MGRN1对小鼠睾丸精原干细胞线粒体自噬的影响

目的:研究MGRN1对小鼠睾丸精原干细胞(SSCs)线粒体自噬的影响。方法:体外培养小鼠睾丸精原干细胞,分为3组,对照组(空载体组)、MGRN1组(利用RNAi下调SSCs中MGRN1的表达)、MGRN1+FCCP组(在MGRN1下调后的SSCs中加FCCP诱导线粒体自噬);利用Western印迹检测3组线粒体功能相关蛋白(Cytochromo c、COX IV)及线粒体自噬相关蛋白LC3、P62、CK2表达及FUNDC1磷酸化水平。电镜观察各组SSCs的线粒体及线粒体自噬小体。结果:免疫印迹显示,MGRN1组及MGRN1+FCCP组与对照组相比,Cytochromo c、COX IV、LC3、P62表达明显下降,FUNDC1磷酸化水平增加,促FUNDC1磷酸化的蛋白CK2表达增加(P<0.05)。而MGRN1+FCCP组和MGRN1组相比,MGRN1、Cytochrome c、COX IV、LC3、P62、CK2表达及FUNDC1磷酸化无明显差异(P>0.05)。电镜显示:与对照组相比MGRN1组及MGRN1+FCCP组中,SSCs的线粒体损伤增加,线粒体自噬小体减少。结论:MGRN1下调后,体外培养的小鼠SSCs中线粒体受损、线粒体自噬受抑制、加FCCP也无法诱导出线粒体自噬增加,即MGRN1影响小鼠睾丸线粒体自噬,可能与CK2影响FUNDC1的磷酸化有关,具体分子机制有待进一步研究。