蜈蚣败毒饮对雌激素周期小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响

目的:蜈蚣败毒饮对雌激素周期小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响。方法:取健康昆明雌性小鼠,腹腔注射己烯雌酚,诱导小鼠处于雌激素周期。灌胃7天,第8天给各组动物腹腔注射秋水仙碱,使细胞有丝分裂周期停滞于有丝分裂中期,切取阴道组织,制成病理切片,在光学显微镜下观察并计数基底细胞中所出现的有丝分裂数。结果:阳性对照组和中药各剂量组有丝分裂细胞均有所减少,阳性对照组、中低组、中中组、中高组、与生理盐水组相比P<0.01;中高组与阳性对照组相比P<0.05。结论:蜈蚣败毒饮能抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂。蜈蚣败毒饮优于复方青黛胶囊。

硒对小鼠阴道上皮细胞分裂影响的研究

阴道灌注雌激素期小鼠不同浓度的亚硒酸钠溶液常规切片结果显示０．０８‰，０．１６‰的亚硒酸钠抑制阴道上皮细胞分裂（Ｐ＜０．０５），０．６４‰亚硒酸钠促进阴道上皮细胞分裂（Ｐ＜０．０５），０．０２‰、０．０４‰、０．３２‰亚硒酸钠对细胞分裂与对照相比影响不显著（Ｐ＞０．０５）。硒对细胞分裂的影响符合Ｗｅｉｎ－ｂｅｒｇ原理。

银消丸对小鼠阴道上皮有丝分裂的影响

目的:观察中药银消丸对银屑病小鼠模型的治疗作用;方法:使用小鼠雌激素期阴道上皮模型;结果:银消丸对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用,在电镜下可见细胞核与细胞器无异常改变。结论:银消丸可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化来发挥治疗作用。

IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白对小鼠阴道上皮细胞模型银屑病的影响

目的:观察IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白对小鼠银屑病模型的治疗作用并探讨其可能的机制。方法:腹腔注射己烯雌酚0.2mg天/连续3天,建立处于雌激素期的小鼠阴道上皮模型,腹腔注射甲氨喋呤和IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白观察比较对银屑病的治疗作用,监测小鼠体重并检测血清中IFN-γ含量的变化,统计小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂指数。结果:IL-18BP-Fc-IL-1Ra剂量依赖性的抑制雌激素期小鼠阴道上皮细胞有丝分裂指数,使血清中IFN-γ含量降低。结论:IL-18BP-Fc-IL-1Ra嵌合蛋白对己烯雌酚诱发的阴道上皮模型性银屑病具有治疗作用而且可能是通过降低血清内IFN-γ的含量实现的。

HSV-2阴道感染并诱导小鼠阴道粘膜上皮细胞凋亡

最近的报道指出，某些病毒有诱导体外细胞凋亡的作用，借以限制病毒的扩散。为探讨ＨＳＶ－２在体内诱导细胞凋亡的效果及其形态学特点，用 ＨＳＶ－２ ３３３株感染小鼠阴道，于感染后不同天数处死动物，取其阴道，固定于１０％中性福尔马林，ＴＵＮＥＬ末端标记染色显示凋亡的细胞，光镜下进行原位观察。结果显示：感染后的第１天粘膜上皮内即出现大量的凋亡细胞，第２天至１１天凋亡细胞的数量及在上皮内的分布范围达最高水平。早期的凋亡细胞见于感染后所有标本，其核染色质形态及分布似正常细胞，但它被ＴＵＮＥＬ标记染成棕黄色；晚期的凋亡细胞亦见于所有标本，其胞核缩小，染色质浓缩并在核周边集聚，核中心空化。载有凋亡细胞的上皮在阴道粘膜上分布很广，最广的可占全阴道上皮的２／３。同时可见ＨＳＶ．２引起的上皮细胞坏死及疱疹形成，二者均由凋亡细胞包围。凋亡细胞不断地由上皮表面脱落至阴道，未见凋亡小体及吞噬现象。结果提示，ＨＳＶ－２ ３３３株阴道感染可同时诱导细胞坏死及凋亡，细胞凋亡可能在限制病毒产生子代及限制感染区域扩展起重要作用。

雌激素对小鼠阴道上皮细胞C-型凝集素表达的影响

目的:探讨雌激素增加假丝酵母菌阴道定植量的分子机制。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测雌激素组、去势组、动情间期组C57BL/6J雌性清洁级小鼠阴道上皮层中C-型凝集素mRNA的表达。结果:雌激素组及动情间期组小鼠阴道上皮层中均检测到C-型凝集素mRNA的表达,雌激素组相对表达量(1.02±0.16)显著高于动情间期组(0.71±0.57)(P<0.05)。去势组未检测到C-型凝集素mRNA的表达。结论:雌激素可能上调C-型凝集素在阴道上皮细胞的表达。

小鼠阴道疱疹感染与Fas蛋白粘膜上皮细胞中的表达

目的 探讨HSV 2小鼠阴道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,以及Fas蛋白的表达与细胞凋亡的相关关系,有助于阐明HSV 2感染后病毒与细胞相互作用的分子机理,为HSV 2病毒 感染疾病的诊断、治疗提供一定的实验和理论依据。方法将HSV 2接种于小鼠阴道,建立HSV 2阴道粘膜面直接感染动物模型,分不同天数处死,取其阴道固定于10%福尔马林。用HE染色、TUNEL染色研究HSV 2小鼠阴 道粘膜面感染后的病理变化和诱导粘膜上皮细胞凋亡的表现,用免疫组化法研究Fas蛋白分子在阴道上皮细胞中 的表达水平,分析与细胞凋亡的相关关系。结果小鼠阴道HSV 2感染后的粘膜上皮细胞病理学改变为:22份标本 中同时伴有细胞坏死、炎症浸润及凋亡细胞阳性表达,标本中可达粘膜上皮的1/4区域。这些形态改变从实验感 染的第1天至第11天均可见到。小鼠阴道感染HSV 2后,Fas蛋白从感染第3天起可见到表达(22/24)。凋亡细 胞指数与Fas阳性细胞指数呈正相关(r=0.9660,P<0.05)。结论HSV 2直接感染小鼠阴道后可同时引起炎症、 细胞溶解性坏死及诱导阴道上皮细胞凋亡。HSV 2感染小鼠阴道后阴道上皮细胞Fas分子呈高表达,与凋亡细胞 指数呈正相关,提示Fas对HSV 2诱导的粘膜细胞凋亡起上调作用;可进一步研究作为阴?

红芸豆植物凝集素长期阴道给药对小鼠阴道上皮细胞的影响

目的:观察长期阴道使用红芸豆植物凝集素(RKBL)对小鼠阴道上皮细胞的影响。方法:使用不同浓度的RKBL注入小鼠阴道连续给药4个月后断颈处死小鼠,取其阴道及周围组织,制作石蜡切片并经苏木精染色,显微镜下观察阴道组织的形态学变化。结果:小鼠阴道在浓度≤2.5mg/只的RKBL处理后,无炎症病变,阴道粘膜上皮细胞形态完好无破损,皮下组织形态正常。而当给药浓度提高到5mg/只时,阴道黏膜浅层上皮细胞出现空泡化。结论:浓度≤2.5mg/只的RKBL长期使用不会引起阴道黏膜上皮细胞及皮下组织的不良反应。

环孢素A对小鼠气管移植模型中气管上皮细胞的影响

背景:气管上皮的再生及完整性对预防肺移植后闭塞性细支气管炎起着最为关键的作用。目的:观察环孢素A对小鼠气管异位移植模型中移植气管上皮细胞增殖的影响。方法:将BALB/c小鼠气管异位移植到C57BL/6小鼠颈背部皮下,建立异位气管移植模型,将受体小鼠随机分组:实验组腹腔注射环孢素A25mg/(kgd),对照组不注射环孢素A。结果与结论:移植气管病理检查显示,环孢素A具有延缓上皮细胞剥离、减少淋巴细胞浸润以及延缓纤维化过程的作用,但最终仍无法阻止移植物管腔闭塞的发生。上皮细胞定量分析显示,环孢素A可以延缓上皮纤毛细胞下降幅度,延缓上皮细胞增殖高峰期,加快上皮细胞凋亡高峰期。细胞因子检测显示,环孢素A对白细胞介素4分泌具有促进作用,对干扰素γ分泌具有早期促进,中晚期抑制作用。

雌激素对阴道上皮细胞抗念珠菌作用的影响

目的:研究阴道上皮细胞对白色念珠菌的生长抑制作用及雌激素对此作用的影响。方法:用酶消化法分别分离雌激素处理组、动情间期组和去势组小鼠阴道上皮细胞作为效应细胞,白色念珠菌芽生孢子作为靶细胞,将效靶细胞共同孵育9h,测定白色念珠菌生长抑制率,观察其生长密度及透射电镜超微结构的改变。结果:白色念珠菌与阴道上皮细胞共同孵育后,生长受到抑制,生长密度降低,超微结构表现为与阴道上皮细胞靠近的念珠菌细胞壁崩解,细胞膜连续性破坏,甚至细胞器肿胀溶解。雌激素处理组与去势组和动情间期组比较,阴道上皮细胞对念珠菌的生长抑制率下降(P<0.05)。结论:小鼠阴道上皮细胞具有天然的抗白色念珠菌作用,雌激素降低此抑制作用。

阴道上皮细胞的抗念珠菌作用及雌激素对此的影响

目的 :研究阴道上皮细胞对白色念珠菌生长的抑制作用及雌激素对此作用的影响。方法 :用酶消化法分别分离雌激素处理组、动情间期组和去势组小鼠阴道上皮细胞作为效应细胞 ,白色念珠菌芽生孢子作为靶细胞 ,将效靶细胞共同孵育 9h ,测定白色念珠菌生长抑制率 ,观察其生长密度及透射电镜下超微结构的改变。结果 :白色念珠菌与阴道上皮细胞共同孵育后 ,生长受到抑制 ,生长密度降低 ,超微结构表现为与阴道上皮细胞靠近的念珠菌细胞壁崩解 ,细胞膜连续性破坏 ,甚至细胞器肿胀溶解。雌激素处理组与去势组和动情间期组比较 ,阴道上皮细胞对念珠菌的生长抑制率降低 (P <0 .0 5 )。结论 :小鼠阴道上皮细胞具有天然的抗白色念珠菌作用 ,雌激素能降低此抑制作用。

甘露糖结合受体在阴道上皮细胞抗念珠菌中的作用

目的:研究小鼠阴道上皮细胞抗念珠菌的作用机制。方法:用酶消化法将动情间期C57小鼠阴道分离成单个阴道上皮细胞,用流式细胞术及3H-葡萄糖液闪计数法研究甘露聚糖、高碘酸及钙离子螯合剂EGTA对阴道上皮细胞与白色念珠菌粘附及阴道上皮细胞抗白色念珠菌作用的影响。结果:甘露聚糖组(3mg/ml)阴道上皮细胞与白色念珠菌的粘附率为(4.47±1.89)%,显著低于对照组的(14.16±2.17)%(P<0.05),阴道上皮细胞对白色念珠菌生长抑制率为(43.29±9.79)%,高于对照组的(34.81±10.02)%,但差异无显著性(P>0.05);高碘酸组粘附率为(12.27±2.17)%,与对照组的差异无显著性(P>0.05),抑制率为(2.2±2.07)%,显著低于对照组(P<0.05);EGTA组粘附率为(0.4±0.29)%,抑制率为(1.6±1.53)%,均明显低于对照组(P<0.05)。结论:小鼠阴道上皮细胞表面的甘露糖结合受体介导了与白色念珠菌之间的粘附,此受体蛋白上的糖链可能参与了阴道上皮细胞的抗白色念珠菌作用。

嗜上皮细胞特异性启动子ED-L2转基因小鼠的建立

目的 :利用ED L2启动子构建载体 ,建立鼻咽癌转基因动物模型 .方法 :将ED L2 pEGFP质粒用XhoI酶切线性化 ,胶回收线性化片段 ,稀释浓度 4mg·L-1 ,采用显微注射法 ,将外源基因注射入小鼠受精卵细胞内 .结果 :产 1 2只小鼠 ,PCR检测基因整合 ,其中阳性 9只 ,阳性率 75 % ,SouthernBlot检测阳性 2只 ,阳性率 1 6 .6 7% .结论 :嗜上皮细胞特异性启动子ED

永生化正常小鼠卵巢上皮细胞系的建立

目的:探讨具有“永生化”特性的正常小鼠卵巢上皮细胞(MOSE)系建立的方法和可行性。方法:用胰酶消化法从温度敏感抗原(TsAg)转基因小鼠中分离MOSE,用4%血清培养液培养,通过细胞形态学特征的观察、细胞免疫组织化学染色检测CK-19和Vimentin来鉴别,体内成瘤实验观察有否恶性转化。结果:用胰酶消化法能迅速获得足够的MOSE,低血清(4%)培养可以有效去除可能污染的间质细胞,CK-19和Vimentin检测显示均符合上皮细胞的特性,细胞培养和体内成瘤实验均提示其符合具有“永生化”细胞的特性,没有自发发生恶性变,在体内没有成瘤能力。结论:用胰酶消化法,从转TsAg小鼠卵巢中获取的正常MOSE细胞具有“永生化”的特性,能够满足体外实验研究的需要,为卵巢癌的研究提供了可靠的细胞系。

丹槐银屑浓缩丸对小鼠银屑病模型的病理实验研究

目的验证丹槐银屑浓缩丸的药效,为其临床应用提供试验依据。方法采用小鼠阴道上皮细胞有丝分裂模型、尾部鳞片表皮模型,观察丹槐银屑浓缩丸对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂及尾部鳞片表皮细胞分化的影响。结果丹槐银屑浓缩丸能显著抑制小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂,促进小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成。结论丹槐银屑浓缩丸具有抑制银屑病小鼠模型阴道上皮有丝分裂,促使小鼠动物模型尾部鳞片颗粒层形成的作用。

不同条件下小鼠白念珠菌性阴道炎易感性的研究

目的研究不同条件下小鼠阴道粘膜对白念珠菌的易感性。方法建立免疫系统正常小鼠(雌激素化)与免疫抑制小鼠模型,建立初发与复发白念珠菌性阴道炎模型,对比观察不同干预措施下小鼠的一般生长情况、阴道灌洗液涂片细胞学检查结果、阴道组织病理学改变并测定其阴道灌洗液真菌载量。结果免疫抑制组各时点平均CFU水平均高于雌激素化组,且峰值后移,自第4天起两组相比有显著性差异(P<0.05)。雌激素化组、免疫抑制组各时点平均CFU分别与正常对照组相比均显示极显著性差异(P<0.01)。结论处于免疫抑制状态的小鼠阴道粘膜对白念珠菌更具有易感性;再次感染与初次感染不存在易感性差异。

小鼠乳腺腺泡模型建立的初步探讨

建立乳腺腺泡模型和初步探讨其形成机理,为深入研究血乳屏障和泌乳机理提供基础方法和基本手段;采用改良的EHS基质培养法;成功获得具有极性和分泌功能的小鼠乳腺模型,向腺泡腔内可分泌β-酪蛋白和IGFBP-5;获得的小鼠乳腺腺泡模型具有显著的腔内分泌功能。

利用假孕小鼠建立小鼠行经模型的研究

目的利用假孕小鼠建立小鼠行经模型,并与以往的小鼠行经模型做对比。方法NIH雌鼠与输精管结扎的NIH雄鼠晚间合笼交配,翌日晨见阴栓为假孕第0天。第3.5天于左侧子宫角注射25μl花生油诱导蜕膜化,右侧子宫角为对照;第5.5天切除双侧卵巢(作为0 h),分别在0、8、12、16、24、32和48 h各时点行颈椎脱臼处死小鼠,收集子宫,观察组织形态学,阴道细胞学涂片观察出血情况。结果子宫在0 h可见广泛蜕膜化;8 h上皮有部分脱落,部分蜕膜化细胞出现核固缩;12 h子宫腔上皮基本脱落,核固缩凋亡坏死的区域继续扩大;1 6 h可见蜕膜化组织崩解;24 h崩解组织剥离;32 h组织开始修复;48 h组织修复完好。血清孕酮(P)浓度在切除卵巢后8 h开始快速下降,48 h降至0 h浓度的1/7。结论利用假孕小鼠人工诱导蜕膜化后,切除双侧卵巢可以模拟子宫内膜崩解脱落和再生。

MB49小鼠膀胱癌模型和腺病毒基因治疗

膀胱癌是最有希望进行免疫和基因治疗的疾病。瑞典Uppsala大学的LoskogA等人在英国LabAnim杂志上发表了C57BL／6小鼠MB49小鼠膀胱癌新模型，该模型通过皮下接种方式获得，具有转移性。作者用腺病毒载体携带不同的转导增强子来增强体内基因转录强度，并最终筛选出肿瘤检测和治疗或靶向定位的候选基因。MB49肿瘤在小鼠中生长很快。这个皮下接种的模型可以在一周内检测到肿瘤，并且可以监测每天的生长速度。MB49细胞通过尾静脉注射后，在16天内转移到肺部。注入膀胱后，MB49细胞可以存活20-40天。腺病毒载体可以用作基因转移的工具。到目前为止，作用最强的转移增强子是Clorpactin，也叫oxvchlorosene。MB49细胞还能表达肿瘤相关抗原如膀胱癌-4、前列腺干细胞抗原和前列腺的6-跨膜上皮细胞抗原。如果对膀胱的基因修饰和已知肿瘤抗原可以用于肿瘤治疗的话，MB49模型就可以用作对肿瘤进行免疫基因治疗的一个新途径。