小鼠4-1BB分子的配体识别主要区域定位及结构分析

目的明确4-1BB分子的配体结合4-1BB分子胞外区的关键区域和基本结构。方法分区表达鼠4-1BB胞外区结构域及其天然配体，利用ELISA和Western blot等方法对4—1BB分子的配体识别结构域进行定位。结果4—1BB分子半胱氨酸富集结构域（cysteine-rich domain，CRD）Ⅱ是配体结合的主要结构域，不结合CRDⅠ和CRDⅢ。免疫刺激性抗4-1BB单克隆抗体2A，主要结合4—1BB分子CRD与跨膜区之间的连接区（STP区），同时对包括CRDⅡ的各个CRDs有弱识别，可封阻4-1BB与其配体结合。结论4-1BB分子配体的主要识别区位于4-1BB分子胞外CRDⅡ，具有空间结构特点，此为进一步分析结合区及其关键氨基酸提供了资料。