTX)菌株,其中有6株菌产TTX含量达400ng/mL以上,对其中ZY-23菌株进行传统分类学方法鉴定,初步鉴定为液化沙雷氏菌(Serratia liquefaciens)。16SrRNA基因序列分析,ZY-23菌株与Serratiasp.Tp5的亲缘关系最近,相似度达99%。用荧光检测分析其发酵液,发现在423nm处与标准品具有相同的发射峰,初步证实发酵液含有TTX。