复方桂术胶囊对小鼠Lewis肺癌的抑制及TNF-α和IFN-γ的影响

目的研究复方桂术胶囊对肺癌荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及细胞因子的影响。方法以小鼠Lewis肺癌瘤株建立肺癌荷瘤动物模型,按分组给药10 d后解剖瘤体称瘤质量,采用ELISA双抗体夹心法,观察复方桂术胶囊灌胃肺癌荷瘤小鼠后血清中TNF-α及IFN-γ变化。结果复方桂术胶囊高、中剂量组均有显著的抑瘤作用(P<0.05),而低剂量组抑瘤作用则不显著(P>0.05)。中药高、中剂量组小鼠血清TNF-α均显著高于荷瘤模型组(P﹤0.05),中药低剂量组血清TNF-α升高不显著(P>0.05)。而中药高、中、低剂量组血清INF-γ均显著低于正常动物组(P﹤0.05),中药高剂量组小鼠血清IFN-γ极显著高于荷瘤模型组(P﹤0.001),中药中剂量和低剂量组升高不显著(P>0.05)。结论复方桂术胶囊对荷瘤肺癌小鼠具有抑瘤作用,并能提高其血清TNF-α和IFN-γ细胞因子的水平,从而提高荷瘤小鼠的免疫功能。

承气生血方对小鼠Lewis肺癌抑制作用的实验研究

目的:观察承气生血方对小鼠Lewis肺癌肿瘤细胞的抑制作用。方法:采用动物移植性肿瘤实验法,腋皮下接种Lewis肺癌,随机分组,口服给药后计算平均抑瘤率。以DNA探针进行肿瘤细胞荧光标记,荧光显微镜观察凋亡细胞形态,并以流式细胞术分析肿瘤细胞周期变化及凋亡百分率。结果:西药对照环磷酰胺组肿瘤抑制率达89.2%(P<0.01);承气生血方1.2g·kg-1d-1组肿瘤抑制率36.1%(P<0.01)。荧光显微镜观察,环磷酰胺组偶见凋亡细胞;承气生血方组可见大量凋亡细胞及坏死细胞。流式细胞分析,环磷酰胺组肿瘤细胞比例为25.89%,肿瘤细胞凋亡率4.48%,与模型组比较具有显著性差异(P<0.01);承气生血方1.2g·kg-1d-1组肿瘤细胞的比例虽然占49.07%,与模型组比较仍具有显著性差异(P<0.05),肿瘤细胞凋亡率平均达到29.94%,与模型组比较具有显著性差异(P<0.01)。结论:西药环磷酰胺可直接杀伤小鼠Lewis肺癌细胞,具有强大的细胞毒作用。承气生血方作用较缓和,同样具有抗小鼠Lewis肺癌作用,并可通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤细胞生长。

十全大补汤对小鼠Lewis肺癌转移及肿瘤细胞周期的影响

目的:探讨十全大补汤对小鼠肺癌转移、肿瘤细胞周期的影响。方法:50只C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤株,随机分为5组,给予不同浓度的十全大补汤进行干预,15天后处死小鼠,镜下计数小鼠肺表面转移结节数、采用流式细胞光度术(FCM)对各组肿瘤细胞周期进行检测。结果:十全大补汤低、中、高剂量组均可抑制转移灶,阻滞肿瘤细胞在G0/G1期,下调S期比例,以中剂量组明显,与模型组比较有统计学意义。结论:十全大补汤抗肿瘤转移机制可能与阻滞细胞在G1期,使S期细胞减少有关。

清金得生片抗小鼠Lewis肺癌作用的病理形态观察

目的：探讨清金得生片抗小鼠Lewis肺癌的作用机制。方法：将C57小鼠常规接种Lewis肺癌，随机分5组，设清金得生片高剂量组（3．5g／kg）、中剂量组（2．1g／kg）、低剂量组（1．05g/kg）、FT-207组、生理盐水组，连续灌胃给药10天，停药24h后拉颈处死，取肿瘤称重量，测量体积，肿瘤组织用10％甲醛固定，切片、HE染色。结果：清金得生片各剂量组肿瘤重量明显轻于生理盐水组，肿瘤体积明显比生理盐水组小，肿瘤重量抑制率为26．52％～46．96％，肿瘤体积抑制率为26．45％～45．06％。镜下可见部分瘤细胞体积缩小，核致密，染色质浓缩边集，个别瘤细胞核断裂形成大小不等的胞核小体，肿瘤细胞核分裂数明显减少，在大片坏死残留的肿瘤细胞周围有大量的淋巴细胞和白细胞浸润。结论：清金得生片有抑制Lewis肺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，以及提高机体免疫功能的作用。

丹参酮ⅡA磺酸钠联合顺铂对小鼠lewis肺癌细胞上皮性钙黏蛋白表达的影响

目的探讨活血化瘀药丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)联合顺铂(DDP)对小鼠lewis肺癌细胞上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法运用CCK8法摸索STS不同浓度对肿瘤细胞的抑制率影响;Western-blot检测E-cadherin蛋白的表达水平;Transwell小室侵袭转移实验检测各组细胞转移数量。结果浓度为0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL的STS与空白对照组比较,细胞的抑制率明显升高且呈浓度依赖性(P<0.05);STS联合DDP处理后,肺癌细胞侵袭能力和黏附能力明显减弱(P<0.05);药物处理后E-cadherin蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。结论活血化瘀药STS联合DDP能调节小鼠lewis肺癌细胞E-cadherin表达并抑制其侵袭转移,在肺癌转移过程中具有重要作用。

补虚散结胶囊对小鼠Lewis肺癌细胞增殖动力学的影响

目的:观察补虚散结胶囊对肺癌瘤株Lewis肺癌细胞增殖动力学的影响,探讨补虚散结胶囊治疗肺癌疗效机理。方法:用血清药理学方法进行增效试验,MTT法检测A590值,以每组测得光密度平均值作为药物效应值。结果:补虚散结胶囊配合替加氟组Lewis肺癌细胞存活率低于单纯替加氟组。结论:补虚散结胶囊配合化疗疗效满意,其疗效机理与补虚散结胶囊抑制肿瘤细胞增殖有关。

氯化汞对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响

目的:研究氯化汞MC对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。方法:采用流式细胞仪检测了MC对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响。结果:Lewis肺癌细胞表现为G0/G1期细胞数呈剂量依赖性增加,S期细胞数呈剂量依赖性减少。结论:MC能诱导小鼠Lewis肺癌细胞周期阻滞,使进入S期的细胞数明显减少,DNA复制受阻,进而死亡。

小鼠sFlt重组腺病毒抑制小鼠Lewis肺癌的生长

背景与目的实体肿瘤组织的生长具有血管依赖性,肿瘤新生血管生成已证实为肿瘤生长的控制点之一。本研究拟探讨编码小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt1)的复制缺陷型腺病毒对肿瘤新生血管和肿瘤生长的影响。方法应用小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)株建立肺癌模型进行抗肿瘤的研究,以编码sFlt1的复制缺陷型重组腺病毒(sFlt1Adv)作为治疗组,编码绿色荧光蛋白的复制缺陷型重组腺病毒(GFPAdv)和生理盐水作为对照组,皮下接种小鼠LLC一周后,经尾静脉给药2次(间隔2周),第二次给药后2周,处死全部实验鼠,剥离肿瘤组织并称重,用3%多聚甲醛固定,用抗CD31作免疫组织化学染色。结果sFlt1Adv治疗组肿瘤明显小于GFPAdv对照组和生理盐水组(P<0.01),其抑瘤率达到71.8%;治疗组的肿瘤微血管密度低于GFPAdv对照组和生理盐水组(P<0.01)。结论复制缺陷型重组腺病毒能抑制肿瘤组织的新生血管形成,从而抑制肿瘤的生长,有较好的应用价值。

PMA诱导小鼠Lewis肺癌细胞节律基因的表达

目的采用体外节律诱导剂以研究小鼠Lewis肺癌细胞近日节律基因的表达情况。方法采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)刺激体外培养的小鼠Lewis肺癌细胞(LLC),RT-PCR检测不同时间点mPer1的mRNA表达水平。Real-time PCR和RT-PCR检测mClock的mRNA表达水平。结果发现LLC细胞的节律基因mClock、mPer1存在近日节律振荡。结论经PMA诱导后,LLC细胞的节律基因存在近日节律振荡,为体外研究授时因子对近日节律的导引机制提供证据。

人参皂苷Rg3联合苏拉明对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及相关基因表达的影响

目的:分析联用人参皂苷Rg3和苏拉明对Lewis肺癌小鼠进行治疗对其移植瘤的抑制作用及相关基因表达的影响。方法:选取40只小鼠作为研究对象。对其中的4只荷瘤小鼠进行肿瘤接种,在接种后的2周提取移植瘤组织,对其余的36只小鼠构建Lewis肺癌小鼠模型。将这些小鼠模型平均分为对照组、人参皂苷Rg3组、苏拉明组、联合组。在对照组小鼠的腹腔内注射0.2 mL的生理盐水,在其胃内灌注0.2 mL的生理盐水,1次/d。在人参皂苷Rg3组小鼠的胃内灌注0.2 mL、含5 mg/kg人参皂苷Rg3的药液,在其腹腔内注射0.2 mL的生理盐水,1次/d。在苏拉明组小鼠的腹腔内注射0.2 mL、含10 mg/kg苏拉明的药液,在其胃内灌注0.2 mL的生理盐水,1次/d。在联合组小鼠的腹腔内灌注0.2 mL、含10 mg/kg苏拉明的药液,在其胃内灌注0.2 mL、含5 mg/kg人参皂苷Rg3的药液,1次/d。对四组小鼠均给药15 d。然后比较四组小鼠移植瘤的质量、抑瘤率、肿瘤微血管密度(MVD)值、MEK1/2 mRNA的相对表达量、MEK1/2蛋白的表达量。结果:人参皂苷Rg3组小鼠、苏拉明组小鼠、联合组小鼠移植瘤的质量均小于对照组小鼠,P<0.05;这三组小鼠的抑瘤率均高于对照组小鼠,P<0.05;这三组小鼠的MVD值均小于对照组小鼠,P<0.05;这三组小鼠肿瘤细胞中MEK1/2 mRNA的相对表达量均低于对照组小鼠,P<0.05。人参皂苷Rg3组小鼠、苏拉明组小鼠移植瘤的质量均大于联合组小鼠,P<0.05;这两组小鼠的抑瘤率均低于联合组小鼠,P<0.05;这两组小鼠的MVD值均大于联合组小鼠,P<0.05;这两组小鼠肿瘤细胞中MEK1/2 mRNA的相对表达量均高于联合组小鼠,P<0.05。四组小鼠肿瘤细胞中MEK1/2蛋白的表达量相比,P>0.05。结论:联用人参皂苷Rg3和苏拉明对Lewis肺癌小鼠进行治疗,可明显抑制其移植瘤的生长,并可降低其肿瘤细胞中MEK1/2 mRNA的相对表达量。

健脾补肾化瘀方对小鼠Lewis肺癌的抑瘤增效作用的研究

目的:探讨健脾补肾化瘀方对肺癌的抑制和化疗的协同增效作用。方法:选择小鼠移植性Lewis肺癌为模型,分别观察健脾补肾化瘀方以及与顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果:健脾补肾化瘀方对小鼠移植性Lewis肺癌有显著的抑制作用(P<0.01),并能显著增强DDP对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用(P<0.05)。结论:表明健脾补肾化瘀方对动物移植性肺癌有抑制和对化疗药物的协同增效作用。

小鼠Lewis肺癌细胞非对称分裂细胞系的建立及其干性特征

目的从小鼠Lewis肺癌细胞中分离建立非对称分裂细胞系,并初步鉴定其干性特征,为研究非对称分裂在癌症生物学中的作用奠定基础。方法通过8次连续悬浮聚球,随后5次单细胞克隆的方法,从小鼠Lewis肺癌细胞亲代细胞(LLC-parental cells)中得到非对称分裂细胞系(LLC-ASD cells);通过Brdu标记的免疫荧光实验检测LLC-ASD cells中细胞非对称分裂;进行RT-qPCR、克隆斑成斑实验、单细胞琼脂球形成实验、单细胞克隆形成实验对比两细胞系干性特征;并通过同种小鼠肺部移植成瘤实验和裸鼠皮下成瘤实验分别对比两种细胞系体内转移和成瘤能力。结果 LLC-ASD cells的非对称分裂比例达50%。LLC-ASD cells的克隆斑、悬浮球形成数量和单细胞克隆形成率均分别高于LLC-parental cells(P<0.05),LLC-ASD cells原位种植转移能力较LLC-parental cells明显增强,LLC-ASD cells的裸鼠皮下接种致瘤能力也高于LLC-parental cells(P<0.05)。结论成功建立了小鼠Lewis肺癌细胞非对称分裂细胞系(LLC-ASD cells),并且它表现出了一定干性特征,为研究非对称分裂在肿瘤中的作用奠定了基础。

健脾补肾化瘀方对小鼠Lewis肺癌的抑瘤增效作用的研究

目的:探讨健脾补肾化瘀方对肺癌的抑制和化疗的协同增效作用。方法:选择小鼠移植性Lewis肺癌为模型,分别观察健脾补肾化瘀方以及与顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果:健脾补肾化瘀方对小鼠移植性Lewis肺癌有显著的抑制作用(P<0.01),并能显著增强DDP对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用(P<0.05)。结论:表明健脾补肾化瘀方对动物移植性肺癌有抑制和对化疗药物的协同增效作用。

白细胞介素-18抑制小鼠Lewis肺癌生物学活性及其机制

80年代中期形成的生物调节理论产生了第四大肿瘤疗法-肿瘤生物治疗，在抗肿瘤基础研究与临床实践上愈益显示出其独特的疗效，可望为肿瘤防治开辟一个新的局面。白细胞介素-18（IL-18）是新近发现的多效能免疫调节细胞因子。本实验旨在观察其对小鼠Lewis肺癌移植瘤增殖生长与转移的抑制作用，并探讨其作用机制。

多西紫杉醇联合同步放射对小鼠Lewis肺癌生长抑制作用及机制的研究

随机临床试验和荟萃分析均发现同步放化疗可有效提高无法手术切除的Ⅲ期NSCLC患者的生存率，是目前的标准治疗模式，而多西紫杉醇联合同步放疗是目前比较推崇的肺癌综合治疗方案。实验通过观察多西紫杉醇同步结合放射的体内抗肿瘤效应，以期探讨其抗肿瘤活性及相关机制，为临床使用多西紫杉醇同步联合放疗提供理论依据。

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对小鼠Lewis肺癌细胞杀伤和诱导凋亡作用的研究

目的观察拓扑异构酶Ⅰ抑制剂（拓扑替康，TPT）对小鼠Lewis肺癌细胞杀伤和诱导凋亡作用。方法采用MTT法、AnnexinV染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析TPT对小鼠Lewis肺癌细胞的杀伤作用、凋亡作用，分析靶细胞杀伤、凋亡作用与Caspase的关系。结果TPT对靶细胞株具有较强的杀伤作用，而且具有明显的时间依赖性，同时，靶细胞出现凋亡表现。Caspase酶特异性抑制剂对凋亡具有一定的影响。结论唧对小鼠Lewis肺癌细胞具有较强的杀伤和诱导凋亡作用，其机理可能涉及到Caspase-8、Caspase-3的有序性活化。

吲哚美辛联合茶多酚对荷Lewis肺癌小鼠抗肿瘤作用的初步研究

目的探索吲哚美辛联合茶多酚对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用.方法建立C57小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤模型并随机分为4组:吲哚美辛组、茶多酚组、吲哚美辛联合茶多酚组和生理盐水对照组,每天灌胃给药1次,连续16 d.观察各组小鼠的出瘤时间、瘤体大小和肿瘤抑制率.结果与对照组相比,吲哚美辛和茶多酚低、高剂量对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤生长均有显著的抑制作用(P<0.05),二者联合应用低、高剂量对肿瘤的抑制作用高于单独用药(P<0.05).结论联合应用吲哚美辛和茶多酚对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤生长具有显著的抑制作用,且有一定增效作用.

pcDNA3.1(+)-mIL-12在Lewis细胞中生物活性的探讨

目的:建立稳定表达小鼠IL-12(mIL-12)的小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞系LLC/mIL-12,为进一步研究mIL-12的免疫调节机制及其抗肿瘤作用奠定基础。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-mIL-12,脂质体转染LLC细胞并测其表达,流式细胞仪(FCM)观察细胞周期和凋亡,G418筛选获得阳性克隆后大量培养并检测mIL-12活性。结果:pcDNA3.1(+)-mIL-12质粒构建正确并成功转导入LLC细胞,重组质粒在mRNA及蛋白质水平均高表达mIL-12,mIL-12使LLC细胞周期重新分布,并促进其凋亡。LLC/mIL-12细胞培养上清能明显引起刀豆蛋白A(ConA)激活的小鼠脾细胞增殖。结论:成功构建pcDNA3.1(+)-mIL-12真核表达质粒,建立具有mIL-12生物学活性的LLC细胞系。