BMSCs外泌体miR-181通过靶向调控ERK5促进股骨骨折小鼠的成骨分化

目的:探讨BMSCs外泌体(BMSCs-Exos)对其体外成骨分化的调控作用,以及miR-181通过靶向ERK5实现的机制,并研究BMSCs-Exos和过表达miR-181对小鼠股骨骨折愈合的影响。方法:通过动态光散射(DLS)技术和Western blot法表征BMSCs-Exos,qRT-PCR和Western blot检测miR-181和ERK5表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181对ERK5的调控。使用Western blot和ELISA检测蛋白表达和ALP活性。在小鼠股骨骨折模型中注射miR-181 mimic或BMSCs-Exos,通过骨痂体积(CV)、骨体积分数(BV/TV)和相关蛋白评估骨折愈合效果。结果:BMSCs-Exos的粒径范围为50~150nm,Zeta电势为-25.69±2.88mV,表面标志物CD9、CD63、CD81显著表达。BMSCs-Exos组中miR-181表达上调(P<0.05),ERK5表达下调(P<0.05);mimic上调了miR-181表达并降低ERK5蛋白表达(P<0.05)。BMSCs-Exos转运miR-181通过靶向调控ERK5促进BMSCs体外成骨分化(P<0.05),且BMSCs-Exos和过表达miR-181均促进小鼠股骨骨折愈合(P<0.05)。结论:BMSCs-Exos通过转运miR-181、靶向调控ERK5促进BMSCs体外成骨分化,并有助于小鼠股骨骨折愈合。

离体小鼠股骨骨小梁与骨皮质CT样品制备探索

目的 探索不同的样品制备方法对离体小鼠股骨骨小梁密度(BMD)与骨皮质密度(TMD)CT定量测量的影响。方法 购入6~8周雌性BALA/C小鼠20只,取出40根小鼠股骨浸泡于戊二醛溶液1周,将小鼠股骨随机分为无水合制备组和水合制备组,每组20根。无水合制备组于扫描当天直接从戊二醛溶液中取出离体小鼠股骨,扫描过程中采用直接暴露在空气中。水合制备组于扫描前1天将固定于戊二醛溶液中的离体小鼠股骨放入EP管中,加入纯净水进行12 h水合,扫描过程中内部采用湿润纸巾包裹,外边再包保鲜膜,模拟小鼠股骨在活体的环境下进行显微CT(Mirco-CT)扫描。两组采用完全一致的CT扫描参数,进行重建与分析,对比两组BMD和TMD检测结果。结果 水合制备组BMD检测结果高于无水合制备组,差异有统计学意义(P<0.05);两组TMD检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 无水合制备法直接影响了BMD的测量结果准确性,对TMD的测量结果产生的影响较小,使用水合制备法更能保证实验结果的准确性。

基于Micro-CT的小鼠骨小梁LBF模型提取及特征分析

针对小鼠股骨Micro-CT切片图像,提出一种骨小梁形态与分布特征的定量分析方法。利用形态学与LBF模型结合方法提取股骨中的骨小梁,通过模拟骨质疏松症状与提取后的正常骨小梁进行几何形态参数测量的对比,同时利用灰度共生矩阵分析骨小梁的纹理分布特征参数进行实验对比。实验结果表明,骨小梁变细、断裂以及消失等状态,其对比度、熵、能量、相关性等参数会发生明显变化,为定量化分析骨质疏松提供了一种研究方法。

^(60)Coγ射线急慢性照射对小鼠骨、牙和毛发ESR信号的影响

对昆明种雄性小白鼠给予不同剂量的急性或慢性^(60)Coγ射线整体照射(剂量范围为0—3.0Gy),分离小鼠股骨、牙齿和毛发并进行前处理后,用电子自旋共振谱仪(ESR)测定各自的信号强度。结果表明,小鼠牙齿和毛发信号无特征性峰。小鼠股骨ESR信号呈现特征峰,无论是急性照射还是慢性照射,小鼠股骨ESR信号强度随着照射剂量的增大而增高,呈现良好的直线关系,保存在福尔马林溶液中的小鼠股骨,其ESR信号强度在保存7d时明显降低(p<0.001),在室温干燥条件下保存453d的股骨ESR信号强度无明显改变。说明,小鼠股骨的最适保存条件为室温干燥。

“小鼠骨髓细胞染色体的制备及观察”实验的教改尝试

在医学院校开设的“医用生物学”与“医学遗传学”两门课程中,“小鼠骨髓细胞染色体的制备及观察.”是学生必做的实验之一.该实验主要操作步骤分为:取出小鼠股骨,收集骨髓细胞,低渗处理,预固定,第一次固定,第二次固定,制备细胞悬浮液,滴片,染色,观察等.该实验是使用实验器材较多,课堂实验时间较长,课堂秩序较难维持的一个大型实验.在实验过程中。