沙纳唑合并γ射线对在体小鼠骨髓粒系造血祖细胞的影响

目的 :研究沙纳唑直接给药以及合并γ射线照射处理对在体小鼠骨髓粒系造血祖细胞 (CFU -GM )集落形成的影响。方法 :通过对小鼠骨髓CFU -GM培养的检测 ,观察从小鼠尾静脉注射不同剂量沙纳唑对小鼠造血系统的影响 ;并于不同放射剂量照射前30min从小鼠尾静脉注射不同剂量沙纳唑 ,观察沙纳唑合并γ射线照射处理对小鼠造血系统的影响。结果 :静脉注射沙纳唑对在体小鼠骨髓CFU -GM集落形成抑制作用较小 ;沙纳唑合并γ射线照射处理后对小鼠骨髓CFU -GM的抑制作用与单一放射照射处理结果相似。结论 :沙纳唑直接给药对在体小鼠骨髓CFU -GM无明显细胞毒性作用 ,合并放射照射处理对放射照射所致小鼠骨髓CFU -GM的抑制没有明显协同作用。

沙纳唑对体外培养的小鼠骨髓粒系造血祖细胞的放射增敏作用

目的:本实验旨在研究沙纳唑以及合并γ射线照射对体外培养小鼠骨髓粒系造血祖细胞(CFU-GM)集落形成的影响,分析沙纳唑是否对其有放射增敏作用。方法:从小鼠骨髓分离CFU-GW,在37℃、5％CO_2条件下培养,当细胞进入呈指数生长期,分别在培养液中加入一系列浓度沙纳唑(0,1,5,12.5,25,50,100,200,400,800μg/ml)进行孵育,接受^(60)Coγ射线照射(剂量为0,0.5,1,2,3,4Gy),观察细胞集落形成比。为评价沙纳唑对CFU-GM的放射增敏性,将CFU-GM接受沙纳唑和γ射线照射(2Gy)处理以及两者合并处理来评价沙纳唑对CFU-GM的放射增敏作用。结果:(1)沙纳唑对体外CFU-GM集落形成有明显细胞抑制作用,且随剂量增加作用增大。沙纳唑在低剂量(低于200μg/ml)对CFU-GM集落形成抑制作用呈线性关系(r=0.9987,P<0.01),IC_(20)和IC_(50)分别为50和120μg/ml。(2)放射照射对CFU-GM也有明显抑制作用,饱和剂量和D_0值分别是2.0和0.72Gy。(3)用沙纳唑联合放射照射处理CFU-GM后,对CFU-GM的抑制作用比单一处理都要强,但经统计学分析沙纳唑与放射照射之间无协同作用。结论:沙纳唑对体外培养小鼠骨髓粒系造血祖细胞有细胞毒性作用,但在低于IC_(20)剂量下复合放射照射对CFU-GM集落形成无放射增敏作用。

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞对粒-巨噬系祖细胞生长的影响

为了进一步阐明放射损伤复合烧伤(放烧复合伤)时骨髓造血基质细胞支持粒-巨噬系祖细胞造血能力的变化,采用小鼠骨髓基质细胞体外融合培养和粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)培养的方法,观察了5Gy照射复合15％Ⅲ度烧伤时基质细胞对支持CFU-GM生长的影响。结果表明:①单纯5Gy照射,单纯烧伤及放烧复合伤后,其骨髓基质细胞支持正常粒-巨噬系祖细胞造血的能力明显下降,以伤后3-5天最为显著,伤后10天仍未恢复至正常;②当骨髓基质细胞和粒-巨噬系祖细胞均受到致伤因素作用时,单纯照射及放烧复合伤组的CFU-GM形成能力下降更为明显,至正常对照组的10％以下,单纯烧伤组也有明显下降,但恢复较快;③在本研究所涉及的各种情况下,损伤的效应均有伤后3-5天达最低值的规律,之后可不同程度地恢复。实验结果提示,在上述损伤因素的作用下骨髓基质细胞的功能确已受到了不同程度的损伤,因此在治疗由此所引起的造血功能障碍时,同时加强促进基质细胞修复的措施,可能会取得更满意的疗效。

乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周白细胞的影响

目的探讨乌贼墨对小鼠造血干细胞、粒-单系祖细胞及外周血WBC的影响。方法用不同剂量的乌贼墨灌胃正常小鼠、环磷酰胺(Cy)和辐射骨髓损伤模型小鼠,采用造血祖细胞体外培养方法和实验血液学技术,检测小鼠骨髓造血干细胞生成数(CFU-S)、粒-单系祖细胞集落生成数(CFU-GM)和外周血WBC数量。结果乌贼墨能够显著提高正常小鼠CFU-S,CFU-GM和外周血WBC数量,有效拮抗模型小鼠体内CFU-S,CFU-GM及外周WBC的降低,并显著促进模型小鼠上述各指标的恢复。结论乌贼墨具有显著的促进小鼠骨髓粒系造血作用。其作用机制可能通过调节机体的免疫机能,诱导机体产生粒/单核细胞集落刺激因子和多种细胞因子,促进造血细胞的增殖,并诱导造血细胞向粒单系细胞分化。

黄芪对辐照小鼠粒-单系造血祖细胞的影响

目的 :探讨黄芪对造血功能的影响及作用机制。方法 :采用造血祖细胞体外培养和体内扩散盒植入技术 ,观察黄芪对辐照小鼠粒 单系造血祖细胞 (CFU GM)的影响。结果 :体内培养证明 ,辐照前、后用药组CFU GM分别为 (2 7 14± 5 88)个 / (4× 10 5BMC)和 (2 6 38± 4 90 )个 / (4× 10 5BMC) ,均较辐照对照组 (16 5 8± 3 37)个 / (4×10 5BMC)明显增高 (P <0 0 1) ,而体外培养未显示刺激活性。结论 :黄芪可刺激体内造血干细胞的增殖与分化 ,对辐照小鼠的骨髓具有保护作用。

四生汤促进骨髓粒系造血祖细胞增殖的实验研究

四生汤促进骨髓粒系造血祖细胞增殖的实验研究＊凌昌全１史剑慧２陈哲１张红武１（１第二军医大学附属长海医院中医科上海２００４３３）（２上海市放射医学研究所上海２０００３２）在应用四生汤（又名“减毒一号”）减轻放疗所致患者造血功能损伤（尤其是外周血白细胞减...

小鼠骨髓基质细胞对粒系祖细胞生长调控的实验研究

目的 研究放射损伤小鼠骨髓基质细胞对粒系祖细胞生长的影响。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞贴壁培养法和粒系祖细胞 (CFU GM)培养法。结果 伤后 3～ 7d ,有基质细胞贴壁的CFU GM生长明显低于无贴壁组 ;伤后 14d贴壁层形成后 ,放射损伤组的CFU GM生长明显低于正常对照组 ;放射损伤后 3～ 7d ,骨髓基质细胞可抑制正常CFU GM生长 ,用薄层琼脂分隔基质细胞贴壁层与靶细胞 ,其抑制作用减弱。当无外源性集落刺激因子 (CSF)时 ,基质细胞贴壁层对CFU GM生长仍显示一定刺激作用。结论 辐射使骨髓基质细胞功能受到一定损伤 ,但在放射损伤造血修复与重建过程中 ,骨髓基质细胞仍起着“刺激”与“抑制”

人参皂甙促进骨髓损伤恢复作用的观察——粒系造血祖细胞水平变化

本实验结果表明,轻度电离辐射所致小鼠骨髓损伤,其粒系造血祖细胞损伤较严重,恢复较慢;轻度苯中毒小鼠,其粒系造血祖细胞损伤较轻,恢复较快。人参皂甙对苯所致的骨髓损伤似有促进恢复作用,而对电离辐射所致的骨髓伤损促恢复作用不明显。

小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液及其超滤组分对粒巨噬系祖细胞生长的影响

本研究通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞系细胞,收集无血清条件培养液(mBMECCM),将其作多级串联超滤,获得分子量大于10、3～10、1～3、05～1kD和小于05kD超滤组分。进行粒巨噬系造血祖细胞集落形成试验,检测了它们的作用。mBMECCM和3～10kD组分对粒巨噬系祖细胞(CFUGM)生长未见明显影响,而分子量大于10kD和05～1kD组分促进CFUGM的增殖,分子量1～3kD和小于05kD组分则抑制CFUGM的增殖。这4种超滤组分对CFUGM生长的效应均有剂量依赖性。这些结果提示,在体外培养条件下,小鼠骨髓内皮细胞分泌若干种活性成分。

补髓生血冲剂对正常小鼠造血干细胞和粒系祖细胞的影响

补髓生血冲剂是我院治疗再生障碍性贫血中药复方,临床应用已十多年,为了进一步了解本方药对机体造血功能的调控作用,我们用内、外源性脾结节法和体内扩散盒半固体培养法观察了补髓生血冲剂对造血干细胞(CFU-S)和粒系祖细胞(CFU-D)的影响。 1 材料和方法 1.1 动物:健康昆明系封闭群小鼠,雌雄各半,6～10周龄,体重20～25g,黑龙江中医药大学动物实验中心提供。 1.2

放射损伤对骨髓基质细胞支持小鼠粒-巨噬系祖细胞生长的影响

为阐明放射损伤时骨髓造血基质细胞支持粒 -巨噬系祖细胞造血能力的变化。采用小鼠骨髓基质细胞体外融合培养和粒 -巨噬系祖细胞集落 (CFU -GM )培养法 ,观察 5Gy照射对基质细胞支持小鼠CFU -GM生长的影响。结果表明 ,经 5Gy照射后 ,骨髓基质细胞支持正常粒 -巨噬系祖细胞造血的能力明显下降 ,以伤后 3- 5d最为显著 ,伤后 10d仍未恢复至正常 ;当骨髓基质细胞和粒 -巨噬系祖细胞均受到致伤因素作用时 ,照射组的CFU -GM形成能力下降更为明显 ,至正常对照组的 10 %以下。说明放射损伤后骨髓基质细胞的功能受到了不同程度的损伤 ,因此 ,在治疗由此所引起造血功能障碍的同时 ,应加强促进基质细胞修复的措施 ,可能会取得更满意的疗效。

人参茎叶皂苷对体外条件下小鼠骨髓间充质干细胞和粒-巨噬系祖细胞增殖的影响

目的:探讨人参茎叶皂苷(GSL)在体外培养条件下对小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)和粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)生长的影响。方法:在小鼠骨髓细胞液体培养体系和半固体培养体系中加入不同浓度的GSL,应用体外集落形成法检测GSL对小鼠MSC和CFU-GM增殖的影响。结果:在培养体系中GSL浓度为25μg/ml时,MSC和CFU-GM集落产率与对照组无明显差异(P>0.05);50～200μg/ml的范围内,MSC和CFU-GM集落产率显著高于对照组(P<0.05),其中浓度为100μg/ml时效应最明显;但在400μg/ml时,MSC和CFU-GM集落产率却低于对照组(P<0.05)。结论:GSL在一定浓度范围内对体外培养条件下的小鼠骨髓MSC具有生长促进作用,而在高浓度时表现出生长抑制作用。

小鼠骨髓内皮细胞条件培养液支持卵黄囊造血干/祖细胞的体外生长

目的观察小鼠骨髓内皮细胞条件培养液（ｍＢＭＥＣ－ＣＭ）对卵黄囊造血干／祖细胞体外生长的支持作用。方法取妊娠第８．５天的卵黄囊，经消化后获得卵黄囊细胞，取卵黄囊非贴壁细胞加入含１０％ｍＢＭＥＣ－ＣＭ和１０％ＦＢＳ的ＤＭＥＭ中培养２４ｈ后，收集细胞做半固体培养。结果ｍＢＭＥＣ－ＣＭ在液体培养体系中能扩增卵黄囊造血干／祖细胞使粒－巨噬系集落形成单位（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ－ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍｉｎｇ ｕｎｉｔ，ＣＦＵ－ＧＭ）和高增殖潜能集落形成细胞（ｈｉｇｈ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ－ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍｉｎｇ ｃｅｌｌ，ＨＰＰ－ＣＦＣ）的产率增加，经２４ｈ液体培养后的ＣＦＵ－ＧＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ的数目分别为培养０ｈ对照组的１１９．５％和１３０．８％（Ｐ＜０．０５＝；ｍＢＭＥＣ－ＣＭ联合ｆｌｔ３配基（ｆｌｔ３ｌｉｇａｎｄ，ＦＬ）和血小板生成素（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）后，其扩增ＣＦＵ－ＧＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ的能力明显增强，ｍＢＭＥＣ－ＣＭ联合ＦＬ和ＴＰＯ经２４ｈ液体培养后的ＣＦＵ－ＧＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ的数目分别为培养０ｈ对照组的１３２．０％和１７６．９％?

四物汤及各单味药的含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落(CFU-GM)的影响

目的 :研究四物汤及各单味药对粒系 -巨系造血祖细胞集落 (CFU - GM)的影响 ,更近于真实地反映药物在体内作用的实际情况 ,以进一步探讨四物汤补血作用的配伍机制。方法 :采用血清药理学体外实验法。结果 :四物汤能明显促进造血祖细胞的增殖 ,单味药当归的作用最强 ,单味药熟地黄、川芎的作用也较正常对照组有增强趋势 ,而单味药白芍对 CFU - GM的增殖似无作用。几种受试药的作用强弱顺序可排列如下 :当归 >四物汤 >川芎 >熟地黄 >白芍。结论 :上述结果提示在促进 CFU - GM的增殖方面 ,四物汤的生血补血作用源于当归 ,川芎与熟地黄似有一定的协同作用 ,而白芍不表现协同作用。

商陆素-脾细胞条件培养基对小鼠骨髓造血祖细胞作用的研究

目的 :研究商陆素 -脾细胞条件培养基 (PWM-SCM)对小白鼠骨髓造血祖细胞的作用。方法 :用 micro-ELISA方法测定 PWM-SCM中 IL-2、IL-3、IL-4和 IL-6的含量 ,在 CFU-GM和CFU-E培养体系中加入 PWM-SCM,观察其对造血祖细胞的作用。结果 :PWM-SCM中 4种细胞因子的含量 :IL -2为 72 .5± 1 .1 pg/ml,IL -3为 43 3 .3± 1 1 .6pg/ml,IL -4为 2 8.9± 0 .4pg/ml,IL -6为 1 43 .3 pg/ml,其测定值均高于对照组 RPMI-1 64 0完全培养基中测定的含量 (P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。骨髓造血祖细胞培养显示 ,PWM-SCM对 CFU-GM无影响 ,但 CFU-E的集落数由 6.2± 1 .4增加到 3 4.0± 2 .5 ,有非常显著性差异 (P<0 .0 0 1 )。结论 :PWM-SCM中含有多种细胞因子 ,对小白鼠骨髓造血祖细胞有集落刺激活性 ,对 CFU-E的形成有协同促进作用。

当归补血汤及不同提取部分含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落克隆的影响

目的 :以CFU -GM细胞集落形成数目为指标 ,探讨当归补血汤全方发挥功效的有效部分或有效部位。方法 :用极性由小到大的 4种有机溶剂依次萃取全方水煎液 ,所得各供试部分灌胃及供试各部分组合灌胃 ,取血清 ,培养骨髓细胞 (CFU -GM)。结果 :未发现某一供试部位对CFU -GM细胞集落形成作用强度等同全方 ,其中氯仿、乙酸乙酯供试部分较强 ;各部分相互组合后作用增强 ,其中氯仿与正丁醇部分组合的血清、氯仿与乙酸乙酯组合的血清较强 ,但仍弱于全方。结论 :能完全代表全方功效和物质基础的有效部分及组合部分可能不存在 。

复血康对小鼠骨髓造血祖细胞作用的实验研究

利用扩散盒方法观察了复血康煎剂对正常小鼠及骨髓抑制小鼠ＣＦＵ－Ｄ和ＣＦＵ－Ｅ的影响。结果表明，复血康煎剂不仅可提高正常小鼠ＣＦＵ－Ｄ及ＣＦＵ－Ｅ的产率，与正常对照组比较Ｐ＜０．０１，还可提高环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的ＣＦＵ－Ｄ及ＣＦＵ－Ｅ的产率，与模型对照组比较Ｐ＜０．００１，与正常组比较Ｐ＜０．０１。说明复血康煎剂能促进骨髓造血细胞的增殖、分化，并能促进损伤的骨髓造血祖细胞的增殖、分化，使其受损伤的骨髓恢复造血，推测复血康煎剂用于治疗再生障碍性贫血的临床疗效是可靠的。

ABO血型不合骨髓移植的骨髓粒单祖细胞和造血功能的动态研究

作者通过两例ABO血型不合骨髓移植的骨髓粒单祖细胞(CFU-GM)和造血功能(外周血和骨髓)的定期连续观察,并与ABO血型相同的异基因骨髓移植比较,发现ABO血型不合骨髓移植不影响骨髓粒单祖细胞和造血功能恢复的速度,而骨髓CFU-GM恢复最快,可能成为植活的最早观察指标。

细胞因子联合应用对小鼠再障骨髓细胞体外扩增造血祖细胞的作用

目的：探讨细胞因子(IL-3，IL-6，IL-11，rhG-CSF)联合应用对小鼠再障骨髓细胞体外扩增造血祖细胞(CFU-GM，CFU-MK，CFU-E)的作用。方法：将小鼠再障分别皮下注射同浓度不同组合的细胞因子(rhG-CSF，IL-3+rhG-CSF，IL-6+rhG-CSF，IL-11+rhG-CSF，IL-3，IL-6，IL-11)300μg·kg^-1·d^-1，连续7d，观察骨髓细胞体外扩增CFU-GM，CFU-MK，CFU-E的形成数，结果：注射细胞因子后，小鼠再障骨髓细胞扩增CFU-GM，CFU-MK，CFU-E集落数明显高于对照组。联用细胞因子组比单独应用细胞因子组要强，尤其是CFU-MK的产率最为明显(P<0.01)。结论：细胞因子对造血祖细胞生长具有刺激作用，同时还具有协同扩增的作用。

人脐血、成人骨髓和小鼠骨髓成纤维细胞系祖细胞培养

自1989年美国Broxmeyer与法国医生合作首次开展脐血造血干细胞移植治疗Fanconis贫血获得成功之后,人们对以往常被丢弃的脐血的基础研究和临床应用研究的兴趣与日俱增。脐血中富含红系祖细胞BFU—E,粒单系祖细胞CFU—GM和巨核系祖细胞CFU-Meg并已基本被肯定,但是否存在成纤维细胞系祖细胞(CFU—F)