Circ_ZFYVE1对胰岛β细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的观察Circ;FYVE1(cZFYVE1)对小鼠胰岛β细胞瘤(MIN6)增殖、迁移和凋亡的影响。方法 MIN6细胞分为正常对照组(NC)和高糖组(HG)。NC、HG组分别在含有5.5、25 mmol/L葡萄糖的DMEM完全培养基中培养48 h。q RT-PCR检验cZFYVE1表达。Sanger测序对cZFYVE1反向剪接位点的PCR产物进行验证。慢病毒转染实验分为空载体组(Con)组、敲低环状质粒载体组(cZFYVE1-si)和过表达环状质粒载体组(cZFYVE1-OE)。Con组使用空载体进行转染,cZFYVE1过表达和敲低环状质粒载体转染MIN6胰岛β细胞株。qRT-PCR检测转染后各组MIN6细胞系中c ZFYVE1表达水平;CCK8法、EDU法检测细胞增殖;划痕实验检测各组24 h划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot法检测Caspase-3蛋白表达水平。结果 HG组cZFYVE1表达低于NC组[(0.7169±0.1525)vs(1.0000±0.0000),P<0.05]。Sanger测序证实cZFYVE1反向剪接位点。与Con组比较,cZFYVE1-si组cZFYVE1表达、EDU阳性率、24 h及48 h细胞增殖活力、24 h划痕愈合率降低(P<0.05),cZFYVE1-OE组cZFYVE1表达、EDU阳性率、24 h及48 h增殖活力、24 h划痕愈合率升高(P<0.05)。与Con组比较,cZFYVE1-si组MIN6细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),cZFYVE1-OE组MIN6细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。结论 cZFYVE1可促进MIN6胰岛β细胞增殖、迁移并减少凋亡。