小鼠角膜上皮细胞诱导获得小胶质样细胞

背景:小胶质细胞是中枢神经系统最主要的免疫细胞,对研究多种疾病的发生和治疗有重要意义,但体外个体化细胞的获得受限。目的:建立一种新的小胶质细胞诱导培养体系,将小鼠角膜上皮细胞诱导成为小胶质样细胞并对其进行鉴定。方法:裂解2周龄小鼠角膜上皮组织获得上皮细胞,先后加入含有白细胞介素34(100 ng/mL)、集落刺激因子1(5 ng/mL)和转化生长因子β(1 ng/mL)、白细胞介素6(1 ng/mL)、重组血管内皮生长因子(1 ng/mL)的改良培养基,并且持续处理到16 d。通过转录水平、蛋白表达水平、亚细胞定位、流式分析和形态学观察多角度评估诱导后的细胞性质。结果与结论:诱导后获得表达TMEM119、CXCL11、CD11b、CD68小胶质细胞特征分子的细胞,形态学观察、流式分析和荧光检验后确定其表达产物具有较高丰度,与小胶质细胞极为相似。

枸杞多糖对衰老小鼠MCE细胞高糖损伤后氧化应激的影响

目的:研究高糖环境下枸杞多糖(LBP)干预衰老小鼠角膜上皮(MCE)细胞后对氧化应激指标(ROS、SOD1)的影响。方法:根据培养基中葡萄糖浓度将MCE细胞分为五组培养48 h:①葡萄糖5.5 mmol/L组;②葡萄糖25 mmol/L组;③葡萄糖200 mmol/L组;④葡萄糖200 mmol/L+LBP 200μg/ml组;⑤葡萄糖(200 mmol/L)+甘露醇(75 mmol/L)组,用免疫荧光染色各组细胞,使用image J定量分析ROS的具体数值,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组培养基上清中SOD1的含量,进行统计学分析。结果:①与各组比较,葡萄糖浓度200 mmol/L组ROS水平最高(P<0.01),葡萄糖200 mmol/L+LBP 200μg/ml组ROS水平低于葡萄糖浓度200 mmol/L组(P<0.01)。②与各组比较,葡萄糖浓度200 mmol/L组SOD1水平最低(P<0.01),葡萄糖200 mmol/L+LBP 200μg/ml组SOD1水平高于葡萄糖浓度200 mmol/L组(P<0.01)。结论:LBP通过降低氧化应激中ROS水平,升高SOD1水平,保护高糖损伤的MCE细胞。