少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因突变分析及其真核表达载体的构建

目的克隆少汗型外胚层发育不良症(HED)eda-A1基因并进行突变分析,同时构建eda-A1基因编码序列突变型(M)和野生型(W)的真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步明析eda基因的功能奠定基础。方法设计含有BamHⅠ和HindⅢ的酶切位点的引物,从HED患者和正常人外周血淋巴细胞中提取总mRNA,利用RT-PCR法克隆eda-A1(M/W)基因cDNA序列;并运用BamHⅠ和HindⅢ双酶切pcDNA3.1(-)载体和eda-A1基因片段,将eda-A1(M/W)插入到pcDNA3.1(-)载体中,从而构建新的真核表达载体,命名为pcDNA3.1(-)-eda-A1-M和pcDNA3.1(-)-eda-A1-W。结果成功克隆少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因,并发现未见报道过的907位A→C错义突变,导致306位编码氨基酸由谷氨酰胺变异为脯氨酸;经PCR法、重组载体双酶切法、DNA测序验证,成功构建了pcDNA3.1(-)-eda-A1-W/M的真核表达载体。结论成功构建少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因(突变型和野生型)真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步研究该基因在牙齿发育中的生物学作用奠定了实验基础。

少汗型外胚层发育不良症患者机体产热以及耐热性研究

目的研究少汗型外胚层发育不良症(HED)患者运动过程中和运动后机体的产热和耐热性,分析皮肤散热措施的保护性作用,为研制针对HED患者的体外降温措施提供理论依据。方法选取12例HED男性患者和12例健康男性对照,在环境温度25℃和30℃,在跑步机上进行产热和耐热性实验,监测运动前后体温、心率、呼吸频率、血压、运动持续时间以及血浆盐浓度的变化。结果与对照组相比,HED患者体温明显升高(P<0.05),体温升高后持续时间长(P<0.05),运动持续时间短(F=9.985,P=0.005),速度增加值更低(F=7.158,P=0.014),血浆盐浓度升高(F=5.204,P=0.033);而心率、呼吸频率、血压的变化在HED患者组和对照组之间差异无统计学意义。应用皮肤散热措施后,HED成年组体温和运动持续时间与成年对照组比较差异无统计学意义。结论 HED患者运动时体温明显升高,运动结束后体温仍维持在较高水平,且同等条件下运动时间短;可采用适当的辅助散热措施,降低HED患者体温,以促进其运动和社交活动,恢复生活自信。

少汗型外胚层发育不良症相关基因及其蛋白

少汗型外胚层发育不良症(HED)是一种罕见的起源于外胚层组织,如牙、汗腺、毛发等发育异常的遗传性疾病。目前,国内外有关HED的报道多为临床病例分析,而有关分子水平研究的综述较少。下面就HED的类型、基因定位、基因突变、基因功能和信号途径几个方面概述HED相关基因及其蛋白功能的研究进展。

两个汉族少汗型外胚层发育不良家系患者EDA基因突变检测

目的:检测两个汉族少汗型外胚层发育不良家系患者少汗型外胚层发育不良基因(EDA)1、3、5、8、9外显子的突变情况。方法:从两个家系共16名成员中抽取7名成员,A家系4名、B家系3名。提取7人外周血全基因组的DNA,采用聚合酶链反应扩增目的基因后直接进行DNA序列测定,使用BLAST软件对测序结果进行比对分析,检测突变。结果:3、5、8外显子上存在G740A、G904A和A1165G点突变,1、8、9外显子上出现5种移码突变;家系A和家系B均有患者发生33delC移码突变和G904A点突变,且这两种突变在两个家系上下代之间传递。结论:少汗型外胚层发育不良的突变基因有很大异质性。33delC、G904A突变可能与少汗型外胚层发育不良的发生有关,33delC和G904A突变对两家系再发风险的预测具有一定的临床意义。

少汗型外胚层发育不良一家系EDA基因突变分析

目的分析X连锁少汗型外胚层发育不良家系的基因变异及遗传咨询。方法采用二代测序法查找先证者致病基因及其突变位点,Sanger测序验证。根据基因诊断结果对先证者母亲第2胎进行产前分子诊断。结果先证者男性,出生10天,因发热、特殊面容就诊。经基因检测发现EDA基因c.682_683delCCinsA杂合突变,母亲具有相同突变。第2胎经羊水穿刺,基因检测未发生以上突变。结论基因检测有助于明确少汗型外胚层发育不良家系患儿的遗传病因,在此基础上可对患儿家系进行遗传咨询和产前基因诊断。

少汗型外胚层发育不良症患者全唾液分析

目的研究少汗型外胚层发育不良症患者唾液流速和成分变化。方法测量HED男性患者、女性携带者、以及男性、女性正常对照组唾液流速和成分,对结果进行统计学分析。结果HED男性患者(18例)、女性携带者(15例)较正常对照组(男性30例、女性30例)唾液流速低,唾液无机成分和蛋白含量升高,淀粉酶活性降低。结论唾液流速减低,使HED患者更容易患口腔疾病,如龋病、念珠菌感染等;同时,唾液成分的改变也有助于HED的临床诊断。

少汗型外胚层发育不良综合征1例

报告1例少汗型外胚层发育不良综合征。临床检查:患儿全身毛发稀疏;口内检查:混合牙列,牙列缺损,牙槽嵴发育不良。诊断为少汗型外胚层发育不良综合征,并采用可摘局部义齿修复治疗,咀嚼功能恢复良好。

少汗型外胚层发育不良症的临床特点及义齿修复

少汗型外胚层发育不良症是一类相对常见的遗传性综合性疾病,先天性牙缺失是此类疾病的主要口腔表现。少汗型外胚层发育不良症患者通常就诊年龄较小,颌骨发育尚未完全,且常伴有牙槽突发育不良,故其义齿修复具有特殊性,对其进行"序列治疗"的观点也应运而生。本文就少汗型外胚层发育不良症的临床特点以及义齿修复作一综述。

NEMO基因新突变致少汗型外胚层发育不良伴免疫缺陷病1例

目的探讨1例少汗型外胚层发育不良伴免疫缺陷(ectodermal dysplasia and immunodeficiency,EDA-ID)患儿的临床特征和基因突变。方法患儿于2014年12月收入我院肾脏免疫科,根据其临床表现及家族史,常规免疫学筛查除外常见原发性免疫缺陷病(primary immunodeficiency disease,PID),qRT-PCR在mRNA水平检测患儿与对照(患儿父亲)IL-12/IFN-γ通路的完整性,并对患儿及其家系的NEMO基因进行分析。结果患儿反复发热,皮肤苍白干燥,头发稀疏,前额轻微突出,无牙胚发育,有真菌和卡介苗(BCG)感染。全血经BCG与IFN-γ联合刺激后,与单独的BCG刺激比较,患儿IL-12B的mRNA表达降低(P<0.05),而健康对照组IL-12B表达明显增加。患儿NEMO基因第10外显子出现一个纯合错义突变位点c.1241T>A,p.V414D,其母亲与二姨为相同位点的杂合突变。结论反复发热伴BCG感染的男性患儿合并皮肤苍白无汗、毛发稀疏、无牙等外胚层发育不良表型时,应考虑NEMO基因突变,母系家族色素失禁的病史有助于诊断,结合IL-12/IFN-γ轴的功能完整性检测和基因分析,可以早期诊断EDA-ID。

X-连锁少汗型外胚层发育不良家系的基因突变分析及产前诊断

背景X-连锁少汗型外胚层发育不良(XL-HED)是一种罕见的遗传性疾病,患者常伴有严重的汗腺分泌异常,但目前临床尚无有效的治疗方法,因此遗传咨询及准确的产前诊断是预防和减少此类患儿出生的有效措施。目的对一个XL-HED家系进行基因突变分析,为该家系成员提供准确病因诊断、遗传咨询及产前诊断。方法抽取先证者及与其有血缘关系的家系成员外周静脉血,采用目标芯片捕获高通量测序法进行基因检测,并对突变基因进行Sanger测序验证。在确定家系突变基因位点后,抽取先证者姐姐(孕妇)羊水进行产前诊断。结果先证者为Ectodysplasin A(EDA)基因半合子突变,突变位点为c.467G>A(p.Arg156His),为已知致病性突变。先证者姐姐为EDA基因杂合突变,但胎儿不存在EDA基因突变,先证者姐姐可以继续妊娠。结论先证者EDA基因半合子突变是XL-HED的致病性突变,应重视先证者家系成员的基因突变分析和产前诊断,以减少及避免少XL-HED患儿的出生。

少汗型外胚层发育不良合并重症牛牙症1例

少汗型外胚层发育不全(hypohidrotic etcodermal dysplasia,HED),指胚胎时期外胚层发育异常导致的外胚层的衍生组织形态和功能出现异常或不发育,常表现为汗腺发育不良,先天缺牙等[1]。牛牙症是一种以髓腔垂直方向伸长为特点的牙齿发育异常,常与唇腭裂,发-骨-牙综合征等疾病伴发,临床上非常罕见[2]。目前,多采用牛牙症指数(taurodontism index,TI)作为牛牙症的诊断标准[3]。

少汗型外胚层发育不良与牙齿先天缺失的联系研究

本文报告1例少汗型外胚层发育不良综合征。临床检查:患儿全身毛发稀疏;口内检查:混合牙列,牙列缺损,牙槽嵴发育不良。少汗型外胚层发育不良是一种具有典型口腔临床症状的遗传性疾病,其主要表现为牙齿缺失。所以,认识少汗的外胚细胞异常在口腔医师中是很有价值的。经临床确诊为少汗外胎生长迟缓症候群,经可摘式部分义齿修补后,患者的咀嚼能力得到了较好的改善。本文综述了少汗型的原因,分类,临床表现和治疗。

新生儿少汗型外胚层发育不良1例

本文报道1例新生儿期起病的外胚层发育不良患儿,生后皮肤干燥、脱屑,生后14 d出现反复发热,基因检测为EDA基因c.686del p.(P229Lfs*51)移码变异。该病以对症支持治疗为主,早期通过基因检测明确诊断可改善患儿预后。

有汗型外胚层发育不良家系调查及基因突变研究

目的:报告1例有汗型外胚层发育不良家系的致病基因突变。方法:收集患者临床资料,提取先证者及其部分亲属外周血DNA进行全外显子测序,Sanger测序验证致病突变。结果:先证者GJB6基因编码区发生杂合无义突变c.263C>T(p.A88V),突变来自其母亲。在其4位患病亲属中检测到相同突变,在其父亲(正常人)中未检测到此突变。结论:GJB6基因c.263C>T(p.A88V)杂合突变是该家系的遗传学致病因素。

少汗型外胚层发育不良与牙齿先天缺失的联系

少汗型外胚层发育不良是一种具有典型口腔临床症状的遗传性疾病,患者常因存在缺牙症状于口腔修复科或正畸科就诊。因此,了解少汗型外胚层发育不良对于口腔医生具有一定的临床意义。文章就少汗型外胚层发育不良的病因、分类、临床表现及治疗方法做一概述。

先天性外胚层发育不良一家系基因突变检测

报道一例先天性外胚层发育不良,该病是一种罕见的异质遗传性疾病,大多为X连锁遗传。本文患者全身毛发稀疏、无汗液分泌伴部分牙齿缺如49年,其女儿部分牙齿缺失,智力二级残疾。该患者基因检测发现突变位点EDA c.463C>T(p.R155C),另一可疑变异位点PRKD1 c.535+3A>G(splicing),变异来源是患者母亲。先天性外胚层发育不良目前尚无有效且获得批准的治疗方法,以对症治疗为主,及时产前筛查诊断可为携带EDA突变的患者提供终止妊娠和产前治疗的机会。

一个X连锁少汗型外胚层发育不良家系的EDA基因c．822G〉T突变分析

目的对1个少汗型外胚层发育不良家系进行ectodysplasinA（EDA）基因序列分析，为家系成员提供准确病因诊断和遗传咨询。方法抽取家系中先证者及有血缘关系的家系成员外周静脉血，常规提取基因组DNA，应用聚合酶链式反应、DNA测序技术分析EDA基因编码区序列；选择103名无血缘关系正常人作为对照。结果在先证者及另1例男性患者的EDA基因第7外显子区域检出C．822G〉T突变，导致第274位的色氨酸变成了半胱氨酸（P．W274C），该突变位点未见文献报道。家系中的5名女性成员中检出C．822G〉T杂合突变，正常男性成员及103名正常对照均不存在此突变。结论EDA基因c．822G〉T突变为导致该家系成员少汗型外胚层发育不良的致病突变。