小G蛋白与动脉粥样硬化

随着他汀类药物的多效性或降脂外作用被广泛研究,小G蛋白在心血管疾病中的作用越来越来受到关注。小G蛋白在调节血管内皮细胞功能、炎症细胞浸润和平滑肌细胞收缩、迁移、增殖以及基因表达等过程发挥重要作用,越来越多证据表明小G蛋白在动脉粥样硬化/再狭窄、血管痉挛、缺血再灌注损伤、肺动脉高压以及心肌肥厚等过程中扮演重要角色,靶向干预小G蛋白例如他汀或法舒地尔等为治疗这些心血管疾病提供一个新策略,现就小G蛋白与动脉粥样硬化的关系作一综述。

Ras超家族亚群A/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1在无机磷酸盐中诱导大鼠瓣膜间质细胞成骨分化的作用机制

目的探讨Ras超家族亚群A(RhoA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rock-1)在无机磷酸盐中诱导大鼠瓣膜间质细胞(VICs)成骨分化的作用机制。方法取8只雄性大鼠(购自上海西普尔必凯动物实验有限公司)的主动脉瓣膜消化培养至第3代后免疫荧光鉴定。小干扰RNA(siRNA)-RhoA转染VICs后用无机磷酸盐成骨培养基(IP-OIM)分别诱导转染组(RNAi),阴性对照组(NC)及空白对照组(CON)的成骨分化,并通过蛋白质印迹法(Western blot)与聚合酶链反应(PCR)评估转染后RhoA、Rock-1、Runt相关转录因子2(Runx-2)及骨钙素(OST)的变化;7 d行碱性磷酸酶(ALP)活性相关检测,14 d行钙含量相关检测评估其早期与晚期成骨分化趋势。用IP-OIM刺激转染后的VICs 60 min,并通过Western blot检测SMAD1/5/9的磷酸化变化。采用单因素方差分析。结果鉴定后的VICs转染siRNA-RhoA并用IP-OIM培养,经过Western blot及PCR检测后可知RNAi的RhoA(Western blot:0.330±0.020;PCR:0.357±0.060)及Rock-1(Western blot:0.366±0.020;PCR:0.383±0.040)比CON均出现表达下调(RhoA Western blot:t=36.680,P<0.05 PCR:t=10.610,P<0.05;Rock-1 Western blot:t=31.240,P<0.05 PCR:t=13.210,P<0.05),差异有统计学意义,RNAi的OST(Western blot:0.520±0.030;PCR:0.510±0.070)和Runx-2(Western blot:0.573±0.020;PCR:0.57±0.060)比CON也出现了下降(OST Western blot:t=16.630,P<0.05;PCR:t=6.970,P<0.05;Runx-2 Western blot:t=21.040,P<0.05;PCR:t=6.710,P<0.05),差异有统计学意义。在7 d的ALP染色中RNAi的颜色最浅,ALP活性检测中RNAi[(1.005±0.101)U/mg]活性比较NC[(2.042±0.116)U/mg]和CON[(1.931±0.136)U/mg]明显下降(t=10.570,P<0.05;t=9.400,P<0.05),差异有统计学意义。在14 d的相对钙含量测定中RNAi[(22.290±1.981)ng/L]钙含量比较NC[(41.100±2.440)ng/L]和CON[(41.760±1.215)ng/L]明显下降(t=10.530,P<0.05;t=14.510,P<0.05),差异有统计学意义;同样茜素红钙沉积染色中,也是RNAi颜色最浅。经IP-OIM分别刺激60 min,RNAi的SMAD1/5/9的磷酸化水平(0.337±0.030)比CON明显下降(t=25.480,P<0.05),差异有统计学意义。结论无机磷酸盐可通过RhoA/Rock-1引起瓣膜间质细胞的成骨分化,SMAD1/5/9的磷酸化在此过程中起重要作用。

Rho GTP酶与血管内皮通透性的研究进展

真核细胞中,已经鉴定的小G蛋白超过100多种,其组成一个超家族,在结构上被分为Ras,Rho,Rab,Sarl/Arf和Ran五个亚家族。目前已鉴定出的哺乳类动物的Rho蛋白有10种以上,分为Rho、Rac、Cdc42、Rnd、RhD和TTF。

Rho亚家族与肿瘤关系的研究进展

小分子G蛋白Rho（Pros-homologous，Ras同源物）主要包括Rho、Rac和Cde42三个亚家族，属于Ras超家族，是重要的细胞内信号转导分子，主要参与张力丝和粘着斑的形成，在肌动蛋白骨架的构建、增殖、黏附变形、游走、细胞周期调控及包括基因转录在内的许多基础生命活动中起关键作用。近年来研究发现，Rho基因家族的异常表达在肿瘤的发生发展中扮演重要角色，尤其是Rho亚家族及其下游的效应分子。

超微脑得健对脑缺血大鼠脑内Rho表达的影响

目的探讨超微脑得健对脑缺血大鼠脑内Rho的影响,揭示其可能作用机制。方法采用脑中动脉阻塞法复制大鼠局灶性脑缺血模型,将动物随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、脑得健原方组、超微脑得健全量组,超微脑得健1/3剂量组。采用RT-PCR法检测大鼠脑组织Rho mRNA表达。结果假手术组脑内有一定水平Rho mRNA表达,模型组Rho mRNA表达至7 d达到高峰。给药3d后各治疗组动物脑组织Rho mRNA含量较同时段模型组比较明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论超微脑得健能抑制脑缺血后Rho表达,可能为其促进脑缺血后神经功能恢复作用机制之一。